杜 紅，孫弟芬，易 鑫，唐子婷，徐 丹，舒 剛

（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，成都 611130）

抗菌肽（antibacterial peptides，ABPs）是動(dòng)物先天免疫防御系統(tǒng)的重要組成部分，是由機(jī)體產(chǎn)生的一種相對(duì)分子量小、具有生物活性的多肽，具有廣譜抗菌、抗病毒、抗原蟲和提高免疫力等多種生物學(xué)功能[1]。由于堿性殘基的存在，大多數(shù)昆蟲抗菌肽都是陽(yáng)離子分子，具有良好的抑菌活性[2]。與天然類似物相比，人工合成的抗菌肽具有合成效率高、成本低且能更顯著提高機(jī)體抗菌和免疫調(diào)節(jié)效果等特點(diǎn)[3]。有研究表明，作為飼料添加劑的人工抗菌肽，能顯著下調(diào)家禽腸道中致病性大腸桿菌的數(shù)量，防止病原菌的定植，提高免疫，同時(shí)具有改善動(dòng)物健康和促進(jìn)生長(zhǎng)的潛力[4]?？咕哪軌蛲ㄟ^(guò)調(diào)節(jié)腸道微生物區(qū)系的組成來(lái)調(diào)節(jié)固有層T細(xì)胞的反應(yīng)，從而維持促炎和抗炎免疫反應(yīng)之間的平衡[5]。近年來(lái)，抗菌肽在動(dòng)物養(yǎng)殖中應(yīng)用廣泛，在日糧中添加抗菌肽能提高肉雞、斷奶仔豬和兔子的生長(zhǎng)和免疫功能，同時(shí)對(duì)抗應(yīng)激和腹瀉治療效果顯著[6-8]。綜上所述，抗菌肽具有提高免疫力、抑制耐藥菌株、改善腸道健康和促進(jìn)生長(zhǎng)等多種作用，是理想的飼料添加劑之一。然而，國(guó)內(nèi)外對(duì)抗菌肽作為飼料添加劑在鵪鶉生產(chǎn)中應(yīng)用的研究報(bào)道較少。因此，本試驗(yàn)通過(guò)在朝鮮鵪鶉飼糧中添加不同比例的抗菌肽，觀察其對(duì)朝鮮鵪鶉生長(zhǎng)性能、免疫功能、血清抗氧化及腸道發(fā)育影響，以期為抗菌肽在鵪鶉綠色養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)動(dòng)物朝鮮鵪鶉由眉山佳業(yè)鵪鶉合作社提供；試驗(yàn)用品抗菌肽采購(gòu)自四川華德生物工程有限公司，由豬防御素(DHYICAKGGTCNFSPCPLFN RIEGTCYSGKAKCCIR)和蒼蠅防御素(ATCDLL SGTGVKHSACAAHCLLRGNRGGYCNGRAICVCRN)按50%比例混合而成，生產(chǎn)批號(hào)：20160501。試劑盒均采購(gòu)自南京建成生物工程研究所，包括總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)，細(xì) 胞 因 子 IL2 和 IFN-γ，生 產(chǎn) 批 號(hào) ：20160522。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采取單因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)原則，選取1 200只1 d體重相當(dāng)（7±1）g的健康雌性朝鮮鵪鶉，隨機(jī)分為4組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)75只。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，抗菌肽Ⅰ組、抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.1%、0.2%和0.4%抗菌肽，試驗(yàn)期為35 d，預(yù)試期7 d，正試期28 d。

1.3 基礎(chǔ)飼糧和飼養(yǎng)管理

采用三層網(wǎng)床平養(yǎng)，小間分區(qū)，自由采食與飲水。嚴(yán)格按照常規(guī)飼養(yǎng)管理控制溫度、濕度和光照，每天記錄喂料量；按常規(guī)正常免疫程序進(jìn)行免疫接種?；A(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分參照表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

1.4 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定

試驗(yàn)期內(nèi)每日觀察朝鮮鵪鶉的行為和精神狀況，記錄和解剖死亡鵪鶉；以重復(fù)為單位，準(zhǔn)確記錄正式期內(nèi)每周每個(gè)重復(fù)的給料量和剩余量，分別于試驗(yàn)第7、14、21和35天早晨稱朝鮮鵪鶉空腹體重，根據(jù)耗料量和體重，統(tǒng)計(jì)每周平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。公式如下：

平均日采食量(ADFI)=試驗(yàn)期采食量/試驗(yàn)天數(shù)

平均日增重(ADG)=(試驗(yàn)?zāi)w重-試驗(yàn)初體重)/試驗(yàn)天數(shù)

料重比(F/G)=日采食量/日增重

1.4.2 血清和組織器官采集

試驗(yàn)第21天和35天，以重復(fù)為單位，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取8只朝鮮鵪鶉，每組共計(jì)32只，記錄活體體重，采取頸靜脈采血方式收集血液。室溫靜置2 h后，3 500 r/min離心10 min，分離和分裝血清，用于抗體、細(xì)胞因子和抗氧化指標(biāo)的測(cè)定；之后按照常規(guī)方式進(jìn)行解剖，采集鵪鶉免疫器官（胸腺、脾臟和法氏囊）用于免疫器官指數(shù)測(cè)定；分離各段小腸，測(cè)定各段腸道的長(zhǎng)度和重量；試驗(yàn)第35天，采集每組8只朝鮮鵪鶉的2 cm左右的空腸腸段用于制作石蠟切片[9]。

1.4.3 免疫功能測(cè)定

1.4.3.1 免疫器官指數(shù)計(jì)算

免疫器官指數(shù)（g/kg）＝器官重量（g）/體重（kg）。

1.4.3.2 血清新城疫抗體效價(jià)

通過(guò)血凝-血凝抑制（HA-HI）試驗(yàn)測(cè)定朝鮮鵪鶉血清新城疫抗體效價(jià)。

1.4.3.3 血清細(xì)胞因子含量測(cè)定

采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELASA）測(cè)定各重復(fù)朝鮮鵪鶉血清中白細(xì)胞介素-2（IL-2）、干擾素-γ（IFN-γ）含量，試驗(yàn)步驟嚴(yán)格南京建成試劑盒按照說(shuō)明書執(zhí)行。

1.4.4 血清抗氧化指標(biāo)測(cè)定

按照試劑盒步驟說(shuō)明，采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定朝鮮鵪鶉血清中總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性、采用FRAP法測(cè)定總抗氧化能力（T-AOC）、采用TBA法測(cè)定丙二醛（MDA）含量[10]。

1.4.5 腸道發(fā)育

1.4.5.1 腸道長(zhǎng)度和重量測(cè)定

常規(guī)方式解剖后，分離各段小腸，測(cè)量各段小腸長(zhǎng)度和重量。

1.4.5.2 空腸形態(tài)學(xué)觀察

用4%甲醛溶液中固定空腸組織，固定完成之后進(jìn)行不同濃度乙醇脫水、二甲苯透明、浸蠟、包埋、切片、HE染色和中性樹脂封片等操作，在熒光顯微鏡下觀察空腸組織形態(tài)，拍照記錄，測(cè)量空腸隱窩深度和絨毛高度，計(jì)算腸絨毛高度與隱窩深度的比值（V/C）[11]。

1.4.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

原始數(shù)據(jù)用Microsoft Excel 2010軟件統(tǒng)計(jì)整理，然后采用SPSS 19.0軟件的ANOVA單因素方差統(tǒng)計(jì)分析，用最小顯著差數(shù)法（LSD）進(jìn)行多重比較，P<0.05為差異顯著判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 抗菌肽對(duì)朝鮮鵪鶉生長(zhǎng)性能的影響

基礎(chǔ)飼糧添加抗菌肽對(duì)鵪鶉生長(zhǎng)性能的影響見表2。由表2可知，7～14 d，所有抗菌肽試驗(yàn)組ADFI相較于對(duì)照組無(wú)顯著變化趨勢(shì)（P>0.05）；抗菌肽Ⅰ組、抗菌肽Ⅲ組ADG顯著高于對(duì)照組和抗菌肽Ⅱ組（P<0.05）；抗菌肽Ⅰ組、抗菌肽Ⅲ組F/G顯著低于對(duì)照組和抗菌肽Ⅱ組（P<0.05）。14～21 d，抗菌肽Ⅰ組、抗菌肽Ⅱ組ADFI顯著高于對(duì)照組和抗菌肽Ⅲ組（P<0.05）；抗菌肽Ⅱ組ADG顯著高于抗菌肽Ⅰ組（P<0.05）；抗菌肽Ⅱ組、抗菌肽Ⅲ組和對(duì)照組F/G顯著低于抗菌肽Ⅰ組（P<0.05）。21～28 d，與對(duì)照組和抗菌肽Ⅰ組相比，抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組ADFI和ADG都顯著升高（P<0.05），而各組料重比無(wú)顯著變化（P>0.05）。28～35 d，抗菌肽Ⅰ組ADFI顯著高于對(duì)照組、抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組（P<0.05）；抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組ADG顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；與對(duì)照組和抗菌肽Ⅰ組相比，抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組F/G顯著降低（P<0.05）。7～35 d整個(gè)試驗(yàn)階段，在ADFI方面，與對(duì)照組相比，所有試驗(yàn)組均有上升趨勢(shì)，但差異不顯著（P>0.05）；在ADG方面，抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組顯著高于對(duì)照組和抗菌肽Ⅰ組（P<0.05）；在F/G方面，抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組顯著低于對(duì)照組和抗菌肽Ⅰ組（P<0.05）。結(jié)果表明，隨著抗菌肽添加量的增加，鵪鶉生長(zhǎng)性能也逐步提高，但0.2%、0.4%抗菌肽添加量無(wú)顯著差異（P>0.05）。

表2 抗菌肽對(duì)鵪鶉生長(zhǎng)性能的影響Table 2 Effects of antimicrobial peptide on growth performance of quails

2.2 抗菌肽對(duì)朝鮮鵪鶉免疫功能的影響

基礎(chǔ)飼糧添加抗菌肽對(duì)鵪鶉免疫機(jī)能的影響見表3。由表3可知，21 d，所有抗菌肽試驗(yàn)組的法氏囊指數(shù)、脾臟指數(shù)與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P>0.05）；而抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組血清新城疫抗體效價(jià)水平顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；抗菌肽Ⅲ組胸腺指數(shù)顯著高于對(duì)照組和抗菌肽Ⅰ組（P<0.05）。35 d，抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組血清新城疫抗體效價(jià)水平和胸腺指數(shù)顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組脾臟指數(shù)顯著高于對(duì)照組和抗菌肽Ⅰ組（P<0.05）。

表3 抗菌肽對(duì)鵪鶉免疫機(jī)能的影響Table 3 Effects of antimicrobial peptide on immune function of quails g·kg-1

基礎(chǔ)飼糧添加抗菌肽對(duì)鵪鶉血清細(xì)胞因子的影響見表4。由表4可知，與對(duì)照組相比，不同濃度抗菌肽的添加對(duì)21 d鵪鶉血清IL-2和IFN-γ含量無(wú)顯著影響（P>0.05）。35 d，抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組鵪鶉血清IL-2和IFN-γ含量均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。結(jié)果表明，隨著抗菌肽添加量的增加，鵪鶉的免疫機(jī)能也逐步提高，但0.2%、0.4%抗菌肽添加量無(wú)顯著差異。

表4 抗菌肽對(duì)鵪鶉血清細(xì)胞因子的影響Table 4 Effects of antimicrobial peptide on cytokine contents in serum of quails ng/L

2.3 抗菌肽對(duì)朝鮮鵪鶉血清抗氧化指標(biāo)的影響

基礎(chǔ)飼糧添加抗菌肽對(duì)鵪鶉血清抗氧化指標(biāo)的影響見表5。21 d，與對(duì)照組相比，添加抗菌肽的所有試驗(yàn)組血清T-SOD和T-AOC均顯著升高（P<0.05），其中抗菌肽Ⅲ組T-AOC顯著高于抗菌肽Ⅰ組、抗菌肽Ⅱ組；抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組血清MDA含量顯著低于對(duì)照組和抗菌肽Ⅰ組（P<0.05）。35 d，所有抗菌肽試驗(yàn)組血清T-SOD和T-AOC均顯著高于對(duì)照組（P<0.05），其中抗菌肽Ⅲ組T-SOD和T-AOC均顯著高于抗菌肽Ⅰ組和抗菌肽Ⅱ組；所有抗菌肽試驗(yàn)組MDA含量顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。結(jié)果表明，隨著抗菌肽添加量的增加，鵪鶉的抗氧化能力也逐步提高。

表5 抗菌肽對(duì)鵪鶉血清抗氧化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of antimicrobial peptide on serum antioxidant indexes of quails

2.4 抗菌肽對(duì)朝鮮鵪鶉腸道發(fā)育的影響

基礎(chǔ)飼糧添加抗菌肽對(duì)鵪鶉腸道發(fā)育的影響見表6。21 d，在空腸長(zhǎng)度和重量方面，抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組顯著高于對(duì)照組和抗菌肽Ⅰ組（P<0.05）；在回腸長(zhǎng)度和重量方面，抗菌肽Ⅲ組回腸長(zhǎng)度顯著高于對(duì)照組、抗菌肽Ⅰ組和抗菌肽Ⅱ組（P<0.05），抗菌肽Ⅰ組和抗菌肽Ⅲ組回腸重量顯著高于對(duì)照組和抗菌肽Ⅱ組（P<0.05）。35 d，抗菌肽Ⅲ組十二指腸重量顯著高于抗菌肽Ⅰ組（P<0.05）；抗菌肽Ⅱ組和抗菌肽Ⅲ組空腸重量顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。

表6 抗菌肽對(duì)鵪鶉腸道發(fā)育的影響Table 6 Effects of antimicrobial peptide on intestinal development of quails

基礎(chǔ)飼糧添加抗菌肽對(duì)鵪鶉空腸形態(tài)的影響見表7。在空腸絨毛高度方面，添加抗菌肽的所有試驗(yàn)組都顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；抗菌肽Ⅰ組、抗菌肽Ⅱ組空腸隱窩深度顯著高于對(duì)照組和抗菌肽Ⅲ組（P<0.05）；與對(duì)照組相比，基礎(chǔ)飼糧添加抗菌肽對(duì)35 d鵪鶉空腸絨毛高度/隱窩深度無(wú)顯著影響（P>0.05）。結(jié)果表明，隨著抗菌肽添加量的增加，鵪鶉的腸道發(fā)育逐步提高，但0.2%、0.4%抗菌肽添加量無(wú)顯著差異。

表7 抗菌肽對(duì)鵪鶉空腸形態(tài)的影響Table 7 Effects of antimicrobial peptide on jejunal morphology of quails

3 討論

3.1 抗菌肽對(duì)朝鮮鵪鶉生長(zhǎng)性能的影響

動(dòng)物生長(zhǎng)狀況和腸道健康息息相關(guān)，目前一些飼料添加物的使用促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體腸道微生物平衡，如抗菌肽在動(dòng)物生長(zhǎng)性能方面的影響已有了一定的研究，Xie Z.等[12]發(fā)現(xiàn)在飼糧中添加抗菌肽能提高肉雞飼料轉(zhuǎn)化率、存活率和降低料重比。添加的重組抗菌肽可富集于雞的小腸中，促進(jìn)雞腸道發(fā)育和促進(jìn)養(yǎng)分的吸收，降低料重比[13]。本試驗(yàn)表明，與對(duì)照組相比，不同濃度抗菌肽的添加在所有時(shí)間段均能增加鵪鶉平均日增重，降低料重比，提高生長(zhǎng)性能，其中添加0.2%抗菌肽組效果最好。田志梅等[14]研究發(fā)現(xiàn)，抗菌肽是具有廣譜抑菌活性的肽類物質(zhì)，一方面主要通過(guò)與細(xì)菌細(xì)胞膜上受體特異性結(jié)合，膜內(nèi)外滲透壓發(fā)生紊亂，使其細(xì)胞壁或細(xì)胞膜的物理屏障遭到破壞；另一方面通過(guò)正負(fù)電荷相互吸引作用，改變細(xì)菌鞭毛的動(dòng)力學(xué)特性，從而抑制細(xì)菌生長(zhǎng)代謝，在畜禽養(yǎng)殖上有一定的應(yīng)用。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在基礎(chǔ)飼糧中添加抗菌肽提高了鵪鶉生長(zhǎng)性能，可能是由于抗菌肽的攝入，誘導(dǎo)腸道上皮細(xì)胞膜通透性改變來(lái)防止與上皮表面潛在病原微生物的相互作用和入侵，從而促進(jìn)腸道黏膜良好發(fā)育，增強(qiáng)腸道物理和化學(xué)屏障功能，從而提高消化吸收養(yǎng)分的能力。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，飼料中添加0.2%抗菌肽和0.4%抗菌肽均能顯著提高朝鮮鵪鶉生長(zhǎng)性能，且兩組在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著差異，考慮到成本，故0.2%抗菌肽最適宜。

3.2 抗菌肽對(duì)朝鮮鵪鶉免疫機(jī)能的影響

免疫器官指數(shù)是評(píng)價(jià)動(dòng)物機(jī)體免疫器官發(fā)育狀態(tài)及機(jī)體免疫功能強(qiáng)弱的指標(biāo)之一，在一定范圍內(nèi)免疫器官發(fā)育良好，免疫功能強(qiáng)，抵御外來(lái)微生物能力越強(qiáng)，機(jī)體自身能更好地維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，能高效進(jìn)行機(jī)體各項(xiàng)生理活動(dòng)，提高機(jī)體免疫力，就是提高機(jī)體抗病力[15]。本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，基礎(chǔ)飼糧中添加抗菌肽有提高免疫器官指數(shù)的趨勢(shì)，其中在正常范圍內(nèi)，0.4%抗菌肽組能顯著提高35 d鵪鶉的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)，表明抗菌肽在一定范圍內(nèi)能夠刺激免疫細(xì)胞，促進(jìn)免疫細(xì)胞、組織的生長(zhǎng)發(fā)育，進(jìn)而促進(jìn)鵪鶉免疫器官的良好發(fā)育，具體的機(jī)制還有待研究。呂尊周等[16]發(fā)現(xiàn)抗菌肽能通過(guò)促進(jìn)與細(xì)胞因子相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯，從而促進(jìn)細(xì)胞因子的合成，促進(jìn)脾臟發(fā)育，增強(qiáng)機(jī)體自身免疫力。李金蓮[17]發(fā)現(xiàn)抗菌肽可以提高肉仔雞的免疫功能，主要是通過(guò)促進(jìn)肉仔雞免疫器官發(fā)育，提高新城疫疫苗免疫后的抗體效價(jià)實(shí)現(xiàn)的。本試驗(yàn)中，0.2%抗菌肽組朝鮮鵪鶉血清中新城疫抗體效價(jià)水平顯著高于對(duì)照組，表明抗菌肽能夠促進(jìn)免疫球蛋白的合成和增加其活性，提高鵪鶉的抗病力，與上述報(bào)道一致。

細(xì)胞因子存在于體液中，是機(jī)體免疫細(xì)胞或組織合成和分泌的小分子多肽或糖蛋白，在機(jī)體抵御異物入侵，啟動(dòng)免疫應(yīng)答，維持穩(wěn)態(tài)過(guò)程中十分重要[18]。復(fù)合抗菌肽能提高斷奶仔豬血清細(xì)胞因子含量，減緩斷奶應(yīng)激，抵御病原微生物入侵[19]?？咕哪芡ㄟ^(guò)P38通路刺激Th17細(xì)胞表達(dá)CD73核苷酸外切酶，同時(shí)誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，為癌癥免疫治療提供新思路[20]。本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組抗菌肽Ⅱ組、抗菌肽Ⅲ組血清中細(xì)胞因子含量顯著升高，表明抗菌肽能夠在一定范圍內(nèi)增加鵪鶉機(jī)體細(xì)胞因子的含量，增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫，抵御病原微生物，此研究發(fā)現(xiàn)和前人類似。但受到抗菌肽來(lái)源差異、動(dòng)物品種不同以及飼養(yǎng)管理差異，所以文獻(xiàn)中抗菌肽的添加劑量存在差異，本試驗(yàn)中，0.2%抗菌肽添加量最適宜。

3.3 抗菌肽對(duì)朝鮮鵪鶉血清抗氧化指標(biāo)的影響

機(jī)體抗氧化能力與健康密切相關(guān)，機(jī)體氧化與抗氧化水平一般維持在相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)，當(dāng)這種狀態(tài)被破壞時(shí)，過(guò)量自由基的釋放會(huì)干擾核酸的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯，導(dǎo)致抗氧化酶活性降低，造成氧化應(yīng)激和細(xì)胞損傷，影響生物體內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定性[18]。T-AOC、SOD和MDA是衡量機(jī)體抗氧化和清除自由基的能力[21]。本次試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，所有抗菌肽組血清T-SOD活性和T-AOC含量均顯著升高，血清MDA含量顯著降低，與前人研究結(jié)果類似，說(shuō)明抗菌肽能夠平衡鵪鶉體內(nèi)氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)動(dòng)態(tài)變化，緩解氧化應(yīng)激，保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整，提高鵪鶉的抗應(yīng)激能力。楊海濤[22]發(fā)現(xiàn)與抗生素相比，抗菌肽能顯著提高肉雞血清內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽（GSH）的活性。孫全友等[23]發(fā)現(xiàn)在肉仔雞飼糧中單獨(dú)或聯(lián)合添加抗菌肽或姜黃素時(shí)能及時(shí)清除活性氧，緩解機(jī)體的氧化應(yīng)激，促進(jìn)自身穩(wěn)態(tài)恢復(fù)。

3.4 抗菌肽對(duì)朝鮮鵪鶉腸道發(fā)育的影響

完整的小腸結(jié)構(gòu)和功能是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收過(guò)程的基礎(chǔ)，各腸段長(zhǎng)度和重量反映了腸段的生長(zhǎng)發(fā)育程度，而發(fā)育程度又能反映消化吸收的功能[24]。本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，0.2%抗菌肽組和0.4%抗菌肽組空腸長(zhǎng)度和重量顯著增加；其中0.4%抗菌肽組回腸長(zhǎng)度和回腸重量也顯著高于對(duì)照組，抗菌肽能夠富集于空腸和回腸中，促進(jìn)鵪鶉腸道上皮黏膜健康發(fā)育和腸道物理屏障的完整性。

腸道絨毛高度、隱窩深度是衡量腸道健康和消化吸收能力的重要指標(biāo)之一，絨毛高度越高，表明上皮成熟細(xì)胞越多吸收越強(qiáng)；隱窩深度越淺表示成熟細(xì)胞生成增加；二者的比值反映小腸消化吸收功能，比值升高，表明黏膜發(fā)育良好，消化吸收能力強(qiáng)[25]。Hu F.等[26]發(fā)現(xiàn)豬腸道抗菌肽（SGAMP）能在熱應(yīng)激下減輕肉雞腸道損傷、維持正常腸道物理、化學(xué)屏障，從而緩解熱應(yīng)激對(duì)肉雞的生長(zhǎng)抑制。在肉仔雞飲用水或基礎(chǔ)飼糧中添加豬源抗菌肽PABP可影響腸道堿性磷酸酶AKP活性和表觀能量效率，從而增加絨毛高度和黏膜厚度，促進(jìn)腸道發(fā)育，提高對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收率[27]。Liu T.等[28]發(fā)現(xiàn)兔圓小囊抗菌肽可通過(guò)顯著提高雛雞十二指腸和空腸的腸絨毛高度，促進(jìn)雛雞腸道物理屏障的完整性。本實(shí)驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，添加抗菌肽使鵪鶉空腸絨毛高度顯著升高，促進(jìn)腸道上皮細(xì)胞的生成和成熟，進(jìn)而促進(jìn)腸道發(fā)育，與前人研究結(jié)果相似。

4 結(jié)論

在飼料中添加抗菌肽可顯著提高鵪鶉生長(zhǎng)性能、免疫功能、血清抗氧化功能和腸道發(fā)育，其中以0.2%抗菌肽效果最佳。