楊敏怡，岑麗蓮

（1.廣東肇慶端州區(qū)婦幼保健院 檢驗科，廣東 肇慶 526040；2.廣東肇慶市第一人民醫(yī)院 檢驗科，廣東 肇慶 526040）

0 引言

支氣管肺炎為兒童發(fā)病率較高的呼吸道感染性疾病，病原體傳播速度較快，再加上小兒機體免疫力相對低下，如果不及時予以治療，可并發(fā)多臟器衰竭，危害患兒身心健康[1]。因此，盡早診療小兒支氣管肺炎有重要的意義。小兒支氣管肺炎的臨床癥狀體征無特異性，導致肺炎發(fā)生的病原體種類多樣，以往臨床常單一應用痰培養(yǎng)進行檢測，但其操作復雜、耗時長，易受外界因素影響，使其漏診誤診[2]。近年隨著實驗室檢測技術的不斷發(fā)展，呼吸道病原體九聯(lián)檢逐漸應用于呼吸道感染性疾病診斷中?，F(xiàn)為進一步探究呼吸道病原體九聯(lián)檢聯(lián)合痰培養(yǎng)在小兒支氣管肺炎診斷中的應用價值，特做如下研究。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選擇2020年1月-2021年4月到肇慶市端州區(qū)婦幼保健院就診250例支氣管肺炎患兒進行研究，納入標準：①符合《諸福棠兒科學（第7版）》[3]中支氣管肺炎的相關診斷標準；②無重要臟器疾病或其他肺部疾?。虎奂覍偻饣純哼M行痰培養(yǎng)、呼吸道病原體九聯(lián)檢。排除標準：①不配合血樣本或痰樣本取樣的患兒；②伴有其他感染性疾病。此次研究患兒中男133例，女117例，年齡6個月至11歲，平均（5.16±0.92）歲，病程2～14d，平均（7.09±2.24）d。

1.2 方法

1.2.1 痰培養(yǎng)

250例患兒均接受痰培養(yǎng)，具體方法：①采集痰樣本：對于不能自主咳痰的兒童，應用口腔一次性無菌吸痰管深插，在負壓吸取痰液作為樣本，存于無菌容器內送到生物檢驗室進行細菌培養(yǎng)檢測。對于可自主咳痰的兒童，指導其先用清水漱口，深呼吸用力咳嗽，將咳出的痰液保存到無菌容器內送檢；②檢測步驟：吸取痰樣本接種于培養(yǎng)皿中，在室溫35℃、二氧化碳濃度為5%的環(huán)境生化培養(yǎng)箱中孵育分離培養(yǎng)18～24h，觀察菌落的形態(tài)，涂片并進行鏡檢。再挑取單個純菌落應用梅里埃ATB細菌鑒定分析儀進行菌株鑒定。

1.2.2 呼吸道病原體九聯(lián)檢

對于痰培養(yǎng)陰性的患兒，進一步進行呼吸道病原體九聯(lián)檢，具體方法：采集患兒的肘靜脈血樣本2mL，先進行離心處理（離心速率3000r/min）10min，吸取上清液采用間接免疫熒光法進行檢測，觀察血清中的待測抗體與抗原結合情況，除去未能結合的抗體，而抗原-抗體復合物進行干燥、封片處理，在熒光顯微鏡下觀察結果。嚴格按照九項呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒（包括肺炎支原體IgM抗體、嗜肺軍團菌1型IgM抗體、肺炎衣原體IgM抗體、Q熱立克次體IgM抗體、呼吸道合胞病毒IgM抗體、腺病毒IgM抗體、流感病毒甲型IgM抗體、流感病毒乙型IgM抗體、副流感病毒IgM抗體）說明書進行操作，而且為了保障檢測有效性，每一次試驗操作均進行陽性、陰性對比。

1.3 觀察指標

記錄患兒痰培養(yǎng)、呼吸道病原體九聯(lián)檢的檢測結果，分析其結果的差異。

1.4 統(tǒng)計學方法

應用Microsoft Excel 2013軟件整理數(shù)據，并將錄入的數(shù)據輸入到SPSS 20.0中進行處理，細菌種類及病原體類型屬于計數(shù)資料，以百分比表現(xiàn)，行卡方檢驗。

2 結果

2.1 痰培養(yǎng)結果

250例患兒痰樣本檢測中174例陽性（69.60%），76例陰性（30.40%）。174例陽性共檢出226株致病菌，以革蘭氏陰性菌為主，菌株具體構成比前5名菌種為肺炎克雷伯菌（26.99%）、大腸埃希氏菌（23.45%）、銅綠假單胞菌（12.39%）、金黃色葡萄球菌（11.06%）、鮑曼不動桿菌（9.29%），具體見表1。

表1 痰培養(yǎng)結果

2.2 呼吸道病原體九聯(lián)檢結果

76例痰培養(yǎng)陰性患兒呼吸道病原體九聯(lián)檢均為陽性，其中肺炎支原體占22.37%、嗜肺軍團菌 1型占6.58%、肺炎衣原體占13.16%、Q熱立克次體占13.16%、呼吸道合胞病毒占6.58%、腺病毒占6.58%、流感病毒甲型占10.53%、流感病毒乙型占6.58%、副流感病毒構成比占14.47%，見表2。

表2 呼吸道病原體九聯(lián)檢結果

3 討論

小兒支氣管肺炎在兒科門診中極為常見，其病原體感染以細菌、病毒、支原體等為主，臨床癥狀多為咳嗽、咳痰、發(fā)熱、氣促等，嚴重的還會出現(xiàn)食欲下降、嗜睡，在體征方面可聞及肺部呼吸音變弱、濕啰音，呼吸頻率和心率增加等。支氣管肺炎患兒若不予以及時有效診療，可促使病情急劇惡化，損害各項組織臟器，治療難度顯著增加。因此臨床應做好小兒支氣管肺炎的診斷，及時為患者提供準確有效的治療方案，促進其盡快康復。

針對小兒支氣管肺炎的診斷，常用方法有痰培養(yǎng)、血培養(yǎng)、肺泡灌洗等，肺泡灌洗為侵入性操作，可損傷患兒機體組織，患兒的耐受性一般較差，臨床較為少用；血培養(yǎng)對肺炎致病菌的檢測陽性率較低，診斷價值不高[4]。痰培養(yǎng)為當前臨床診斷肺炎的主要手段，其能夠培養(yǎng)出細菌、真菌等致病菌，而且在培養(yǎng)后進行涂片時還可以鑒別細菌是革蘭氏陰性菌還是革蘭氏陽性菌，這對于診斷疾病和制定針對性治療方案具有一定的臨床價值[5]。但是痰培養(yǎng)的檢測過程復雜，耗時較長，干擾因素多等，極易造成檢測不準確，陽性率較低。因此，尋找一種可靠的檢測方案與痰培養(yǎng)結合應用對于提升診斷準確率具有重要的意義。

近年也越來越多研究報道[6]，病毒、支原體是呼吸道感染發(fā)生主要病原體之一，故在支氣管肺炎病原體篩查中應重視非典型病原體的抗體檢測。隨著現(xiàn)代檢測技術的飛速發(fā)展，呼吸道感染性疾病的診斷技術也在不斷進步，呼吸道病原體九聯(lián)檢應用越來越廣泛。呼吸道病原體九聯(lián)檢主要是應用間接免疫熒光法分析受檢者血清中肺炎支原體、嗜肺軍團菌1型、肺炎衣原體、Q熱立克次體、呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒甲型、流感病毒乙型、副流感病毒9種常見病原體的IgM抗體分布情況[7]。其檢測原理是在檢測過程中將血清樣本滴加到載玻片上，使血清抗原與特異性抗體結合發(fā)生免疫反應，進而生成抗體復合物，并通過熒光鏡檢明確形成抗體復合物的相應特異性抗體，進而明確其感染病原體類型[8]。相關研究也證實[9]，呼吸道病原體九聯(lián)檢不僅能夠檢出單一致病病原體，還能夠對多個病原體的感染狀況進行診斷，具有特異性強、準確率高、檢測速度快等優(yōu)點，可顯著提升肺炎的診斷準確率，使治療更具針對性，療效更好。

本研究對支氣管肺炎患兒予以呼吸道病原體九聯(lián)檢聯(lián)合痰培養(yǎng)檢測，結果顯示，250例患兒痰樣本檢出174例陽性（陽性率69.60%），共有226株致病菌，構成比前5名分別為肺炎克雷伯菌、大腸埃希氏菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、鮑曼不動桿菌。此外，76例痰培養(yǎng)陰性患兒呼吸道病原體九聯(lián)檢均為陽性，其中肺炎支原體占22.37%、嗜肺軍團菌1型占6.58%、肺炎衣原體占13.16%、Q熱立克次體占13.16%、呼吸道合胞病毒占6.58%、腺病毒占6.58%、流感病毒甲型占10.53%、流感病毒乙型占6.58%、副流感病毒構成比占14.47%，提示痰培養(yǎng)能夠對細菌、真菌感染進行鑒別，而呼吸道病原體九聯(lián)檢可檢出病毒、支原體、衣原體等病原體，故呼吸道病原體九聯(lián)檢聯(lián)合痰培養(yǎng)能夠全面分析評價患兒細菌、真菌、病毒、支原體、衣原體等病原體感染情況，檢測范圍廣，有效避免漏診，顯著升高檢測陽性率，為后續(xù)治療及患兒預后判斷提供可靠的依據[10-11]。尤其是對于痰培養(yǎng)陰性的支氣管肺炎患兒，更應重視其血清中非典型病原體抗體檢測，根據檢測結果選用對非典型病原體敏感的藥物，予以科學合理的治療[12]。

綜上所述，呼吸道病原體九聯(lián)檢具有操作簡單、檢測快速、準確率高、特異性強、檢測項目多、費用低等優(yōu)點，可早期發(fā)現(xiàn)非典型病原體。在小兒支氣管肺炎診斷中聯(lián)合應用呼吸道病原體九聯(lián)檢和痰培養(yǎng)有協(xié)同互補作用，可以全面早期確定致病病原體，提高引起支氣管肺炎發(fā)生的病原體類型診斷準確率，為臨床制定科學合理的治療方案提供重要的參考依據，也有利于臨床合理用藥治療，避免抗生素濫用。