陳巧媛 楊洋 辛志敏 余蘭 宋蕊 王麗 王芹 王曉杰 王樹玉

乙肝病毒(hepatitis B virus，HBV)感染是全球性的公共衛(wèi)生問題。慢性乙型肝炎會(huì)對健康產(chǎn)生嚴(yán)重影響，例如肝硬化、肝細(xì)胞癌。世界衛(wèi)生組織估計(jì)，2015年全球范圍內(nèi)估計(jì)有2.57億人患有慢性乙型肝炎。乙型肝炎病毒具有高度傳染性，可以存在于被感染者的血液、精液和其他體液中，具有水平或垂直傳播給伴侶或新生兒的風(fēng)險(xiǎn)。

全球約有15%的夫婦受到不孕不育癥的影響。男性因素不育占大約50%，并且這一比例正在迅速增加[1]。男性生殖道感染和由此引起的炎癥反應(yīng)是導(dǎo)致男性不育的主要原因之一，患病率為6%～10%[2]。病毒感染的直接和間接影響都可能導(dǎo)致男性生育能力障礙[3]。目前，HBV感染對男性精液影響的研究結(jié)論不一：有研究認(rèn)為HBV感染的男性患者精液存在低密度、低活率、低正常形態(tài)率[4-5]。但也有研究認(rèn)為與未感染男性相比精液參數(shù)無顯著差異[6-7]。血清卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone，F(xiàn)SH)、促黃體生成素(luteinizing hormone，LH)和睪酮(testosterone，T)是生育健康中的關(guān)鍵激素[8-9]。HBV感染與男性生育健康之間的關(guān)系一直備受關(guān)注。因此本項(xiàng)目采用病例對照研究探討男性感染HBV后，對精液參數(shù)和血清生殖激素水平的影響。

資料與方法

1.資料來源：回顧性分析2017—2019年在本院生殖醫(yī)學(xué)科進(jìn)行輔助生殖治療的228例男性患者的臨床資料，患者年齡25～45歲，平均年齡(35.1±4.5)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)已婚夫婦性生活正常，未避孕未育/未再育1年及以上；(2)有血液HBV篩查結(jié)果者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)具有精索靜脈曲張、隱睪、手術(shù)史(生殖系統(tǒng)相關(guān))、腮腺炎陽性史、生殖系統(tǒng)感染史以及輔助生殖治療前接受任何抗病毒治療的患者；(2)具有無精子癥或重度少精子癥臨床表現(xiàn)的患者；(3)存在肝功能異常的患者；(4)血液篩查丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)、人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)或梅毒血清反應(yīng)陽性的患者。所有患者均知情同意。按血清學(xué)乙肝表面抗原(HBsAg)檢測結(jié)果分為HBV陽性組(76例)和HBV陰性組(152例)。

2. 精液分析：禁欲2～7 d，取精室采用手淫法取精，收集于無菌無毒帶蓋廣口杯內(nèi)，置37℃恒溫箱中液化備用。精液液化后，嚴(yán)格按照《世界衛(wèi)生組織人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊》(第5版)的技術(shù)規(guī)范進(jìn)行操作。

3. 激素測定：清晨空腹8～12 h，抽取外周靜脈血5 mL，分離血清分裝，-80℃低溫冰箱儲(chǔ)存。采用化學(xué)發(fā)光法(西門子ADVIA Centaur XP全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀)測定FSH、LH、T、泌乳素(prolactin，PRL)和雌二醇(oestradiol,E2)的生殖激素水平。

4. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：數(shù)據(jù)采用SPSS 23.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料采用中位數(shù)(四分位數(shù))[ M(P25～P75)]表示，組間比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1.HBV陽性組和HBV陰性組精液參數(shù)的比較：HBV陽性組和HBV陰性組患者在年齡和體質(zhì)指數(shù)(body-mass index，BMI)方面無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。HBV陽性組和HBV陰性組的患者在精液量、精子濃度、精子活動(dòng)率、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、正常形態(tài)精子百分比方面均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但HBV陽性組精子濃度與HBV陰性組相比略低。結(jié)果見表1。

表1 HBV陽性組和HBV陰性組的一般資料及精液參數(shù)比較 [M(P25～P75)]

2.HBV陽性組和HBV陰性組血清生殖激素水平比較：HBV陽性組血清FSH水平高于HBV陰性組(P<0.05)。其余指標(biāo)兩組間比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其中HBV陽性組的睪酮水平相對較高。見表2。

表2 HBV陽性組和HBV陰性組的血清生殖激素水平比較 [M(P25～P75)]

討論

HBV是一種乙型肝炎病毒科的雙鏈DNA病毒，是威脅人類健康的最常見病毒之一[10]。血清學(xué)檢測和核酸檢測用于診斷急性和慢性HBV感染[11]。乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是乙肝病毒的外殼蛋白，血清中HBsAg的存在表明患者已感染HBV。HBsAg陽性者具有傳染性。

盡管HBV感染率很高，但HBV感染是否會(huì)對男性精液參數(shù)產(chǎn)生影響，其研究結(jié)論仍不一致。精液分析在男性不育的常規(guī)診斷中具有重要作用。一些研究發(fā)現(xiàn)HBV感染對男性精液參數(shù)具有負(fù)面影響。Karamolahi等[4]研究發(fā)現(xiàn)，HBV感染的男性精液(112例)與對照組(112例)相比，精子總數(shù)減少、精子運(yùn)動(dòng)能力降低、以及形態(tài)受損。Lorusso等[5]對30例HBV血清陽性患者和130例HBV陰性的男性精液研究中，發(fā)現(xiàn)HBV血清陽性組精子濃度、精子活力、正常形態(tài)百分比均較對照組降低。但是Bu等[7]研究顯示20例HBV血清陽性丈夫的精液參數(shù)與對照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究與先前的一項(xiàng)IUI助孕中男性乙肝病毒攜帶者精液質(zhì)量分析結(jié)果一致，該研究表明男性乙肝攜帶者的精子質(zhì)量無明顯降低[13]。一些研究將健康可育男性作為對照組，這使得結(jié)果易偏向于對照組中精液參數(shù)升高。本研究中HBV陽性組和HBV陰性組男性均為在本院生殖醫(yī)學(xué)科進(jìn)行輔助生殖治療的患者，可避免該問題的產(chǎn)生。本研究發(fā)現(xiàn)HBV陽性組精子濃度略低于HBV陰性組，由于精子濃度是睪丸功能障礙最重要的參數(shù)[12]，那么HBV感染可能影響了睪丸功能，本研究又對血清生殖激素水平進(jìn)行了分析。

FSH、LH、T是反映性腺功能水平的關(guān)鍵激素。由下丘腦神經(jīng)元釋放的促性腺激素釋放激素(GnRH)可刺激腦垂體分泌促性腺激素LH、FSH，分別調(diào)節(jié)睪丸類固醇生成和精子發(fā)生[14]。血清 FSH 能較好地評估睪丸的生精功能，F(xiàn)SH升高往往與精子發(fā)生異常相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)HBV陽性組男性的FSH水平高于HBV陰性組(P<0.05)，提示HBV感染可能影響了睪丸的生精功能。生殖激素之間的比率也是評估男性性腺功能的參數(shù)。本研究中兩組間FSH/LH以及TSI均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。本研究的潛在局限性是僅收集單次的精液參數(shù)以及血清激素水平進(jìn)行分析。此外本研究中患者數(shù)量相對較少，研究仍需要更大樣本量進(jìn)行證實(shí)。

HBV傳播途徑主要有水平傳播和垂直傳播。精子可能是HBV垂直傳播的載體。最新研究證明，HBV不僅可以通過精子進(jìn)入早期卵裂胚胎，還可以在胚胎中復(fù)制，從而導(dǎo)致HBV父嬰傳播[15]。越來越多的HBV攜帶者選擇輔助生殖治療，因此深入研究HBV感染對男性生育健康的影響具有深遠(yuǎn)意義。對于慢性HBV感染的男性，在輔助生殖治療前，女性應(yīng)注射疫苗避免圍產(chǎn)期對胎兒的病毒傳播。

總之，該回顧性病例對照研究調(diào)查了HBV陽性和HBV陰性男性的精液參數(shù)及血清生殖激素水平。在進(jìn)行輔助生殖治療的男性中，HBV攜帶者的血清FSH水平高于未感染者，HBV感染可能是損害男性生育健康的原因之一。