吳曉蕊，靳榮，盧慧

天津市第五中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，天津300450

子宮內(nèi)膜癌是起源于子宮內(nèi)膜上皮的惡性腫瘤，為女性生殖系統(tǒng)常見(jiàn)惡性腫瘤，全球發(fā)病率為10.8/10 萬(wàn)，約41.7 萬(wàn)例［1］。早期子宮內(nèi)膜癌的腫瘤局限于子宮體，手術(shù)切除病灶可取得較好預(yù)后，但對(duì)于晚期子宮內(nèi)膜癌，術(shù)后轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)幾率高，盡管近年靶向和免疫治療顯著進(jìn)步，但患者生存率仍不能令人滿意［2］。腫瘤是多因素、多基因變異參與的過(guò)程，非編碼RNA 是一類(lèi)不編碼蛋白質(zhì)的RNA，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化、侵襲、遷移、凋亡等行為，在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要調(diào)控作用［3-4］。微小RNA-128-3p（miRNA-128-3p）是 一 種 高 度 保 守的miRNA，其參與宮頸癌、結(jié)直腸癌等多種惡性腫瘤進(jìn)展［5-6］。缺口受體1（Notch1）是一種配體激活的轉(zhuǎn)錄因子，能與同源配體相互作用而改變蛋白構(gòu)象，激活下游特定靶基因表達(dá)，在細(xì)胞發(fā)育、分化、增殖、凋亡等過(guò)程中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用［7］。B 細(xì)胞特異性莫洛尼鼠白血病病毒整合位點(diǎn)1（BMI1）是多梳抑制復(fù)合物1復(fù)合體的一個(gè)組分，能通過(guò)修飾染色質(zhì)，參與細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲、遷移等調(diào)控［8］。研究報(bào)道，Notch1和BMI1在子宮內(nèi)膜癌中高表達(dá)，與癌細(xì)胞惡性行為相關(guān)［9-10］。2014 年10 月—2018 年10 月，我們觀察了子宮內(nèi)膜癌組織中miR-128-3p 及Notch1、BMI1 mRNA的表達(dá)變化，并探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2014 年10 月—2018 年10 月天津市第五中心醫(yī)院收治的子宮內(nèi)膜癌患者50例，年齡35～76（50.25±5.66）歲；組織學(xué)分型：子宮內(nèi)膜樣癌（EEC）124 例，非子宮內(nèi)膜樣癌（NEEC）26例；分化程度：低分化59 例，中高分化91 例；國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）分期［11］：Ⅰ～Ⅱ期91 例，Ⅲ～Ⅳ期59 例；血管侵犯：有36 例，無(wú)114 例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：有60 例，無(wú)90 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)術(shù)后病理檢查確診為子宮內(nèi)膜癌；②入院前未接受任何放療、化療、免疫治療、激素治療等；③病理資料和隨訪資料完整者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他部位腫瘤者；②非原發(fā)性性子宮內(nèi)膜癌者；③嚴(yán)重心、肝、腎等臟器疾病者；④全身感染性疾病者；⑤合并其他嚴(yán)重婦科疾病者。手術(shù)留取子宮內(nèi)膜癌及其癌旁（距離癌組織＞5 cm）組織各150 例份，新鮮組織獲取后立即分裝于凍存管中置放入液氮保存。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且患者及家屬均知情同意。

1.2 子宮內(nèi)膜癌組織中miR-128-3p 及Notch1、BMI1 mRNA 檢測(cè) 取出液氮凍存組織，加入TRIzol（上海捷瑞生物工程有限公司，貨號(hào)：GK3006）裂解提取組織總RNA，核酸蛋白測(cè)定儀（德國(guó)艾本德，型號(hào)：BioPhotometer plus）測(cè)定總DNA 濃度及純度，使OD260/OD280為1.8～2.0，Takara 試劑盒反轉(zhuǎn)錄合成cDNA，使用qRT-PCR 儀（美國(guó)伯樂(lè)公司，型號(hào)：S1000）和試劑盒（北京寶日醫(yī)生物技術(shù)有限公司，貨號(hào)：639506）進(jìn)行qRT-PCR 擴(kuò)增。miR-128-3p 上游引 物：5′-GGAATTCAACCAACTGTCAATAACTGGAG-3′，下游引物：5′-CGGGATCCAATTTGTCATCCAAATCTACTTTGG-3′；內(nèi) 參U6 上 游 引 物：5′-TGAACGCCGAGGGTGAGTGTCG-3′，下游引物：5′-CGGAACGTGACGTGTGGCGTACG-3′；Notch1 上游引物：5′-CGTGTGAACCCGTAGGCGCC-3′，下游引物：5′-GGCCAACGTGTGCAAGCGACGGC-3′；內(nèi)參GAPDH 上 游 引 物：5′-GCGATAAGTGCTGAGCTGCTC-3′，下游引物：5′-GTTGACGCGAACTGACGTGT-3′；BMI1 上游引物：5′-CTGGTTGCCCATTGACAGC-3′，下 游 引 物：5′-CAGAAAATGAATGCGAGCCA-3′；內(nèi)參GAPDH 上游引物：5′-TGCACCACCA ACTGCTTAGC-3′，下游引物：5′-GGCATGGACTGTGGTCATGAG-3′。反 應(yīng) 體 積 共20 μL：10 μL 2×All-in-One qPCR Mix；2 μL上游、下游引物；2 μL cDNA 模板；4 μL 經(jīng)DEPC 處理水。反應(yīng)條件：95 ℃預(yù)變性10 min 1 次；95 ℃變性10 s，60 ℃退火20 s，72 ℃延伸10 s，循環(huán)40次。反應(yīng)結(jié)束后得到各反 應(yīng) 管Ct，構(gòu) 建 溶解 曲線，采 用2-ΔΔCt法 計(jì)算 組織中miR-128-3p及Notch1、BMI1 mRNA相對(duì)表達(dá)量。

1.3 隨訪方法 通過(guò)門(mén)診或電話方式隨訪3 年，隨訪至2021 年10 月，隨訪內(nèi)容包括婦科盆腔檢查、陰道B 超、胸部X 線檢查，必要時(shí)進(jìn)行CT 或MRI檢查，統(tǒng)計(jì)術(shù)后3年累積生存率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS26.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)；符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；Pearson 相關(guān)分析法分析子宮內(nèi)膜癌組織中miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA 表達(dá)的相關(guān)性；K-M 法繪制不同miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA 表達(dá)子宮內(nèi)膜癌患者生存曲線，組間生存率比較采用Log-rank檢驗(yàn)；多因素Cox 回歸分析法分析子宮內(nèi)膜癌患者死亡影響因素。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 子宮內(nèi)膜癌及其癌旁組織中miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA 相對(duì)表達(dá)量比較 子宮內(nèi) 膜 癌 組 織 中 miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA 相對(duì)表達(dá)量分別為0.66±0.22、2.79±0.43、1.25 ± 0.26，癌旁組織分別為1.00 ± 0.21、2.02±0.37、0.76±0.28，兩者比較，P均＜0.05。

2.2 子 宮 內(nèi) 膜 癌 組 織 中 miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA 表達(dá)的相關(guān)性 子宮內(nèi)膜 癌 組 織 中 miR-128-3p 與 Notch1 mRNA、BMI1 mRNA 表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)（r分別為-0.744、-0.733，P均＜0.05），Notch1 mRNA 與BMI1 mRNA表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.803，P＜0.05）。

2.3 miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA 表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系 結(jié)果見(jiàn)表1，由 表 1 可 知 ，miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA 表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌分化程度、FIGO 分期、血管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P均＜0.05）。

表1 miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系（±s）

表1 miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系（±s）

臨床病理特征年齡≥50歲＜50歲組織學(xué)分型EEC NEEC分化程度低分化中高分化FIGO分期Ⅰ～Ⅱ期Ⅲ～Ⅳ期血管侵犯有 無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是 否n 86 64 124 26 59 91 91 59 36 114 60 90 miR-128-3p 0.66±0.21 0.67±0.24 0.68±0.21 0.59±0.26 0.51±0.20 0.70±0.23 0.71±0.22 0.45±0.20 0.52±0.21 0.69±0.22 0.48±0.19 0.72±0.22 Notch1 mRNA 2.82±0.41 2.75±0.46 2.79±0.42 2.78±0.49 2.99±0.43 2.72±0.42 2.69±0.41 2.95±0.42 3.05±0.43 2.74±0.42 2.96±0.41 2.67±0.41 BMI1 mRNA 1.27±0.25 1.23±0.26 1.25±0.26 1.27±0.25 1.41±0.26 1.21±0.24 1.19±0.24 1.59±0.25 1.46±0.24 1.21±0.25 1.65±0.24 1.19±0.24

2.4 miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA 表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的關(guān)系 根據(jù)miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA 相對(duì)表達(dá)量將150 例子宮內(nèi)膜癌患者分為高低表達(dá)者，miR-128-3p≥0.66、0.66 者術(shù)后3 年累積生存率分別為80.56%（58/72）、57.69%（45/78），兩 者 比 較，P＜0.05；Notch1 mRNA≥2.79、＜2.79 者術(shù)后3 年累積生存率分別為60.00%（45/75）、77.33%（58/75），兩者比較，P＜0.05；BMI1 mRNA≥1.25、＜1.25 者術(shù)后3 年累積生存率分別為55.84%（43/77）、82.19%（60/73），兩者比較，P＜0.05。

2.5 子宮內(nèi)膜癌患者死亡影響因素的多因素Cox回歸分析結(jié)果 隨訪3～36個(gè)月，中位隨訪27個(gè)月，死亡47 例，存活103 例。死亡者年齡≥50 歲29 例（61.70%）、EEC 40 例（85.11%）、低 分 化25 例（53.19%）、FIGO 分期Ⅲ～Ⅳ期42 例（89.36%）、血管 侵 犯21 例（44.68%）、淋 巴 結(jié) 轉(zhuǎn) 移41 例（87.23%）、miR-128-3p≥0.66 9 例（19.15%）、Notch1 mRNA≥2.79 38 例（80.85%）、BMI1 mRNA≥1.25 40 例（85.11%），存 活 者 年 齡≥50 歲57 例（55.34%）、EEC 84 例（81.55%）、低 分 化34 例（33.01%）、FIGO 分期Ⅲ～Ⅳ期17 例（16.50%）、血管 侵 犯15 例（14.56%）、淋 巴 結(jié) 轉(zhuǎn) 移19 例（18.45%）、miR-128-3p≥0.66 63 例（61.17%）、Notch1 mRNA≥2.79 37 例（35.92%）、BMI1 mRNA≥1.25 37 例（35.92%），兩者低分化比例、FIGO 分期Ⅲ～Ⅳ期比例、血管侵犯比例、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移比例、miR-128-3p≥0.66 比例、Notch1 mRNA≥2.79 比例、BMI1 mRNA≥1.25 比例比較，P均＜0.05。以隨訪時(shí)間為時(shí)間變量，年齡（≥50歲=1，＜50歲=0）、分化程度（低分化=1，中高分化=0）、FIGO分期（Ⅲ～Ⅳ期=1，Ⅰ～Ⅱ期=0）、血管侵犯（有=1，無(wú)=0）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（有=1，無(wú)=0）、miR-128-3p（≥0.66=1，＜0.66=0）、Notch1 mRNA（≥2.79=1，＜2.79=0）、BMI1 mRNA（≥1.25=1，＜1.25=0）為自變量，是否死亡（是=1，否=0）為因變量，多因素Cox 回歸分析顯示，F(xiàn)IGO 分期Ⅲ～Ⅳ期、淋 巴 結(jié) 轉(zhuǎn) 移、Notch1 mRNA≥2.79、BMI1 mRNA≥1.25為子宮內(nèi)膜癌患者死亡獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素，miR-128-3p≥0.66 為獨(dú)立保護(hù)因素（P＜0.05），詳見(jiàn)表2。

表2 子宮內(nèi)膜癌患者死亡影響因素的多因素Cox回歸分析結(jié)果

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是常見(jiàn)的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，通常發(fā)生于絕經(jīng)后，臨床癥狀以不規(guī)則陰道流血、排液為主，其相關(guān)危險(xiǎn)因素包括持續(xù)雌激素暴露、初潮早、未育、絕經(jīng)延遲、代謝異常、攜帶子宮內(nèi)膜癌遺傳易感基因等，近年來(lái)由于低運(yùn)動(dòng)量和高脂高熱飲食生活方式的影響，子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率呈年輕化和上升趨勢(shì)，嚴(yán)重影響女性生理和心理健康［12-14］。目前，子宮內(nèi)膜癌的治療仍以手術(shù)為主，放療和化療為輔，對(duì)于早期子宮內(nèi)膜癌一般預(yù)后較好，但仍有部分患者可能存在癌灶轉(zhuǎn)移，同時(shí)對(duì)于晚期存在宮外轉(zhuǎn)移患者，即使進(jìn)行多學(xué)科協(xié)作治療也難獲得良好預(yù)后，因此亟需闡明子宮內(nèi)膜癌發(fā)病機(jī)制，尋找評(píng)估預(yù)后指標(biāo)對(duì)改善患者預(yù)后具有重要意義。

miRNA 是約22 個(gè)核苷酸組成的非編碼RNA，能在3′-非翻譯區(qū)與靶基因的mRNA結(jié)合，導(dǎo)致靶基因轉(zhuǎn)錄后沉默，從而調(diào)控靶基因表達(dá)，在腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮致癌或抑癌作用［15］。研究［16-17］表明，子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中存在多種miRNA 的異常表達(dá)，對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖、遷移、浸潤(rùn)等生物學(xué)行為產(chǎn)生影響。miR-326能靶向抑制B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2 表達(dá)，抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖和促進(jìn)凋亡［16］。miR-501 能靶向抑制同源框D10 表達(dá)，促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移［17］。miR-128-3p是新近發(fā)現(xiàn)的一種miRNA，其在多種惡性腫瘤中異常表達(dá)。楊吉鵬等［18］發(fā)現(xiàn)，miR-128-3p 在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中低表達(dá)，能靶向抑制同源框A5 抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞增殖、侵襲及抗凋亡能力。BAI 等［19］認(rèn)為，miR-128-3p在結(jié)直腸癌中高表達(dá)，能通過(guò)抑制叉頭框O4 激活JAK 激酶/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子3和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β/SMAD 信號(hào)調(diào)節(jié)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲。上述研究提示，miR-128-3p 在不同惡性腫瘤中發(fā)揮致癌或抑癌基因作用。本研究顯示，與癌旁組織比較，子宮內(nèi)膜癌組織中miR-128-3p 表達(dá)降低，并且與子宮內(nèi)膜癌分化程度、FIGO 分期、血管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示miR-128-3p 在子宮內(nèi)膜癌中發(fā)揮抑癌基因作用。文獻(xiàn)［20］報(bào)道，上調(diào)miR-128-3p 表達(dá)能抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的能力。本研究還顯示，miR-128-3p 高表達(dá)者術(shù)后3 年累積生存率明顯升高，生存時(shí)間明顯延長(zhǎng)，提示miR-128-3p 低表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后不良相關(guān)；miR-128-3p 高表達(dá)是子宮內(nèi)膜癌患者死亡的獨(dú)立保護(hù)因素，說(shuō)明miR-128-3p可作為判斷預(yù)后的分子標(biāo)志物。

既往研究認(rèn)為腫瘤的發(fā)生原癌基因激活和抑癌基因失活有關(guān)，近年研究認(rèn)為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑異常，導(dǎo)致細(xì)胞接受異常增殖、分化信號(hào)是腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵因素［21］。Notch1 作為一種配體激活的轉(zhuǎn)錄因子，能將胞外信號(hào)轉(zhuǎn)化為核內(nèi)基因表達(dá)，進(jìn)而調(diào)控細(xì)胞表面受體和核轉(zhuǎn)錄，其信號(hào)通路是一條進(jìn)化保守的細(xì)胞間相互作用機(jī)制，在細(xì)胞發(fā)育、增殖、分化、凋亡中發(fā)揮重要作用，能通過(guò)激活核因子-κB、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白等多條信號(hào)通路促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、分化、遷移、上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化等行為［22-23］。本研究顯示，與癌旁組織比較，子宮內(nèi)膜癌組織中Notch1 mRNA 表達(dá)升高，并且與子宮內(nèi)膜癌分化程度、FIGO 分期、血管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示Notch1 在子宮內(nèi)膜癌中發(fā)揮致癌基因作用，其機(jī)制可能與Notch1 可激活多條腫瘤相關(guān)信號(hào)通路促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌惡性進(jìn)展有關(guān)。牛麗佳等［24］認(rèn)為，Notch1 能誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化，促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲。本研究還顯示，Notch1 mRNA 高表達(dá)者術(shù)后3 年累積生存率明顯降低，生存時(shí)間明顯縮短，提示Notch1 mRNA高表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后不良相關(guān)；Notch1 mRNA高表達(dá)是子宮內(nèi)膜癌患者死亡的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素，說(shuō)明Notch1 mRNA 可作為判斷預(yù)后的分子標(biāo)志物。

多梳基因家族是重要的表觀遺傳修飾基因，與細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期密切相關(guān)，在腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮關(guān)鍵作用，BMI1是首個(gè)被鑒定的多梳基因家族功能基因，作為一種原癌基因，BMI1 能通過(guò)調(diào)控WNT/β-連環(huán)蛋白、Notch、磷脂酰肌醇-3 激酶/蛋白激酶B、c-Jun 氨基端激酶等信號(hào)通路參與惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展［25-27］。本研究顯示，與癌旁組織比較，子宮內(nèi)膜癌組織中BMI1 mRNA表達(dá)升高，并且與子宮內(nèi)膜癌分化程度、FIGO 分期、血管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示BMI1 在子宮內(nèi)膜癌中發(fā)揮致癌基因作用，其機(jī)制可能與BMI1能調(diào)節(jié)多種腫瘤信號(hào)通路有關(guān)。研究［28-29］報(bào)道，BMI1能增加磷酸化蛋白激酶B水平，促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖、分化、遷移等行為，沉默BMI1表達(dá)能發(fā)揮相反作用，同時(shí)能提升子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的化療敏感性，促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡。本研究還顯示，BMI1 mRNA 高表達(dá)者術(shù)后3 年累積生存率明顯降低，生存時(shí)間明顯縮短，提示BMI1 mRNA 高表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后不良相關(guān)；BMI1 mRNA 高表達(dá)是子宮內(nèi)膜癌患者死亡的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素，說(shuō)明BMI1 mRNA亦可作為判斷預(yù)后的分子標(biāo)志物。

本研究還發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜癌組織中miR-128-3p與Notch1 mRNA、BMI1 mRNA 表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，Notch1 mRNA 與BMI1 mRNA 表達(dá)呈正相關(guān)，說(shuō)明三者可能共同參與子宮內(nèi)膜癌進(jìn)展，考慮與miR-128-3p與Notch1、BMI1 的3′-非翻譯區(qū)存在互補(bǔ)結(jié)合位有關(guān)。顧曉荔等［30］的研究指出，miR-128-3p 能靶向抑制Notch1 表達(dá)抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋 亡。YANG 等［31］發(fā)現(xiàn)，miR-128-3p 能 靶 向抑 制BMI1 表達(dá)抑制視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞活力、遷移、侵襲。同時(shí)研究［32］指出，BMI1 抑制劑能影響Notch 信號(hào)通路蛋白的表達(dá)和活性。但關(guān)于miR-128-3p 是否能靶向下調(diào)Notch1、BMI1 參與子宮內(nèi)膜癌進(jìn)展有待進(jìn)一步細(xì)胞研究證實(shí)。

總之，子宮內(nèi)膜癌組織中miR-128-3p 低表達(dá)，Notch1、BMI1 mRNA高表達(dá)，均與分化程度、FIGO分期、血管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，是子宮內(nèi)膜癌患者死亡的獨(dú)立影響因素，可能成為子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后評(píng)估生物標(biāo)志物。