張 銓，梁少東，陳秀寬

（北海市食品藥品檢驗所，廣西北海 536000）

蘋果屬薔薇科蘋果屬植物，是一種經(jīng)常食用的水果。蘋果營養(yǎng)價值很高，富含礦物質(zhì)和維生素，含鈣量豐富，有助于代謝掉體內(nèi)多余鹽分。此外，蘋果酸還可代謝熱量，防止肥胖[1-3]。蘋果在我國已經(jīng)有2 000多年的栽培歷史，相傳夏禹所吃的“紫柰”，就是紅蘋果，可見蘋果在中國具有悠久的歷史。蘋果在我國園藝產(chǎn)品中出口創(chuàng)匯居第一位，鮮蘋果出口額占我國水果出口總額的30%，2017年出口總量達到133萬t。中國鮮蘋果出口地區(qū)主要是俄羅斯和東南亞，其國際市場占有率為20%左右。在種植技術(shù)提升以及相關(guān)進出口優(yōu)惠政策影響下，蘋果出口產(chǎn)業(yè)發(fā)展態(tài)勢越來越好[4-6]。聯(lián)苯菊酯是一種高效合成除蟲菊酯殺蟲、殺螨劑，具有觸殺、胃毒作用，無內(nèi)吸、熏蒸作用，殺蟲譜廣，作用迅速，在土壤中不移動，對環(huán)境較為安全，殘效期長[7-8]。因聯(lián)苯菊酯在蘋果種植中使用廣泛，所以聯(lián)苯菊酯殘留量檢測是蘋果檢測的一個常見項目。日常水果農(nóng)藥殘留量檢驗工作中，當檢測結(jié)果在限量附近時，依據(jù)實驗室出具的檢測結(jié)果判定蔬菜是否合格，為了確保檢測結(jié)果的可信度，進行不確定度評定尤為重要。本文對檢驗過程的各個步驟和整個過程進行不確定度評估，分析確定哪個步驟對檢驗結(jié)果產(chǎn)生的影響較大，為此后檢驗工作提高檢驗準確性提供改進方向。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Agilent 7890B氣相色譜儀，美國安捷倫科技有限公司；聯(lián)苯菊酯標準品，標準值為100 μg/mL，擴展不確定度U（k=2）為0.5%，北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司；正己烷，色譜純，20 ℃的體積膨脹系數(shù)為1.36×10-3℃-1，默克股份兩合公司；勻漿機，江蘇金壇市億通電子有限公司；氮吹儀，天津市恒奧科技發(fā)展有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準溶液的制備

（1）標準儲備液（10 μg/mL）的制備。用1 mL單標線吸量管精密量取對照品溶液1 mL置于10 mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度，搖勻，4 ℃保存。

（2）標準工作液（1 μg/mL）的制備。用1 mL單標線吸量管精密量取標準儲備液1 mL置于10 mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度，搖勻備用。

1.2.2 樣品制備

準確稱取25.0 g（精確至0.01 g）樣品置于勻質(zhì)機中，加入50.0 mL乙腈，勻質(zhì)5 min后用濾紙過濾。收集到的濾液轉(zhuǎn)移到裝有5 g氯化鈉的100 mL離心管中。為避免溶液泄漏，必須將蓋子旋緊，然后振蕩3 min后靜置。當發(fā)現(xiàn)溶液明顯分層時，從分層溶液中準確量取10 mL乙腈溶液，轉(zhuǎn)移到15 mL離心管中。將離心管放入氮吹儀中，水浴鍋溫度設置為40 ℃，氮吹濃縮至近干。再用正己烷（色譜純）準確定容至5.0 mL，振蕩混勻后，用0.2 μm濾膜過濾，待測。

1.3 儀器條件

色譜柱：DB-1彈性石英毛細管柱（60 m×250 μm，0.25 μm）；程序升溫：初始150 ℃，保持2 min，以6 ℃/min升溫至270 ℃，保持13 min，設置為恒流1.0 mL/min。

1.4 檢測器

檢測器：ECD；溫度：320.0 ℃；尾吹氣流量：60 mL/min。

1.5 數(shù)學模型

試樣中聯(lián)苯菊酯的計算公式為：

式中：ρ為標準溶液中農(nóng)藥的質(zhì)量濃度，mg/L；A為樣品溶液中被測農(nóng)藥的峰面積；As為農(nóng)藥標準溶液中被測農(nóng)藥的峰面積；V1為提取溶劑總體積，mL；V2為吸取出用于檢測的提取溶液的體積，mL；V3為樣品溶液定容體積，mL；m為試樣的質(zhì)量，g。

1.6 不確定來源分析

氣相色譜法測定辣椒中聯(lián)苯菊酯殘留量的主要不確定度來源有聯(lián)苯菊酯標準溶液的配制、樣品制備、重復性實驗和添加回收率。

2 結(jié)果與分析

2.1 標準溶液的配制引入的不確定度

2.1.1 標準物質(zhì)引入的不確定度urel(D)

根據(jù)標準物質(zhì)證書，聯(lián)苯菊酯的含量為100 μg/mL，擴展不確定度為0.5%，包含因子k=2，

2.1.2 標準儲備液定容引入的相對標準不確定度

標準儲備液定容不確定度由1 mL單標吸量管和100 mL容量產(chǎn)生，對所使用容量器具引入的相對標準不確定度評定結(jié)果見表1。

表1 標準溶液稀釋引入的不確定度

標準儲備液定容過程中引入的相對標準不確定度為：

2.1.3 標準工作液定容引入的相對標準不確定度

標準工作液定容不確定度由1 mL單標吸量管和10 mL容量瓶產(chǎn)生，對所使用容量器具引入的相對標準不確定度評定結(jié)果見表1。標準工作液定容過程中引入的相對不確定為：

標準工作液配制過程中引入的相對合成不確定度為：

2.2 樣品制備引入的不確定度urel(R)

樣品制備不確定度由天平、50 mL量筒、10 mL量筒和5 mL容量瓶產(chǎn)生，對所使用容量器具引入的相對標準不確定度評定結(jié)果見表2。

表2 試樣溶液稀釋引入的不確定度

天平校準證書規(guī)定，萬分之一天平的允許誤差為±0.5 mg，均勻分布，k=，稱取樣品25.0 g，則由天平引入的相對不確定度為：

試樣溶液稀釋引入的不確定度為：

樣品制備引入的不確定度為：

2.3 重復性實驗引入的不確定度urel(C)

取待測樣品溶液，按試樣方法測量6次，測量結(jié)果分別為0.044 7 mg/kg、0.043 6 mg/kg、0.043 5 mg/kg、0.045 5 mg/kg、0.043 1 mg/kg和0.044 1 mg/kg，測量結(jié)果平均值為0.044 mg/kg，相對標準偏差為2.01%。

2.4 添加回收率引入的不確定度urel(Q)

蘋果試樣在前處理過程中可能會損失部分聯(lián)苯菊酯，導致試樣中的聯(lián)苯菊酯未能全部進入氣相色譜儀中進行檢測。稱取6份空白蘋果試樣，分別進行6次同濃度同體積加標回收試驗，每個試樣進針2次，測得回收率為92.8%～101.6%，由加標回收率引入的不確定度為：

2.5 樣品中聯(lián)苯菊酯殘留量的合成不確定度

測定樣品中聯(lián)苯菊酯殘留量引入的相對合成不確定度為：

由3得知：樣品中聯(lián)苯菊酯含量X=0.044 mg/kg，則u(X)=0.027 91×0.044=0.001 228 mg/kg。

2.6 計算擴展不確定度U(X)

設定包含因子為2，則擴展不確定度為：

3 結(jié)論

本實驗依據(jù)標準《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》（NY/T761—2008）[9]第二部分方法二對蘋果中聯(lián)苯菊酯殘留量進行測定。通過對各步驟不確定度的計算可知，氣相色譜法測定蔬菜中聯(lián)苯菊酯殘留量的不確定度主要來自樣品制備和添加回收率，其他步驟對不確定度的影響較小。分析不確定度引入步驟，發(fā)現(xiàn)可以通過提高樣品制備的規(guī)范性和使用更精密的量器來降低不確定度。同時，及時做好氣相色譜儀的清潔維護工作，例如切割色譜柱、更換新的隔墊和襯管等，獲得更好的添加回收率，達到降低不確定度的目標。