段立廣 付 冉

（河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院 藥劑科，河北 石家莊 050000）

鹽酸帕羅西汀（Paroxetine Hydrochloride）作為選擇性5- 羥色胺（5-HT）再攝取抑制劑中的一員，因其耐受性好并且毒性低，目前已經(jīng)成為抑郁癥老年患者的一線治療藥物[1-5]。鹽酸帕羅西汀原料藥在合成生產(chǎn)中不可避免地需要引入并殘留一定量的有機(jī)溶劑，而這些有機(jī)溶劑嚴(yán)重影響人類身體健康[6-13]，所以需要有效控制有機(jī)溶劑殘留量以保障患者用藥安全。本研究參考了2015 版《中國(guó)藥典》相關(guān)規(guī)定及ICH 指導(dǎo)原則[14,15]，應(yīng)用頂空-氣相色譜法對(duì)甲醇、丙酮、異丙醇和二氯甲烷4 種有機(jī)溶劑的含量進(jìn)行了測(cè)定。

1 材料

1.1 儀器

7890B 型氣相色譜儀（美國(guó)Agilent 公司），XS105 型電子天平（美國(guó)Mettler Toledo 公司）；7697A 頂空進(jìn)樣器（美國(guó)Agilent 公司）。

1.2 藥品和試劑

鹽酸帕羅西汀原料藥（A 廠，批號(hào)：112041、112042、112043）；甲醇、丙酮、異丙醇和二氯甲烷對(duì)照品均來自天津精細(xì)化工有限公司；N,N- 二甲基甲酰胺為色譜純（Merke 公司）水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：DB-624 毛細(xì)管柱（30m×0.32mm，1.8μm）；進(jìn)樣方式采用程序升溫；進(jìn)樣口溫度200℃，F(xiàn)ID 檢測(cè)器溫度230℃，頂空溫度85℃，平衡時(shí)間30min；流速3.0mL/min 的高純氮?dú)庾鳛檩d氣，設(shè)置分流比為10:1；進(jìn)樣量1mL。

2.2 溶液的制備

2.2.1 混合對(duì)照品溶液

精密稱取1000mg 甲醇、2000mg 丙酮、20mg 異丙醇、300mg 二氯甲烷對(duì)照品，置同一100mL 容量瓶，加50%N,N- 二甲基甲酰胺溶劑溶解，定容至刻度，即得。

2.2.2 供試品溶液

精密稱取0.5g 樣品，置頂空瓶并精密加入5mL 50%N,N- 二甲基甲酰胺溶劑使溶解，密封，備用。

2.2.3 空白溶液

取5mL 50%N,N- 二甲基甲酰胺溶劑置頂空瓶，密封，備用。

2.3 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

精密量取2.2 項(xiàng)混合對(duì)照品、供試品和空白溶液各適量，依照“2.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣，結(jié)果見圖1。色譜圖中各成分之間的分離度均大于1.5。

圖1 對(duì)照品溶液（A）供試品溶液（B）空白溶液（C）氣相色譜圖1：甲醇；2：丙酮；3：異丙醇；4：二氯甲烷

2.4 線性關(guān)系考察

精密量取“2.2.1”項(xiàng)下1mL，2mL，5mL，10mL，25mL混合對(duì)照品分別置于100mL 容量瓶，加50%N,N- 二甲基甲酰胺水溶液稀釋，定容并振搖。依照“2.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)做線性回歸方程，見表1。結(jié)果表明，4 種有機(jī)溶劑的線性關(guān)系良好。

表1 4種殘留溶劑的線性關(guān)系

2.5 檢測(cè)限和定量限

將50%N,N- 二甲基甲酰胺水溶液加入到“2.2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品并逐級(jí)稀釋，依照“2.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣，設(shè)置信噪比S/N=3 時(shí)為檢測(cè)限，S/N=10 為定量限。結(jié)果：甲醇、丙酮、異丙醇和二氯甲烷的檢測(cè) 限 分 別 為0.015、0.015、0.008、0.009mg/ml；定量限分別為0.045、0.045、0.030mg/ml。

2.6 精密度試驗(yàn)

精密量取5mL“2.2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液，平行制備6 份，依照“2.1”項(xiàng)色譜條件測(cè)定。結(jié)果：甲醇、丙酮、異丙醇、二氯甲烷峰面積RSD 分 別 為：3.2%、2.0%、3.1%、2.6%（n=6），儀器精密度良好。

2.7 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密量取5mL“2.2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品，分別在0，1，2，3，6，12h進(jìn)樣，結(jié)果：甲醇、丙酮、異丙醇、二氯甲烷峰面積RSD 分別為：2.4%、2.1%、1.9%、2.2%，表明溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.8 重復(fù)性試驗(yàn)

精密稱取0.5g 批號(hào)為112043的樣品，依照“2.2.2”項(xiàng)方法配制供試品溶液，再依照“2.1”項(xiàng)色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6 次。結(jié)果，樣品中檢出的有機(jī)溶劑的含量RSD 均小于2.9%。

2.9 加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取9 份0.5g 批號(hào)為112043 的樣品置頂空瓶，并且加入0.8mL、1.0mL、1.2mL的混合對(duì)照品各三份，依照“2.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣，得加樣回收率結(jié)果如表2。

表2 加樣回收率試驗(yàn)

2.10 供試品的測(cè)定結(jié)果

取批號(hào)為112041、112042、112043 的3 批樣品各適量，依照“2.2.2”項(xiàng)下供試品溶液方法配制，再依“2.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣，將積峰面積帶入線性方程計(jì)算各有機(jī)溶劑殘留量。結(jié)果，在3 批樣品中未檢測(cè)到有異丙醇、二氯甲烷、甲醇、丙酮的殘留（n＝3）。

3 討論

實(shí)驗(yàn)研究了平衡時(shí)間分別為20min、30min、40min 和平衡溫度分別為60℃、85℃、100℃對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)條件為平衡溫度為85℃、平衡時(shí)間30min時(shí)，可以使測(cè)定結(jié)果更準(zhǔn)確可靠。

該方法選擇了改變初始溫度和升溫速率的方式，以適應(yīng)甲醇、丙酮、異丙醇和二氯甲烷的沸點(diǎn)不同，有的又及其接近的特點(diǎn)，最終達(dá)到有效分離，滿足實(shí)驗(yàn)要求。綜上所述，本方法能夠用于同時(shí)檢測(cè)鹽酸帕羅西汀原料藥中異丙醇、甲醇、丙酮和二氯甲烷的殘留量。