杜成龍，鄒知明，杜學(xué)振,3，陳祖高，袁天梅，李家鳴，陳明杰，陳杰燕

（1.廣西大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，廣西南寧 530004；2.廣西大學(xué)農(nóng)牧產(chǎn)業(yè)發(fā)展研究院，廣西南寧 530004；3.金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院，浙江金華 321017；4.廣西藤縣龍慶農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司，廣西藤縣 543311；5.廣西園豐牧業(yè)集團(tuán)股份有限公司，廣西靈山 535400；6.廣西芊河茶業(yè)發(fā)展有限公司，廣西蒼梧 543113）

以往，抗生素廣泛應(yīng)用于畜牧生產(chǎn)中來預(yù)防和治療動物疾病、提高生產(chǎn)性能和養(yǎng)殖效益，但其濫用及不合理使用帶來負(fù)面作用及潛在的危害性。根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第194 號要求，從2020 年7 月1 日起，飼料生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)停止生產(chǎn)含有促進(jìn)生長的飼料添加劑（中藥除外）的商品飼料。目前較為成熟的抗生素替代品主要有益生菌、免疫調(diào)節(jié)劑、植物提取物、抗菌肽等，但是依然不能完全達(dá)到抗生素的使用效果。因此，應(yīng)該開展相關(guān)探索研究，以尋找適宜的、綠色的抗生素替代品。茶麩中含有的茶皂素是一種優(yōu)良的非離子天然表面活性劑，可以提高動物的生長性能，改善動物產(chǎn)品的品質(zhì)，增強(qiáng)動物機(jī)體的免疫力和抗病力，是一種新型、安全、無公害的天然綠色飼料添加劑。堿性離子水可以提高動物生長性能，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，調(diào)節(jié)動物機(jī)體的酸堿平衡，改善機(jī)體免疫力等。堿性負(fù)離子水富含羥基負(fù)離子，能消除自由基，增加細(xì)胞的膜電位，促進(jìn)細(xì)胞的新陳代謝與自我修復(fù)能力，增強(qiáng)免疫力。本試驗(yàn)旨在研究茶麩與堿性負(fù)離子液二者混合使用對肉雞生長、消化吸收、健康、肉品質(zhì)的影響，為肉雞生產(chǎn)及相關(guān)研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 堿性負(fù)離子液（Alkaline Ionized Liquid，AIL）是由石家莊竹中科技有限公司工廠化生產(chǎn)的堿性電解液，主要含有氫離子、氫氧根離子，還含硅、鎂、鋅、硒、硼、鍶等多種處于離子態(tài)的金屬元素。

發(fā)酵茶麩為油茶籽經(jīng)過去殼冷炸后的茶麩，調(diào)節(jié)茶麩含水量到65%～70%，加入0.1%復(fù)合有益菌混合均勻，密封厭氧發(fā)酵15 d 以上，待其顏色呈紅褐色且有酸香味即可使用。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及日糧 挑選90 日齡、體重1 kg 左右健康的靈山香雞（母雞）180 只。將其隨機(jī)分為6 組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10 只。對照組喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)在基礎(chǔ)日糧上分別添加30 g/kg 發(fā)酵茶麩、60 g/kg 發(fā)酵茶麩、500 mg/kg AIL、500 mg/kg AIL+30 g/kg 發(fā)酵茶麩、500 mg/kg AIL+60 g/kg 發(fā)酵茶麩。發(fā)酵茶麩添加到基礎(chǔ)日糧中，AIL 添加到飲用水中。預(yù)試期7 d 和正試期45 d?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。基礎(chǔ)日糧在密封厭氧條件下添加有益菌進(jìn)行發(fā)酵。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)成分

1.3 飼養(yǎng)管理 養(yǎng)殖試驗(yàn)在梧州市蒼梧縣六堡鎮(zhèn)進(jìn)行。對雞舍進(jìn)行徹底消毒后空欄7 d 開始試驗(yàn)。然后轉(zhuǎn)入180 只靈山香雞，并按設(shè)計(jì)方案進(jìn)行分組分欄飼養(yǎng)。自由采食，保證充足飲水。

1.4 生長性能測定 預(yù)試7 d 后進(jìn)行空腹稱重，為初始重。正試期結(jié)束時(shí)早上對雞只進(jìn)行空腹稱重，為試驗(yàn)?zāi)┲?。記錄每天的飼料投放量和試?yàn)結(jié)束的剩料量。計(jì)算平均日增重、平均采食量以及耗料增重比。計(jì)算公式：

1.5 屠宰性能測定 試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)日，從每組隨機(jī)選擇6只雞（共計(jì)36 只）進(jìn)行屠宰測定。取胸肌和腿肌樣品冷凍保存并送廣西分析測試中心測定pH、肉色、系水力、剪切力，pH 用數(shù)顯pH 計(jì)測定同一樣品5個(gè)數(shù)值后取平均值；肉色用德國肉色測定儀（OPTO-STAR）測定同一樣品5個(gè)數(shù)值后取平均值；系水力用德國系水力電導(dǎo)率測定儀（LF-STAR）測定同一樣品5個(gè)數(shù)值后取平均值。其他指標(biāo)計(jì)算公式：

1.6 血液生化指標(biāo)檢測 在飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束前，試驗(yàn)雞只空腹12 h 后每個(gè)重復(fù)隨機(jī)挑選6 只雞進(jìn)行前腔靜脈采血，每只雞采集3～5 mL，室溫下靜止30 min 后3 000 r/min 離心15 min，將分離出來的血清轉(zhuǎn)入EP 管中，標(biāo)號備用。所有樣品當(dāng)天送至廣西梧州市六堡鎮(zhèn)衛(wèi)生院測定血清生化指標(biāo)。血清蛋白指標(biāo)包括總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、白球比值（A/G）；血清脂代謝指標(biāo)包括膽固醇（CHO）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL）；血清酶活性指標(biāo)包括谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天門冬氨酸轉(zhuǎn)移酶（GOT）、堿性磷酸酶（ALP）、谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）、膽堿酯酶（CHE）。

1.7 氨基酸指標(biāo)測定 胸肌和腿肌的氨基酸含量按照國家標(biāo)準(zhǔn)《食品中氨基酸的測定》（GB 5009.124-2016）方法測定。

1.8 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)用SPSS 22.0 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，并采用LSD 及Duncan's 法進(jìn)行多重比較。<0.05 為差異顯著。試驗(yàn)結(jié)果以平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果

2.1 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞生長性能的影響 由表2 可知，AIL+低發(fā)酵茶麩和AIL+高發(fā)酵麥麩組靈山香雞末重分別較對照組高8.63%、9.30%（<0.05）。AIL+高發(fā)酵麥麩組靈山香雞平均日增重較對照組增加32.03%（<0.05），各組的平均日采食量無變化。AIL、AIL+低發(fā)酵茶麩、AIL+高發(fā)酵茶麩組耗料增重比分別較對照組低18.33%、18.83%、21.03%（<0.05），與其他各試驗(yàn)組無顯著性差異；AIL+低發(fā)酵茶麩、AIL+高發(fā)酵茶麩組各生長性能指標(biāo)與低發(fā)酵茶麩、高發(fā)酵茶麩組均無顯著性差異。

表2 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞生長性能的影響

2.2 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞屠宰性能的影響 由表3可知，低發(fā)酵茶麩、高發(fā)酵茶麩、AIL、AIL+低發(fā)酵茶麩、AIL+高發(fā)酵茶麩組半凈膛率分別比對照組高1.51%、2.66%、5.36%、1.91%、0.52%（<0.05），且AIL 組水平最高；除AIL+低發(fā)酵茶麩組外，低發(fā)酵茶麩、高發(fā)酵茶麩、AIL、AIL+高發(fā)酵茶麩組全凈膛率分別比對照組高0.38%、0.39%、0.27%、0.19%（<0.05），且以高發(fā)酵茶麩組最高；AIL+低發(fā)酵茶麩、AIL+高發(fā)酵茶麩組胸肌率分別比對照組低32.96%、33.39.%（<0.05）。其他試驗(yàn)組與對照組之間無顯著性差異；各組間腿肌率差異不顯著；AIL+高發(fā)酵茶麩組皮下脂肪厚度比對照組低28.57%（<0.05）。

表3 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞屠宰性能的影響

2.3 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞肉品質(zhì)的影響 由表4可見，對照組胸肌pH 高于其他各組（<0.05），低發(fā)酵茶組低于其他各組（<0.05），其他各組間無顯著性差異；各組間肉色、系水率、剪切力無顯著差異。AIL+高發(fā)酵茶麩組腿肌pH 分別比高發(fā)酵茶麩組和對照組高2.95%、1.89%（<0.05），低發(fā)酵茶麩、高發(fā)酵茶麩、AIL、AIL+高發(fā)酵茶麩組剪切力分別比對照組低38.37%、27.11%、40.19%、32.22%（<0.05）。各組間肉色、系水率差異不顯著。

表4 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞肉品質(zhì)的影響

2.4 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞肌肉氨基酸含量的影響由表5 可知，AIL+高發(fā)酵茶麩組必需氨基酸含量分別比對照組和低發(fā)酵茶麩組高12.52%、16.32%（<0.05）。高發(fā)酵茶麩、AIL+低發(fā)酵茶麩、AIL+高發(fā)酵茶麩組風(fēng)味氨基酸分別比對照組高5.16%、5.41%、22.42%（<0.05）；AIL+高發(fā)酵茶麩組氨基酸總量分別比對照組、低發(fā)酵茶麩、高發(fā)酵茶麩、AIL、AIL+低發(fā)酵茶麩組高18.04%、20.49%、13.69%、11.98%、13.13%（<0.05）。

表5 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞肌肉氨基酸含量的影響 g/100 g 鮮肉

2.5 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山雞血液生化指標(biāo)的影響

2.5.1 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞血清蛋白代謝的影響由表6 可知，AIL 組A/G 較高發(fā)酵茶麩組高22.67%（<0.05），其他各組間無顯著性差異。

表6 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞血清蛋白代謝的影響

2.5.2 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞脂肪代謝的影響 由表7 可知，AIL+低發(fā)酵茶麩組CHO 分別比高發(fā)酵茶麩、低發(fā)酵茶麩組高40.22%、23.38%（<0.05），但與對照組無顯著性差異；試驗(yàn)組TG 與對照組間均無顯著性差異；AIL+低發(fā)酵茶麩組HDL 分別比對照組、低發(fā)酵茶麩、高發(fā)酵茶麩、AIL 組高69.93、58.82%、91.33%、54.78%（<0.05）。各組間LDL 無顯著性差異，各試驗(yàn)組均有降低的趨勢。

表7 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞脂代謝的影響 mmol/L

2.5.3 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞血清酶活性的影響由表8 可見，ALP、CHE、ALT 均有增高的趨勢，但各組之間均無顯著性差異。

表8 發(fā)酵茶麩和堿性負(fù)離子液對靈山香雞血清酶活性的影響 U/L

3 討 論

3.1 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞生長性能的影響 在本試驗(yàn)中，單獨(dú)添加30、60 g/kg 發(fā)酵茶麩或堿性負(fù)離子液都有提高靈山香雞的末重、平均日采食量、降低耗料增重比的作用，添加500 mg/kg AIL+60 g/kg、500 mg/kg AIL+30 g/kg 發(fā)酵茶麩發(fā)酵茶麩可以顯著提高肉雞的末重，顯著降低耗料增重比，而添加500 mg/kg AIL+60 g/kg 可顯著提高平均日增重。堿性離子水極易進(jìn)出細(xì)胞膜內(nèi)外、活性大、滲透力強(qiáng)、溶解度高、與細(xì)胞親和性好，可有效地將養(yǎng)分帶入細(xì)胞，加速人體新陳代謝，有利于廢物排出，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)很快被吸收。另有研究表明，用500～600 mg/kg 茶皂素替代常規(guī)抗生素可明顯提高泰和雞的生產(chǎn)性，提高飼料轉(zhuǎn)化率。陳寶江等、李金洪也有類似的報(bào)道。AIL 與發(fā)酵茶麩聯(lián)合應(yīng)用可顯著提高肉雞生長性能，發(fā)酵茶麩添加量以60 g/kg效果最優(yōu)。可能是兩者都具有促進(jìn)機(jī)體營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，最終提高動物的生長，其聯(lián)合作用機(jī)理尚待研究。

3.2 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞屠宰性能的影響 本試驗(yàn)中，各試驗(yàn)組半凈膛率、全凈膛率較對照組均有顯著提高（AIL+30 mg/kg 發(fā)酵茶麩全凈膛除外），說明AIL 單獨(dú)或與發(fā)酵茶麩聯(lián)合使用均可提雞的高屠宰性能。其機(jī)理可能是AIL 可以提高機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，提高消化吸收率有利于沉積更多的肌肉。陳瑋等研究結(jié)果表明，在肉雞日糧中添加400、500 mg/kg 茶皂素能顯著增高肉雞屠宰率。

3.3 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞肉品質(zhì)的影響 本研究結(jié)果表明，60 mg/kg 發(fā)酵茶麩組胸肌、腿肌pH 均較對照組顯著降低，可能與高比例發(fā)酵茶麩（pH 為5.3）的長期飼喂、酸堿中和作用有關(guān)。60 mg/kg 發(fā)酵茶麩與AIL 一起添加時(shí)并沒有改變胸肌pH，而腿肌pH 有明顯提高，其機(jī)理有待研究。60 mg/kg 發(fā)酵茶麩組可使腿肌肉色變深，單獨(dú)添加AIL 肉色變淺，而與AIL 一起使用腿肌肉色與對照組接近，可能與AIL 提高肌內(nèi)脂肪含量有關(guān)。肌肉中水分越高肉質(zhì)越嫩，剪切力越小肉質(zhì)越嫩。與對照組相比，各試驗(yàn)組均有提高系水力降低肌肉剪切力的作用但效果不顯著，其作用機(jī)理可能是茶皂素有提高雞胸肌、腿肌pH 降低肌肉中滴水損失的趨勢從而提高了肌肉系水率肉質(zhì)嫩度有關(guān)。

3.4 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞肌肉氨基酸含量的影響精氨酸、丙氨酸、谷氨酸、天冬氨酸和甘氨酸等風(fēng)味氨基酸的含量能夠在一定程度上反映其鮮味程度，是鮮味的主要來源。本研究結(jié)果表明，添加AIL+60 g/kg 發(fā)酵茶麩可顯著提高風(fēng)味氨基酸、必需氨基酸含量。這說明發(fā)酵茶麩和AIL 聯(lián)合應(yīng)用可以增加雞肉中氨基酸的含量并能改善雞肉的風(fēng)味，其作用原理是AIL 為氨基酸脫氫酶菌株提供了一個(gè)pH 較高的環(huán)境，在一定程度上抑制了一些氨基酸脫氫酶活性，提高了氨基酸酸含量，如抑制谷氨酸脫氫酶提高了肌肉中-谷氨酸含量。茶皂素可以通過提高營養(yǎng)物質(zhì)吸收從而提高機(jī)體內(nèi)氨基酸含量。相關(guān)研究表明，茶皂素可以刺激腎上腺髓質(zhì)，使其分泌激素量增加，從而提高cAMP/cGMP 活性，進(jìn)而使消化酶的活性增強(qiáng)，最終促進(jìn)了機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。

3.5 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山雞血液生化指標(biāo)的影響

3.5.1 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞血清蛋白代謝的影響本試驗(yàn)中，各試驗(yàn)組總蛋白及球蛋白均高于對照組，但差異不顯著，這說明發(fā)酵茶麩及AIL 均能在一定程度上促進(jìn)肉雞血清蛋白的代謝，其作用原理是茶皂素能夠提高腦干中的去甲腎上腺素及多巴胺的含量，進(jìn)而增強(qiáng)cAMP 活性，三者可以通過-腎上腺素受體的作用，增強(qiáng)甲狀腺激素、胰島素的活性，從而促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成。同時(shí)茶皂素中的CN（4Rg）及 CN3（Rb1、Rb2、Rb3）是蛋白質(zhì)進(jìn)行合成的促進(jìn)因子，尤其是可以促進(jìn)免疫球蛋白及血清蛋白的合成。

3.5.2 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞脂肪代謝的影響 本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，AIL+60 mg/kg 發(fā)酵茶麩組皮下脂肪厚度顯著低于對照組、低發(fā)酵茶麩組、高發(fā)酵茶麩組。有研究表明，AIL 有乳化TG、降低血清CHO 的作用。高發(fā)酵茶麩中的茶皂素和益生菌可使機(jī)體脂肪分解代謝酶（如激素敏感酯酶）等的活性提高，分解TG 從而降低機(jī)體脂肪，但還需要研究進(jìn)一步證實(shí)。陳瑋研究表明，在日糧中添加高劑量的茶皂素可以有效降低肉雞血清中CHO、TG 含量。

3.5.3 發(fā)酵茶麩和AIL 對靈山香雞血清酶活性的影響本試驗(yàn)中，無論是發(fā)酵茶麩或AIL 單獨(dú)使用，還是兩者聯(lián)合應(yīng)用均高于對照組，天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶均低于對照組，這說明發(fā)酵茶麩及AIL 均能增強(qiáng)肉雞骨細(xì)胞的活性，提高骨代謝，同時(shí)可以修復(fù)肝臟功能，促進(jìn)肝臟健康。其作用原理可能是茶皂素和AIL 具有抗氧化功能，茶皂素可以清除超氧陰離子自由基（O·）及羥自由基（·OH），從而起到保護(hù)機(jī)體的組織和細(xì)胞的作用。

4 結(jié) 論

本研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加2 種濃度的發(fā)酵茶麩與AIL 的聯(lián)合使用對靈山香雞的生長性能、屠宰性能、肉質(zhì)性能具有積極影響，效果顯著且添加比例以500 mg/kg AIL+60 g/kg 發(fā)酵茶麩效果最佳。