黎 華 黎 靜 劉秋婷 楊云飛 梁雅茜

卵巢癌的早期癥狀一般不是很明顯，所以經(jīng)常被忽視，患病早期沒有非常準(zhǔn)確的檢測(cè)技術(shù)，大部分患者發(fā)現(xiàn)的時(shí)候已經(jīng)進(jìn)入晚期。確定卵巢癌的腫瘤標(biāo)志物，通過標(biāo)志物檢測(cè)為卵巢癌的診斷提供準(zhǔn)確依據(jù)，這是實(shí)踐中需要解決的一個(gè)重要問題。從研究成果來看，波形蛋白、抑制素A(INH-A)分別在識(shí)別腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移和早期病灶產(chǎn)生等方面具有明顯的標(biāo)志性作用，所以很多研究成果針對(duì)這兩種標(biāo)志物的檢測(cè)及其在卵巢癌診斷中的價(jià)值進(jìn)行了分析與研究[1,2]，本研究也是在這一背景之下針對(duì)這兩種標(biāo)志物的檢測(cè)及其應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行分析。

1.資料與方法

1.1 一般資料 為了更加詳細(xì)客觀地評(píng)價(jià)波形蛋白聯(lián)合抑制素A檢測(cè)在卵巢癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值，特向廣西壯族自治區(qū)江濱醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)申請(qǐng)并獲得批準(zhǔn)，經(jīng)患者知情同意后選擇我院門診接診的88例高度疑似卵巢癌的患者作為研究對(duì)象，患者的年齡為32～68歲，平均年齡(49.29±6.17)歲，體重為48～71kg，平均體重為(58.79±6.53)kg。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有自身免疫系統(tǒng)疾病患者；②心臟、肝臟、腎臟等嚴(yán)重臟器疾病患者；③合并患有其他惡性腫瘤。按照這一標(biāo)準(zhǔn)排查以后，上述患者當(dāng)中均不存在上述情況，符合研究的標(biāo)準(zhǔn)和要求。

1.2 檢測(cè)方法 由于患者均采用手術(shù)治療，所以在研究中采用免疫組織化學(xué)方法對(duì)切除組織中的波形蛋白和抑制素A進(jìn)行檢測(cè)，具體的檢測(cè)步驟如下。①手術(shù)結(jié)束后立即將患者的切除組織用石蠟包埋，然后制取切片(厚度為4μm)。②水化處理及滅活，使用梯度乙醇進(jìn)行水化處理，再使用3%的過氧化氫對(duì)樣本中內(nèi)源性氧化酶滅活處理，最后再進(jìn)行微波抗原清洗。③清洗后先密封10min，然后滴加第一抗體，靜置孵育12h，再使用第二抗體等進(jìn)行二次孵育20min，孵育過程中的溫度要始終控制在4℃。④滴加氧化二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色液染色5min，沖洗后經(jīng)過復(fù)染等步驟在電子顯微鏡之下觀察。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) 以染色強(qiáng)度及陽性細(xì)胞占比作為評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)所有患者進(jìn)行評(píng)定，評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)如下：①染色強(qiáng)度：棕色極強(qiáng)(3分)、棕黃色較強(qiáng)(2分)、淡黃色一般(1分)、無色(0分)。②陽性細(xì)胞占比評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：≥75%(4分)；<75%且≥51%(3分)；≤50%且≥26%(2分)；≤25%且≥5%(1分)；<5%(0分)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0對(duì)研究中的相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，并對(duì)評(píng)價(jià)指標(biāo)及檢測(cè)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)之間進(jìn)行一致性Kappa檢測(cè)，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 病理診斷結(jié)果 88例高度疑似卵巢癌患者經(jīng)過詳細(xì)科學(xué)的臨床病理檢查以后，確診卵巢癌41例，良性病變47例，分別占45.59%和53.41%。良性病變以纖維上皮瘤和纖維瘤為主，分別有16例和13例，占34.04%和29.79%，除此之外還有黏液性囊腺瘤、漿液性腺囊瘤。

2.2 波形蛋白聯(lián)合抑制素A檢測(cè)結(jié)果分析 本研究分別使用波形蛋白、抑制素A和上述兩種聯(lián)合檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)，然后就檢測(cè)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較分析，具體的檢測(cè)結(jié)果見表1。

表1 波形蛋白聯(lián)合抑制素A檢測(cè)結(jié)果分析 單位：例

將上述研究結(jié)果進(jìn)行一致性檢驗(yàn)，從檢驗(yàn)結(jié)果中來看，波形蛋白的一致性比較差，為0.195，說明檢測(cè)結(jié)果與實(shí)際確診數(shù)量之間存在不少的偏差。抑制素A的一致性檢驗(yàn)結(jié)果為0.212，一致性也比較差。相對(duì)前兩種結(jié)果，聯(lián)合檢測(cè)的一致性比較好，達(dá)到了0.805，前兩者與聯(lián)合檢驗(yàn)之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義0.089(P<0.05)。

3.結(jié)論

卵巢癌是女性常見惡性腫瘤之一，最近幾年呈現(xiàn)發(fā)病率逐漸增長(zhǎng)的趨勢(shì)。導(dǎo)致卵巢癌發(fā)病率增長(zhǎng)的原因有很多，除了遺傳和內(nèi)分泌等方面的因素之外，飲食和生活環(huán)境以及工作壓力等也是非常重要的誘因。由于卵巢癌早期癥狀非常不明顯，與腹痛、腸胃炎等癥狀非常相似，所以很容易被患者忽視，如果不進(jìn)行詳細(xì)的癌癥早期臨床診斷，單純通過體檢等方式很難發(fā)現(xiàn)早期癥狀，所以很多卵巢癌患者被發(fā)現(xiàn)時(shí)已經(jīng)是癌癥晚期，不管是治療還是生活質(zhì)量都會(huì)大受影響。另外，卵巢癌的細(xì)胞生物學(xué)特征非常復(fù)雜，這種復(fù)雜性的特征決定了不能用一般的腫瘤標(biāo)志物對(duì)其檢測(cè)，因?yàn)闄z測(cè)的準(zhǔn)確度相對(duì)比較低，這是卵巢癌早期發(fā)現(xiàn)率比較低的一個(gè)非常重要的原因。要想破解卵巢癌早期癥狀診斷難的問題，需要有準(zhǔn)確度和敏感度更加高的腫瘤標(biāo)志物或更加先進(jìn)的檢測(cè)技術(shù)。波形蛋白是一種比較典型的中間纖維蛋白質(zhì)，主要維持細(xì)胞骨架的完整性，現(xiàn)有的一些研究成果表明其參與腫瘤轉(zhuǎn)移的過程，所以在很多腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)中都將其作為一個(gè)重要的檢測(cè)標(biāo)志物[3～5]。波形蛋白一般情況下并非用于卵巢癌的早期檢測(cè)，而是用于肝癌或者乳腺癌的檢測(cè)，因?yàn)樗谶@些癌癥中表達(dá)比較高?，F(xiàn)有的研究成果表明，卵巢癌的臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移也有密切的關(guān)系，所以在本研究中將其作為腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)分析。抑制素A是女性卵巢顆粒細(xì)胞的異二聚體蛋白質(zhì)激素，作用是抑制女性卵巢雌激素的分泌[6～8]，如果抑制素A指標(biāo)出現(xiàn)異常，提示性腺激素的合成和釋放出現(xiàn)異常。一些研究成果表明抑制素A會(huì)導(dǎo)致卵巢上皮細(xì)胞的異常增殖，所以有學(xué)者認(rèn)為抑制素A異常是女性卵巢癌發(fā)病的一個(gè)重要標(biāo)志[9～11]。 本研究將上述兩種物質(zhì)作為檢測(cè)對(duì)象進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)， 雖然抑制素A與波形蛋白都可以作為卵巢癌診斷的標(biāo)志物，但是單一檢測(cè)的準(zhǔn)確度與敏感度比較差，會(huì)增加疾病漏診率和誤診率， 但是聯(lián)合檢測(cè)的準(zhǔn)確度與敏感度比較高。本研究中抑制素A與波形蛋白聯(lián)合檢測(cè)對(duì)疾病的判斷與病理診斷的一致性達(dá)到了0.805，抑制素A與波形蛋白單獨(dú)檢測(cè)與聯(lián)合檢驗(yàn)之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，聯(lián)合診斷能夠明顯提高卵巢癌的診斷效能，與王博[12]、寇建芳[13]等的研究一致。

綜上所述，波形蛋白、抑制素A在卵巢癌的診斷中都可以作為標(biāo)志物，但是單一檢4測(cè)方法的準(zhǔn)確性比較差，聯(lián)合檢測(cè)準(zhǔn)確性比較高，在臨床上可以將聯(lián)合檢測(cè)作為早期確診的重要輔助依據(jù)[14,15]。