葉樹(shù)濤，顧光仕，李 煜，方 周，張 晶，楊金輝，鄭國(guó)華，陳 輝

（福建農(nóng)林大學(xué) a.林學(xué)院；b.經(jīng)濟(jì)林研究所；c.園藝學(xué)院，福建 福州 350002）

錐栗Castanea henryi為殼斗科栗屬高大落葉喬木，雌雄異花同株，主要栽培于福建省北部和浙江省南部地區(qū)，是我國(guó)南方重要的木本糧食樹(shù)種。錐栗果實(shí)糯甜，富含淀粉、可溶性蛋白、蔗糖、可溶性糖等多種營(yíng)養(yǎng)成分，同時(shí)含有17 種氨基酸，其中包括7 種人體必需氨基酸[1-3]，長(zhǎng)期食用錐栗對(duì)于高血壓和心血管疾病的預(yù)防大有裨益[4]。

栗疫病是一種由栗屬樹(shù)種感染栗疫菌Cryphonectria parasitica后引起的真菌性病害[5]。栗疫菌危害的主要部位為樹(shù)干和主枝，當(dāng)栗屬樹(shù)種被栗疫菌侵染后，首先其表皮形成褐色凹陷病斑，隨后腫脹或縱向龜裂，病害嚴(yán)重發(fā)生時(shí)整株會(huì)枯死[6-8]。栗疫病對(duì)植物物種有著毀滅性的危害。20世紀(jì)初，栗疫病在美國(guó)紐約美洲栗上被發(fā)現(xiàn)，在隨后的幾十年里，此病害在北美嚴(yán)重發(fā)生，致使美洲栗樹(shù)遭受滅頂之災(zāi)[9]；從20世紀(jì)30年代開(kāi)始，栗疫病在歐洲大面積蔓延，使得歐洲栗也被嚴(yán)重侵害[10]。20世紀(jì)90年代初期，我國(guó)在福建錐栗林中首次調(diào)查到疑似感染栗疫病的植株，經(jīng)鑒定后證實(shí)該植株的確被栗疫菌侵染[11]。目前，有關(guān)栗疫病的防治方法主要有噴施化學(xué)藥物（如波爾多液和多菌靈）、物理刮除染病組織、增施有機(jī)肥以減輕感病程度、篩選低毒力菌株等種方法，但是，采用這些防治措施還不能從根本上解決問(wèn)題，只有選育出抗栗疫病的新品種才能從根本上防治栗疫菌病害[12-14]。美國(guó)科學(xué)家大力開(kāi)展美洲栗的抗栗疫病育種工作，將對(duì)栗疫病具有較強(qiáng)抗性的中國(guó)板栗引種到美國(guó)，開(kāi)展雜交育種工作，目前已取得了顯著成效[15]。有關(guān)板栗疫病的研究?jī)?nèi)容目前主要集中在選擇育種和抗性基因定位等方面[16-17]。

錐栗作為我國(guó)特有的三大栗屬樹(shù)種之一，其經(jīng)濟(jì)價(jià)值與營(yíng)養(yǎng)價(jià)值均極高。栗疫病的發(fā)生會(huì)使大量錐栗樹(shù)減產(chǎn)甚至死亡，結(jié)果會(huì)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，并帶來(lái)嚴(yán)重的生態(tài)危害，因此，急需選育出對(duì)栗疫病具有較強(qiáng)抗性的新品種來(lái)應(yīng)對(duì)栗疫病的危害。為給錐栗高抗病性、優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)良種的選育提供參考依據(jù)，以福建省建甌市廣為栽培的17個(gè)農(nóng)家品種為供試材料，對(duì)其抗栗疫病性與果實(shí)表型性狀的變異情況進(jìn)行了調(diào)查與分析，現(xiàn)將研究結(jié)果分析報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材 料

研究地位于福建省建甌市水源鄉(xiāng)（27°8′5″N，118°48′21″E）。供試品種為福建省建甌市水源鄉(xiāng)廣為栽培的17個(gè)錐栗農(nóng)家品種，其分別為‘處暑紅’‘雙峰子’‘大包榛’‘烏榛’‘大尖嘴’‘油榛’‘中尖嘴’‘黃榛’‘鐵錐’‘油桐仔’‘小尖嘴’‘烏殼長(zhǎng)芒’‘紅仔榛’‘歐寧仔’‘白露仔’‘牛角仔’（晚熟）和‘牛角仔’（中熟），均為2000年以當(dāng)?shù)匾吧F栗為砧木嫁接的無(wú)性系。采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，每個(gè)試驗(yàn)小區(qū)各種植10 株，設(shè)3 次重復(fù)，其株行距均為5 m×6 m。

1.2 方 法

1.2.1 病原菌的分離與觀察

依據(jù)栗疫病的發(fā)病特征尋找疑似感染栗疫病的植株，采集其侵染部位組織帶回實(shí)驗(yàn)室保存。剪取長(zhǎng)×寬為2 mm×2 mm 的病斑組織，用無(wú)菌水沖洗干凈后，先將其放入70%的酒精中表面消毒30 s，再放入0.1%的升汞溶液中消毒60 s，然后用無(wú)菌水沖洗。將病斑塊接種在PDA 培養(yǎng)基上，置于28 ℃的光照恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5 d，然后用打孔器在菌落邊緣打取直徑為3 mm 的菌塊，將其接種在新的PDA 培養(yǎng)基上繼續(xù)純化，純化2 次后便可使用。

形態(tài)學(xué)的觀察：培養(yǎng)5 d 后觀察菌落的形態(tài)，在光學(xué)顯微鏡下觀察分生孢子器和分生孢子的形態(tài)，測(cè)量分生孢子的大小，觀察菌落特征、分生孢子器的顏色和菌絲形態(tài)特征。

病原菌的序列分析：取培養(yǎng)2 ～3 d 的菌落邊緣的菌絲，使用真菌DNA 試劑盒（OMEGA，美國(guó)）提取病原菌的DNA。

采用真菌生物通用引物ITS1（5′-TCCGTAGGT GAACCTGCGG-3′）作為擴(kuò)增引物。

PCR 反應(yīng)體系：上游引物和下游引物各1 μL，DNA 模板1 μL，10×PCR buffer 5 μL，dNTP 1 μL，rTaq 酶0.5 μL，ddH2O 40.5 μL，將擴(kuò)增獲得的PCR 產(chǎn)物進(jìn)行DNA 測(cè)序，將獲得的病原菌核糖體DNA-ITS 序列與數(shù)據(jù)庫(kù)NCBI（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/）中公布的栗疫菌ITS 區(qū)序列進(jìn)行同源性比對(duì)。

1.2.2 錐栗疫病抗性的檢測(cè)

參照有關(guān)文獻(xiàn)[18-20]中說(shuō)明的方法（適當(dāng)改進(jìn)）對(duì)栗疫病抗性進(jìn)行評(píng)價(jià)。從每個(gè)農(nóng)家品種中挑選健康植株，選取其1年生枝條進(jìn)行栗疫菌接種，每株植株各選取粗度一致的枝條6 根，接種前使用無(wú)菌水沖洗3 遍，用接種針在枝條表面刺出直徑為3 mm 的環(huán)形傷口，傷口深至木質(zhì)部。用直徑為3 mm 的打孔器將培養(yǎng)5 d 的栗疫菌打成菌塊，每根枝條接種3個(gè)菌斑，使用挑針將菌塊的菌絲面與枝條的傷口接壤處貼合，然后用浸水的無(wú)菌棉包裹以保濕，最后用保鮮膜將無(wú)菌棉包裹起來(lái)，防止無(wú)菌棉脫落及外來(lái)雜菌的侵染，以接種空白培養(yǎng)基的為對(duì)照。從所選植株上采集長(zhǎng)為20 cm的1年生枝條，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行室內(nèi)接種。室內(nèi)接種時(shí)，將枝條用無(wú)菌水沖洗后，先放入2%的次氯酸鈉溶液中浸泡10 min，再用無(wú)菌水沖洗干凈自然風(fēng)干。同室外接種一樣，每根枝條各接種3個(gè)病斑，以接種空白培養(yǎng)基的為對(duì)照。室內(nèi)接種時(shí)，先將枝條兩端裹上浸了水的無(wú)菌棉，然后將其放入接種盤(pán)中，再將接種盤(pán)用保鮮膜包裹起來(lái)置于28 ℃的光照培養(yǎng)室中培養(yǎng)。所有的接種材料在接種7 d 后均應(yīng)取下保鮮膜和無(wú)菌棉，再繼續(xù)觀察。

在接種的第21 天，使用游標(biāo)卡尺對(duì)病斑的長(zhǎng)和寬進(jìn)行測(cè)量，以橢圓面積的計(jì)算公式計(jì)算病斑面積。枝條面積=枝條截面周長(zhǎng)×病斑長(zhǎng)（枝條截面周長(zhǎng)=π×病斑處枝條直徑）；染病率=病斑面積/枝條面積。依據(jù)染病率將錐栗疫病侵染程度分為5 級(jí)：1 級(jí)，染病率＜20%；2 級(jí)，20%≤染病率＜30%；3 級(jí)，30%≤染病率＜40%；4 級(jí)，40%≤染病率＜50%；5 級(jí)，染病率≥50%。根據(jù)如下公式計(jì)算錐栗疫病染病指數(shù)：染病指數(shù)=∑（代表數(shù)值×病級(jí)株數(shù)）×100/（發(fā)病最重級(jí)的代表數(shù)值×株數(shù)總和）。再依據(jù)染病指數(shù)將錐栗對(duì)疫病的抗性分為如下幾個(gè)等級(jí)：免疫級(jí)（I），染病指數(shù)=0；抗病級(jí)（R），0 ＜染病指數(shù)＜35；感病級(jí)（S），35 ≤染病指數(shù)＜50；高感病級(jí)（H），染病指數(shù)≥50。

1.2.3 果實(shí)表型性狀的測(cè)定

利用電子天平測(cè)量錐栗總苞質(zhì)量和果質(zhì)量，利用游標(biāo)記卡尺測(cè)量果苞長(zhǎng)、果苞寬、果苞高、果苞厚、果長(zhǎng)、果寬、果高。

果實(shí)成分測(cè)定主要包括淀粉（蒽酮比色法）[21]、蔗糖（間苯二酚法）[21]、還原性糖（3,5-二硝基水楊酸法）[21]、可溶性糖（蒽酮比色法）[22]、可溶性蛋白（考馬斯亮藍(lán)G-250 染色法）[22]。

1.2.4 染病率和果實(shí)表型性狀的統(tǒng)計(jì)分析

利用Excel 和SPSS 軟件對(duì)栗疫病染病率和果實(shí)表型性狀分別進(jìn)行變異分析、方差分析、相關(guān)性分析、聚類分析，對(duì)栗疫病染病率和果實(shí)表型性狀指標(biāo)測(cè)定值進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，將室內(nèi)室外接種枝條的栗疫病染病率及其標(biāo)準(zhǔn)化值進(jìn)行平均化處理，取染病率的負(fù)數(shù)值為抗病性數(shù)值，將果實(shí)表型性狀指標(biāo)測(cè)定值平均化處理后獲取標(biāo)準(zhǔn)化值，對(duì)所有標(biāo)準(zhǔn)化值進(jìn)行累加并排序，選擇出表現(xiàn)優(yōu)良的農(nóng)家品種。變異系數(shù)、重復(fù)力、標(biāo)準(zhǔn)化值的計(jì)算公式分別如下：

式（1）～（3）中：CV為變異系數(shù)，S為標(biāo)準(zhǔn)差，M為平均值；R為重復(fù)力，F(xiàn)為檢驗(yàn)值；Zx為標(biāo)準(zhǔn)化值，X為原始值，為總平均值，XS為總平均標(biāo)準(zhǔn)差。

2 結(jié)果與分析

2.1 病原菌的鑒定

2.1.1 病原菌的形態(tài)學(xué)觀察

采集疑似栗疫病的病原菌，經(jīng)分離、純化、培養(yǎng)得到菌株ZLYB。培養(yǎng)3 d 后觀察到的病原菌菌落形態(tài)如圖1所示。從圖1 中可以看出，菌落呈近圓形，菌絲為乳白色，菌落中心為橘黃色，邊緣菌絲為白色。在電子顯微鏡下觀察到的病原菌子實(shí)體如圖2所示。從圖2 中可以看出，病原菌的主要特征為：子座大小約0.2 mm，顏色為橘黃色。

圖1 病原菌菌落Fig.1 Colony of pathogenic bacteria

圖2 病原菌子實(shí)體Fig.2 Fruiting bodies of pathogens

2.1.2 病原菌核糖體DNA-ITS 序列的比對(duì)

將病原菌的序列導(dǎo)入數(shù)據(jù)庫(kù)NCBI 中進(jìn)行比對(duì)，獲得其與63 條C.parasitica序列相似度的均值為86.90%；其中，病原菌與C.parasiticaKC844302.1 的相似度最高，為89.76%。依據(jù)病原菌的形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果及病原菌DNA 比對(duì)結(jié)果，確定分離的病原菌菌株為栗疫菌C.parasitica。

2.2 栗疫病抗性的評(píng)價(jià)結(jié)果

17個(gè)錐栗農(nóng)家品種栗疫病抗性的室內(nèi)與室外評(píng)價(jià)結(jié)果見(jiàn)表1。由表1 可知，室內(nèi)接種枝條的栗疫病染病指數(shù)高于室外栗疫菌的接種結(jié)果。室外接種枝條上病斑面積最小和最大的農(nóng)家品種分別為‘小尖嘴’與‘雙峰子’，其病斑面積分別為12.8 和76.8 mm2；室內(nèi)接種枝條上病斑面積最小和最大的農(nóng)家品種分別為‘中尖嘴’與‘紅仔榛’，其病斑面積分別為31.7 和95.5 mm2。室外接種枝條染病率最小和最大的農(nóng)家品種分別為‘小尖嘴’與‘烏榛’，其染病率分別為 11.1%和30.3%；室內(nèi)接種枝條染病率最小和最大的農(nóng)家品種分別為‘中尖嘴’與‘紅仔榛’，其染病率分別為22.4%和39.7%。室外接種枝條染病指數(shù)最小和最大的農(nóng)家品種分別為‘小尖嘴’與‘烏榛’，其染病指數(shù)分別為10 和50；室內(nèi)接種枝條染病指數(shù)最小和最大的農(nóng)家品種分別為‘中尖嘴’與‘處暑紅’，其染病指數(shù)分別為33.3 和70.0。17個(gè)錐栗農(nóng)家品種栗疫病抗性的綜合評(píng)價(jià)結(jié)果見(jiàn)表2。17個(gè)錐栗農(nóng)家品種中，沒(méi)有對(duì)栗疫病的侵染表現(xiàn)出免疫級(jí)(I)抗性的農(nóng)家品種；‘中尖嘴’‘黃榛’‘鐵錐’‘油桐仔’‘小尖嘴’‘牛角仔’（晚熟）‘牛角仔’（中熟）‘白露子’這8個(gè)農(nóng)家品種對(duì)栗疫病的侵染均表現(xiàn)出R 級(jí)（較抗）的抗性；‘大包榛’‘大尖嘴’‘油榛’‘歐寧仔’這4個(gè)農(nóng)家品種對(duì)栗疫病的侵染均表現(xiàn)出S 級(jí)（易感）的抗性；‘處暑紅’‘雙峰子’‘烏榛’‘烏殼長(zhǎng)芒’‘紅仔榛’這5個(gè)農(nóng)家品種對(duì)栗疫病的侵染均表現(xiàn)出H 級(jí)（高感）的抗性。

表1 栗疫病抗性評(píng)價(jià)結(jié)果Table 1 Evaluation results of resistance to chestnut blight

表2 栗疫病抗性綜合評(píng)價(jià)結(jié)果Table 2 Comprehensive evaluation results of chestnut blight resistance

2.3 栗疫病抗性和果實(shí)表型性狀的變異分析

17個(gè)錐栗農(nóng)家品種栗疫病抗性和果實(shí)表型性狀的變異分析結(jié)果見(jiàn)表3。由表3 可知，17個(gè)錐栗農(nóng)家品種的15個(gè)表型性狀指標(biāo)均存在不同程度的變異。果實(shí)成分表型性狀中，‘歐寧仔’果實(shí)中可溶性糖含量的變異系數(shù)（43.66%）最大；‘油桐仔’果實(shí)中還原糖的變異系數(shù)（0.39%）最小。栗疫病表型性狀中，‘黃榛’栗疫病染病率的變異系數(shù)（32.42%）最大，‘小尖嘴’栗疫病染病率的變異系數(shù)（11.17%）最小。果實(shí)形態(tài)表型性狀中，‘油榛’果質(zhì)量的變異系數(shù)（42.72%）最大，‘紅仔榛’果苞高的變異系數(shù)（0.63%）最小。

表3 栗疫病抗性和果實(shí)表型性狀的變異分析結(jié)果Table 3 Variation analysis results of chestnut blight resistance and fruit phenotypic traits

續(xù)表3Continuation of table 3

續(xù)表3Continuation of table 3

2.4 栗疫病抗性和果實(shí)表型性狀的方差分析結(jié)果及重復(fù)力的估算結(jié)果

17個(gè)錐栗農(nóng)家品種栗疫病抗性和果實(shí)表型性狀的方差分析結(jié)果見(jiàn)表4。由表4 可知，17個(gè)農(nóng)家品種之間除淀粉含量（P=0.275）外的14個(gè)表型性狀指標(biāo)均存在極顯著差異（P≤0.01）；淀粉含量的重復(fù)力值（0.208）最小，還原糖含量的重復(fù)力值（0.999）最大，平均重復(fù)力值為0.883，表明17個(gè)農(nóng)家品種表型性狀的穩(wěn)定性均較好，其中果苞厚和淀粉的重復(fù)力值均較小，表明這兩個(gè)性狀指標(biāo)受環(huán)境影響較大。

表4 栗疫病抗性和果實(shí)表型性狀的方差分析結(jié)果?Table 4 Variance analysis results of chestnut blight resistance and fruit phenotypic traits

續(xù)表4Continuation of table 4

2.5 栗疫病抗性和果實(shí)表型性狀的相關(guān)性分析

17個(gè)錐栗農(nóng)家品種栗疫病抗性和果實(shí)表型性狀的相關(guān)性分析結(jié)果見(jiàn)表5。由表5 可知，15個(gè)表型性狀間存在一定的相關(guān)性，染病率與可溶性糖呈現(xiàn)極顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為-0.415（P≤0.01）；染病率與蔗糖呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為-0.292（P≤0.05），染病率與果實(shí)其他表型性狀間均無(wú)顯著相關(guān)性。

表5 15個(gè)表型性狀間的相關(guān)性分析結(jié)果?Table 5 Correlation analysis results of 15 phenotypic traits

2.6 優(yōu)良農(nóng)家品種的選擇

對(duì)17個(gè)錐栗農(nóng)家品種的栗疫病抗性和9個(gè)果實(shí)表型性狀指標(biāo)測(cè)定值進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化分析，結(jié)果見(jiàn)表6。經(jīng)過(guò)對(duì)所測(cè)數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)化分析，從17個(gè)錐栗農(nóng)家品種中篩選得到了‘大包榛’‘白露仔’‘黃榛’這3個(gè)抗疫病性較強(qiáng)且果實(shí)品質(zhì)優(yōu)良的農(nóng)家品種，其余14個(gè)農(nóng)家品種按其抗疫病性的強(qiáng)弱和果實(shí)品質(zhì)的優(yōu)劣排序依次為：‘烏榛’‘處暑紅’‘小尖嘴’‘鐵錐’‘油桐仔’‘中尖嘴’‘大尖嘴’‘歐寧仔’‘油榛’‘紅仔榛’‘牛角仔’（中熟）‘烏殼長(zhǎng)芒’‘牛角仔’（晚熟）‘雙峰子’。

表6 栗疫病抗性和果實(shí)表型性狀指標(biāo)測(cè)定值的標(biāo)準(zhǔn)化值Table 6 Standardized values of measured values of chestnut blight resistance and fruit traits

續(xù)表6Continuation of table 6

2.7 栗疫病抗性和果實(shí)表型性狀的聚類分析

17個(gè)錐栗農(nóng)家品種栗疫病抗性和果實(shí)表型性狀的聚類分析結(jié)果如圖3所示。由圖3 可知，‘牛角仔’（中熟）單獨(dú)分為1 類；第2 類包括‘牛角仔’（晚熟）‘油桐仔’‘處暑紅’‘紅仔榛’‘烏榛’；第3 類包括‘歐寧仔’‘中尖嘴’‘油榛’‘烏殼長(zhǎng)芒’‘雙峰子’‘小尖嘴’‘大尖嘴’‘鐵錐’‘大包榛’‘白露子’‘黃榛’。

圖3 17個(gè)錐栗農(nóng)家品種的聚類分析結(jié)果Fig.3 Cluster analysis results of 17 C.henryi Cultivars

3 討 論

植物病害抗性評(píng)價(jià)大多數(shù)都是針對(duì)植株活體或者離體枝條、葉片接種病菌進(jìn)行的，以病斑面積、染病率、染病指數(shù)這3個(gè)指標(biāo)為依據(jù)，能較準(zhǔn)確地反映出樣本對(duì)病害的抗性。有關(guān)小麥[23-24]、玉米[25]、水稻[26]等作物的抗病研究均較透徹。朱玫等[27]研究了36個(gè)國(guó)家審定小麥品種的抗病性、農(nóng)藝性狀和品質(zhì)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同品種之間小麥的品質(zhì)和抗病性的差異均較大。溫輝芹等[28]對(duì)129個(gè)品種小麥的品質(zhì)性狀和抗條銹病進(jìn)行了分析和評(píng)價(jià)，結(jié)果表明，所有的小麥品種均不是抗銹病的優(yōu)良種質(zhì)。王桂躍等[29]分別研究了76個(gè)品種的甜玉米和89個(gè)品種的糯玉米的產(chǎn)量、品質(zhì)和抗病性，結(jié)果表明，其產(chǎn)量和品質(zhì)性狀均存在明顯差異，通過(guò)綜合分析，篩選獲得了17個(gè)抗性較強(qiáng)且果實(shí)品質(zhì)較優(yōu)的玉米品種。王金明等[30]對(duì)全球66 份水稻育種親本的稻瘟病抗性與稻谷品質(zhì)進(jìn)行了研究，從中篩選出了11個(gè)具有中等抗性、稻米外觀表現(xiàn)優(yōu)良的水稻品種。有關(guān)板栗疫病的研究成果較多：徐育海等[18]分別對(duì)夏、冬兩個(gè)季節(jié)的31個(gè)板栗基因型進(jìn)行離體枝條栗疫菌接種試驗(yàn)，他們根據(jù)抗性等級(jí)的不同，將其分為不同的板栗基因類型，并得出了夏季接種栗疫菌的枝條所表現(xiàn)出的抗性強(qiáng)于冬季接種枝條的結(jié)論。程中平等[19]利用3個(gè)菌株，分別于5個(gè)時(shí)期對(duì)其離體枝條進(jìn)行接種試驗(yàn)，并觀察其染病程度，結(jié)果篩選出了5個(gè)抗性較強(qiáng)的基因型；秦嶺等[20]利用兩種菌株對(duì)21個(gè)板栗基因型的疫病抗性進(jìn)行枝條離體接種試驗(yàn)，也篩選出了部分抗性較強(qiáng)的基因型，他們研究得出了其對(duì)栗疫病的抗性表現(xiàn)較為穩(wěn)定且一致的結(jié)論。有關(guān)栗屬樹(shù)種栗疫病的研究結(jié)果為揭示栗疫病菌的侵染機(jī)理、挑選抗性基因、開(kāi)展栗疫病防治等方面的研究奠定了基礎(chǔ)，也為有關(guān)錐栗的抗病研究提供了重要的參考依據(jù)。將作物的抗病性與果實(shí)品質(zhì)性狀聯(lián)合起來(lái)分析進(jìn)行良種選擇的研究報(bào)道已有很多，而將錐栗乃至經(jīng)濟(jì)林木的抗病性與果實(shí)品質(zhì)聯(lián)合起來(lái)分析進(jìn)行良種選擇的研究報(bào)道較少，本研究嘗試結(jié)合栗疫病抗性與錐栗果實(shí)品質(zhì)進(jìn)行分析和綜合評(píng)價(jià)，在選擇抗性個(gè)體的同時(shí)，也兼顧果實(shí)品質(zhì)，最終獲得抗疫病能力較強(qiáng)、品質(zhì)性狀又優(yōu)良的農(nóng)家品種。但是，本研究的局限性在于只用了1年的觀測(cè)數(shù)據(jù)。

栗疫病自被發(fā)現(xiàn)之日起，就給栗屬植物帶來(lái)了難以逆轉(zhuǎn)的危害。采用常規(guī)防治方法難以徹底遏制栗疫病的傳播與流行，只有選育出抗性強(qiáng)的優(yōu)良品種才能從根本上解決栗疫病的危害問(wèn)題。目前，雜交育種仍然是抗病選育的主要手段之一。選擇抗性與品質(zhì)差異均較大的錐栗進(jìn)行有性雜交，可使雙親的基因重新組合，將兩者的優(yōu)良基因集于子代一身，子代甚至可能出現(xiàn)強(qiáng)于親本雙方的超親現(xiàn)象。板栗是公認(rèn)的抗疫病能力較強(qiáng)的種質(zhì)，開(kāi)展錐栗與板栗的種間雜交，有望在其子代中選育出抗疫病且果實(shí)品質(zhì)優(yōu)良的基因型。傳統(tǒng)的雜交育種周期較長(zhǎng)，在基因組測(cè)序的基礎(chǔ)上開(kāi)展分子標(biāo)記輔助選擇育種，通過(guò)常規(guī)育種與分子育種相結(jié)合，可提高錐栗育種的效率與精度，最終才可選育出抗性強(qiáng)、產(chǎn)量高、品質(zhì)優(yōu)的品種，以促進(jìn)錐栗產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

4 結(jié) 論

對(duì)17個(gè)錐栗農(nóng)家品種間抗病性和果實(shí)表型性狀的相關(guān)性進(jìn)行了分析，結(jié)果表明，其抗病性與果實(shí)各性狀指標(biāo)之間存在不同程度的相關(guān)性：染病率與果苞刺長(zhǎng)呈顯著正相關(guān)；染病率與可溶性糖、蔗糖、可溶性蛋白之間均呈負(fù)相關(guān)，與可溶性糖呈極顯著負(fù)相關(guān)，而與淀粉、還原糖之間均呈正相關(guān)。這一分析結(jié)果說(shuō)明，17個(gè)錐栗農(nóng)家品種抗疫病能力越強(qiáng)，其果實(shí)中可溶性糖、蔗糖、可溶性蛋白的含量可能越高，而其淀粉和還原糖的含量越低。變異分析結(jié)果表明，17個(gè)錐栗農(nóng)家品種在抗病性和果實(shí)表型性狀上均存在明顯的變異，較大的變異有利于我們從中選擇出符合目標(biāo)要求的個(gè)體。結(jié)合抗病性與果實(shí)品質(zhì)性狀進(jìn)行分析與綜合評(píng)價(jià)及聯(lián)合選擇是可行的，本研究從17個(gè)農(nóng)家品種中最終選擇出了‘大包榛’‘白露仔’‘黃榛’這3個(gè)抗疫病能力較強(qiáng)、果實(shí)品質(zhì)優(yōu)良的農(nóng)家品種。