趙悅悅，蔣曉宏

（安徽醫(yī)科大學(xué)附屬巢湖醫(yī)院新生兒科，安徽 合肥 230000）

新生兒窒息（neonatal asphyxia）導(dǎo)致的缺氧缺血性腦病為新生兒期常見疾病，以足月兒較為常見，窒息缺氧會導(dǎo)致多臟器功能損傷，尤其是針對腦部的損傷更為明顯，嚴(yán)重的會導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)永久性后遺癥、殘疾，甚至死亡[1]。近年來，國內(nèi)新生兒腦損傷的診斷和評估主要依據(jù)腦電圖、頭顱影像學(xué)檢查、顱腦彩色超聲等，但頭顱影像學(xué)檢查在不宜被移動、生命體征不平穩(wěn)的患兒中無法及時進(jìn)行。顱腦彩色超聲對矢狀旁區(qū)損傷的檢查容易出現(xiàn)錯漏。新生兒振幅整合腦電圖在亞低溫治療時可能會受抑制[2]。因此，尋找與新生兒窒息后腦損傷相關(guān)聯(lián)，且早期、有效的檢測指標(biāo)，具有重要的臨床意義。既往報道顯示，顱腦外科中顱腦損傷程度和預(yù)后情況與中樞神經(jīng)特異蛋白β（central nervous system specific protein β，S100β）、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）密切相關(guān)，且兩項指標(biāo)聯(lián)合診斷效率高于單獨(dú)檢測。但目前國內(nèi)外學(xué)者關(guān)于聯(lián)合檢測血清S100β 和IL-6 應(yīng)用在不同程度新生兒窒息后腦損傷的研究報道尚少。由此，本研究旨在探討血清S100β、IL-6 水平在新生兒窒息以及窒息后腦損傷診療中的應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年7月-2021年8月安徽醫(yī)科大學(xué)附屬巢湖醫(yī)院收治的61 例窒息新生兒為研究對象。將窒息新生兒分為輕度窒息組和重度窒息組。輕度窒息組43 例，胎齡37～41+6周，平均胎齡（38.80±1.17）周；出生體重3.05～3.84 kg，平均出生體重（3.55±0.35）kg；男嬰26 例，女嬰17 例；剖宮產(chǎn)15 例，順產(chǎn)28 例。重度窒息組18 例，胎齡37～41+6周，平均胎齡（38.99±0.98）周；出生體重3.16～3.89 kg，平均出生體重（3.54±0.29）kg；男嬰11 例，女嬰7 例；剖宮產(chǎn)10 例，順產(chǎn)8 例。對照組49 例，胎齡37～41+6周，平均胎齡（38.84±1.13）周；出生體重3.15～3.82 kg，平均出生體重（3.51±0.29）kg；男嬰33 例，女嬰16例；剖宮產(chǎn)16 例，順產(chǎn)23 例。三組新生兒在胎齡、性別、出生體重、分娩方式比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），有可比性。本研究符合倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核通過，所有新生兒家屬知情同意并簽署知情同意書。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①窒息診斷標(biāo)準(zhǔn)以及分度均參照2016年新生兒窒息診斷的專家共識[3]；②經(jīng)頭顱核磁和振幅整合腦電圖檢查確定腦損傷情況。排除標(biāo)準(zhǔn)：①孕母在分娩前以及生產(chǎn)中接受過對自身或?qū)μ褐袠猩窠?jīng)系統(tǒng)有影響的藥物；②患兒存在感染、電解質(zhì)紊亂情況、神經(jīng)肌肉類疾病、先天性疾病等情況。

1.3 血清S100β、IL-6的檢測 所有受試者生后6 h內(nèi)取外周靜脈血3～5 ml，采血時避免溶血，取血清保存至-20 ℃冰箱中備用。S100β 采用化學(xué)發(fā)光免疫夾心法檢測，檢測使用的全自動化學(xué)發(fā)光測定儀（型號：Maglumi 2000 Plus）和試劑盒（批號：048210111）由深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司提供；IL-6 采用化學(xué)發(fā)光免疫夾心法檢測，檢測的免疫測定分析儀（型號：cobas e 801）和試劑盒（批號：5008900）由羅氏公司提供。測定時嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.4 新生兒腦損傷的檢查 所有受試者于入院后行頭顱MRI、振幅整合腦電圖檢查，其中發(fā)現(xiàn)顱內(nèi)出血和（或）新生兒缺氧缺血性腦病即為窒息后腦損傷。振幅整合腦電圖由兩位熟練掌握相關(guān)評判知識的新生兒科醫(yī)生采用足月兒改良aEEG 評分法從連續(xù)性、睡眠-覺醒周期、驚厥發(fā)作3 方面判讀是否存在腦損傷。窒息患兒再根據(jù)頭顱核磁和振幅整合腦電圖檢查分為腦損傷組（23 例）和非腦損傷組（38 例）。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 24.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析。正態(tài)分布的計量資料以（±s）表示，組間比較使用單因素方差分析；非正態(tài)分布的計量資料以[M（P25，P75）]表示，組間比較使用Kruskal-Wallis H或Mann-WhitneyU檢驗(yàn)進(jìn)行；計數(shù)資料以[n（%）]表示，組間比較用x2檢驗(yàn)；影響因素的確定采用二元Logistic 回歸分析；ROC 曲線分析用以評估S100β、IL-6 對新生兒腦損傷的診斷價值。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組新生兒血清S100β、IL-6 檢測比較 輕度窒息組S100β 高于對照組（H=-7.447，P＜0.001），重度窒息組S100β 高于對照組（H=-7.713，P＜0.001）和輕度窒息組（H=-3.029，P=0.042），差異有統(tǒng)計學(xué)意義；輕度窒息組IL-6 高于對照組（H=-5.054，P＜0.001）；重度窒息組高于對照組（H=-7.805，P＜0.001）和輕度窒息組（H=-3.901，P＜0.001），差異有統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

表1 各組新生兒血清S100β、IL-6 水平比較[M（P25，P75）]

2.2 腦損傷組與非腦損傷組S100β、IL-6 水平比較腦損傷組S100β、IL-6 水平高于非腦損傷組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 腦損傷組與非腦損傷組S100β、IL-6 水平比較[M（P25，P75）]

2.3 Logistic 回歸分析 以顱腦損傷（否=0，是=1）作為因變量，以S100β、IL-6 為自變量，行二元Logistic回歸分析，結(jié)果顯示S100β、IL-6 是窒息后腦損傷的影響因素（P＜0.05），見表3。

表3 S100β、IL-6 對腦損傷影響的二元Logistic 回歸分析

2.4 S100β、IL-6 對評估腦損傷的價值分析ROC 曲線分析 S100β 最佳截斷值為995.000 ng/L，IL-6 最佳截斷值是21.960 pg/ml，對新生兒窒息后腦損傷均具有一定的診斷價值（P＜0.05），聯(lián)合檢測診斷窒息后腦損傷的特異度、敏感度高于單一指標(biāo)檢測（P＜0.05），見表4、圖1。

表4 S100β、IL-6 對評估腦損傷的價值分析

圖1 ROC 曲線分析血清S100β、IL-6評估窒息后腦損傷新生兒的價值

3 討論

新生兒窒息每年在全世界造成近百萬嬰兒死亡，約占新生兒死亡率的1/4[4，5]。目前，新生兒窒息對多臟器功能的損傷已受到國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注，尤其在腦損傷方面的研究日益受到重視。臨床工作中習(xí)慣使用大腦特異性生物標(biāo)記物來檢測，但有許多異質(zhì)因素會影響測試結(jié)果[6]。因此，結(jié)合兩種或兩種以上的生物標(biāo)志物來建立一個優(yōu)化方案，有助于更加全面地去了解新生兒腦損傷的病理狀態(tài)。

S100β 是一種鈣結(jié)合蛋白，是S100 家族中最具活性的成員，在腦中含量遠(yuǎn)高于其他組織，是神經(jīng)系統(tǒng)特異性蛋白。它廣泛分布于腦組織的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中，與神經(jīng)細(xì)胞的增殖、分化、凋亡過程有著密切聯(lián)系[7，8]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)[9]，S100β 對神經(jīng)元具有雙向作用，低濃度的S100β 刺激軸突生長，但高濃度的S100β 損害神經(jīng)元的生長發(fā)育。另有研究表明[10，11]，當(dāng)腦部受到重大損傷時，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞快速合成、分泌S100β，同時神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞破裂增多，使得腦脊液S100β 水平升高，當(dāng)血腦屏障被破壞時，再次入血，此時血液里的S100β 水平迅速上升。IL-6 是一種功能廣泛的多效性細(xì)胞因子，主要由位于腦室邊緣區(qū)域的星形膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生，而在其他腦區(qū)，如下丘腦、海馬、大腦皮層或某些腦干結(jié)構(gòu)，IL-6 主要由神經(jīng)元產(chǎn)生[12]。IL-6 是窒息發(fā)生后導(dǎo)致缺血缺氧性腦病發(fā)病時較為明確的細(xì)胞因子之一[13，14]，腦組織一旦出現(xiàn)缺血缺氧情況，通過MEK/ERK 途徑促進(jìn)腦動脈壁上的單核巨噬細(xì)胞大量分泌核因子-κB、腫瘤壞死因子-α 等，這些因子可直接在多種細(xì)胞上發(fā)揮作用，促進(jìn)IL-6的釋放，且隨著窒息程度的增加以及腦損傷的發(fā)生，其釋放水平隨之升高[15，16]。本研究顯示，發(fā)生窒息的患兒血清S100β、IL-6 水平高于對照組，表明血清S100β、IL-6 均參與新生兒窒息病情的發(fā)展過程，且隨著窒息程度的加重，患兒血清中S100β、IL-6 水平呈現(xiàn)升高趨勢，其中重度窒息組S100β、IL-6 水平高于輕度窒息組，與既往報道一致[17，18]。本研究中腦損傷組新生兒S100β、IL-6 水平高于非腦損傷組。通過二元Logistic 回歸分析顯示，血清S100β、IL-6 是新生兒腦損傷的影響因素，與孫艷娟等[19]，陳曉玲等[20]報道一致。通過繪制ROC曲線分析得出：S100β 預(yù)測腦損傷的AUC 為0.928，敏感度為82.60%，特異度為92.10%；IL-6的AUC為0.902，敏感度為87.00%，特異度為78.90%；且S100β 聯(lián)合IL-6 水平預(yù)測新生兒窒息后腦損傷的AUC 最大，其敏感度和特異度均最高。這說明單獨(dú)檢測S100β 或IL-6 水平預(yù)測窒息患兒腦損傷的發(fā)生具有一定的局限性，當(dāng)兩項指標(biāo)聯(lián)合檢測時有助于提高腦損傷評估的準(zhǔn)確性。

綜上所述，血清S100β、IL-6 水平有助于判斷新生兒窒息程度以及窒息后的腦部進(jìn)展，對于預(yù)測新生兒腦損傷具有重要的臨床意義。但本研究樣本量偏小，可能存在一定誤差，需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行研究。