張小蘭 陳銳

糖尿病是一種常見(jiàn)的以慢性血糖升高為主要表現(xiàn)的代謝性疾病，發(fā)病率較高且后期并發(fā)癥較多，已嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命健康。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells，Treg)是調(diào)節(jié)外周免疫耐受的重要介質(zhì)，具有免疫抑制效應(yīng)，包括CD4+CD25+Treg、CD8+CD25+Treg等。已有較多研究證實(shí)[1-2]，T2DM病人外周血CD4+CD25+Treg比率下降，但CD8+CD25+Treg比率變化在T2DM病人中的研究較少，且T2DM病人外周血CD8+CD25+Treg比率變化與胰島素抵抗的關(guān)系目前尚不明確。鑒于此，本研究旨在探討老年T2DM病人外周血CD8+CD25+Treg比率變化與胰島素抵抗的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2019年4月至2020年9月本院收治的42例老年T2DM病人及40例在本院進(jìn)行體檢的健康者，分別納入研究組和對(duì)照組。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(批號(hào)：KY20190130)。納入標(biāo)準(zhǔn)：研究組均符合《中國(guó)2型糖尿病防治指南(2017年版)》[3]中T2DM的診斷標(biāo)準(zhǔn)；對(duì)照組均為體檢健康者；年齡>60歲；參與者對(duì)本研究知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重糖代謝紊亂、心腦血管疾?。粣盒阅[瘤；心、肝、腎、免疫系統(tǒng)或血液系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病；風(fēng)濕系統(tǒng)疾病、1型糖尿病等影響免疫功能的疾病；T2DM急性并發(fā)癥。

1.2 檢測(cè)方法 生化指標(biāo)檢測(cè)：采集所有研究對(duì)象空腹肘靜脈血5 mL,主要檢測(cè)TC、TG、HDL-C、LDL-C、FPG、空腹胰島素(FINS)、餐后2 h血糖(2hPG)、HbA1c，并計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)，均于納入研究后次日進(jìn)行檢測(cè)，其中FPG、2hPG均采用葡萄糖氧化酶法測(cè)定；FINS采用放射性同位素免疫標(biāo)記法測(cè)定；HbA1c采用親和層析法測(cè)定；HOMA-IR=FPG×FINS/22.5。CD8+CD25+Treg比率檢測(cè)：分別采集2組研究對(duì)象空腹外周靜脈血5 mL，2500 r/min離心10 min并分離血清，采用流式細(xì)胞儀(型號(hào)：FACS Calibure，美國(guó)Beckman公司)檢測(cè)CD8+CD25+Treg比率。

1.3 觀察指標(biāo) (1)對(duì)比2組臨床資料及生化指標(biāo)；(2)對(duì)比2組血糖水平指標(biāo)及HOMA-IR；(3)對(duì)比2組免疫學(xué)指標(biāo)；(4)分析老年T2DM病人CD8+CD25+Treg比率變化與胰島素抵抗的關(guān)系。

2 結(jié)果

2.1 臨床資料及生化指標(biāo)的比較 2組性別、年齡、TG、HDL-C比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，研究組BMI、TC、LDL-C、FPG、2hPG、HbA1c及FINS水平均高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 2組研究對(duì)象臨床資料及生化指標(biāo)對(duì)比

2.2 CD8+CD25+Treg比率及HOMA-IR的比較 研究組HOMA-IR高于對(duì)照組(P<0.01)，CD8+CD25+Treg比率低于對(duì)照組(P<0.01)，見(jiàn)表2。

表2 2組CD8+CD25+Treg比率及HOMA-IR比較

2.3 老年T2DM病人CD8+CD25+Treg比率與各指標(biāo)的關(guān)系 CD8+CD25+Treg比率與HOMA-IR、FINS均呈負(fù)相關(guān)(r=-0.506、-0.382，P<0.05)，與HbA1c、2hPG、FPG、LDL-C及TC無(wú)相關(guān)性(r=-0.205、0.284、0.325、-0.218、0.214，P>0.05)。

3 討論

T2DM是一種以胰島素抵抗和胰島素分泌受損為主要特征的慢性代謝性疾病，慢性高血糖、循環(huán)細(xì)胞因子水平升高等代謝性炎性反應(yīng)致使免疫發(fā)生紊亂，嚴(yán)重影響病人的生命健康[4]。相關(guān)研究表明，胰島素抵抗的發(fā)生涉及胰島素與受體結(jié)合發(fā)揮作用的多個(gè)環(huán)節(jié)，其中Treg在其過(guò)程中具有重要意義[5]。探討老年T2DM病人CD8+CD25+Treg比率變化與胰島素抵抗的關(guān)系具有十分重要的臨床意義。

本研究結(jié)果顯示，老年T2DM病人BMI、TC、LDL-C、FPG、2hPG、HbA1c及FINS水平均高于健康者，與Palumbo等[6]研究結(jié)果相近。Treg細(xì)胞是一類(lèi)具有較強(qiáng)免疫抑制活性的調(diào)節(jié)性細(xì)胞，可通過(guò)產(chǎn)生炎性因子發(fā)揮抗炎作用，是機(jī)體免疫和代謝反應(yīng)的重要因素，可通過(guò)細(xì)胞-細(xì)胞間接觸依賴(lài)性方式或通過(guò)分泌細(xì)胞因子發(fā)揮特異性免疫抑制功能。本研究結(jié)果表明，老年T2DM病人HOMA-IR異常偏高，CD8+CD25+Treg比率異常偏低。朱靜和等[7]的研究也表明，新診斷的T2DM病人外周血CD8+CD25+FoxP3+Treg比率降低，推測(cè)其可能與T2DM的發(fā)病密切相關(guān)。CD8+CD25+Treg比率降低可使對(duì)單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞免疫抑制作用減弱，可引發(fā)炎性反應(yīng)狀態(tài)，致使糖尿病的發(fā)生、發(fā)展。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究也發(fā)現(xiàn)，胰島B細(xì)胞功能缺陷、Treg比率降低可促進(jìn)糖尿病進(jìn)展。Treg及其分泌的細(xì)胞因子可調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞表面轉(zhuǎn)運(yùn)載體-4的表達(dá)及對(duì)葡萄糖的代謝，通過(guò)細(xì)胞-細(xì)胞間接觸依賴(lài)性方式或通過(guò)分泌細(xì)胞因子，發(fā)揮非特異性免疫抑制的功能，導(dǎo)致胰島素抵抗的發(fā)生[8]。既往多認(rèn)為T(mén)2DM胰島素抵抗與先天性免疫功能有關(guān)，即巨噬細(xì)胞通過(guò)分泌促炎細(xì)胞因子誘導(dǎo)胰島素抵抗的發(fā)生[9-10]，但何凌等[11]的研究表明，適應(yīng)性免疫功能在T2DM的發(fā)生、發(fā)展中也具有重要作用，T2DM主要與脂肪組織中胰島素抵抗和低度炎癥狀態(tài)有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)， CD8+CD25+Treg比率與HOMA-IR、FINS存在一定的相關(guān)性。T2DM除胰島素抵抗外還與胰島素分泌缺陷有關(guān)，在T2DM病人的胰島細(xì)胞中存在炎癥因子表達(dá)、免疫細(xì)胞浸潤(rùn)，浸潤(rùn)胰島的免疫細(xì)胞所產(chǎn)生的炎性因子會(huì)破壞胰島細(xì)胞[12]。

綜上所述，相比健康者，老年T2DM病人CD8+CD25+Treg比率異常偏低，其可能與老年T2DM病人胰島素抵抗有關(guān)，但具體機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。