葉雅真 駱和東

摘 要：為了解商品化甲氧芐啶膠體金快檢試劑盒對(duì)動(dòng)物源性食品的快檢效果，探討目前動(dòng)物源性食品中甲氧芐啶快速檢測(cè)方法存在的問(wèn)題，確定下一步的研究方向。本文通過(guò)對(duì)國(guó)內(nèi)快檢產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)技術(shù)實(shí)力的資格審查，擇優(yōu)篩選出5個(gè)品牌試劑盒進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，并對(duì)相對(duì)準(zhǔn)確度較高的3個(gè)品牌試劑盒產(chǎn)品進(jìn)行絕對(duì)靈敏度研究。質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，5個(gè)品牌試劑盒產(chǎn)品的假陰性率在9.1%～25.0%，均不符合假陰性率應(yīng)≤5%的考察要求，其中3個(gè)品牌產(chǎn)品假陰性率在20%左右，漏檢風(fēng)險(xiǎn)較高。因此，有必要進(jìn)行甲氧芐啶快檢方法研究，提高試劑盒產(chǎn)品實(shí)際檢測(cè)靈敏度，確保試劑盒產(chǎn)品的快檢監(jiān)管效果。

關(guān)鍵詞：甲氧芐啶;膠體金免疫層析;動(dòng)物源性食品;質(zhì)量評(píng)價(jià);食品安全快速檢測(cè)

Analysis and Quality Assessment of Commercial Colloidal Gold Kits for Rapid Detection of Trimethoprim

YE Yazhen1， LUO Hedong1，2*

（1.Xiamen Institute for Food and Drug Quality Control， Xiamen 361012， China; 2.RayKol Group （Xiamen） Corp.， Ltd.， Xiamen 361015， China）

Abstract： In order to master the effect of commercial colloidal gold kits for rapid detection of trimethoprim in foods of animal origin， and to identify the research directions of the method for rapid detection of trimethoprim in foods of animal origin， a unifiable technical evaluation was conducted on kits of 5 brands， which passed the inspection of the manufacturer’s technology prowess， and the absolute sensitivity of three brand kits with high relative accuracy was studied. The evaluation results show that the false negative rates of the five brands are from 9.1% to 25.0%， which does not meet the inspection requirements that the false negative rate should be ≤5%. Among them， the false negative rate of three brand products is about 20%， and the risks of missed detection were higher. Therefore， it was necessary to study the rapid detection method of trimethoprim to improve the actual detection sensitivity of kits to ensure the rapid detection supervision effect of the kit products.

Keywords： trimethoprim; the principle of colloidal gold immunochromatography; products of animal origin; quality assessment; rapid detection for food safety

甲氧芐啶（Trimethoprim，TMP）是一種抗菌增效劑，在獸醫(yī)臨床常與磺胺類藥物或其他抗生素聯(lián)合使用，用于治療雞白痢、禽霍亂、呼吸道繼發(fā)性細(xì)菌感染等，以降低抗菌藥用量、增強(qiáng)抗菌藥療效、降低抗菌藥殘留及減少細(xì)菌對(duì)抗菌藥的耐藥性[1-3]。甲氧芐啶的廣泛使用和不合理用藥使動(dòng)物性食品中存在藥物殘留，從而威脅人體健康。為了更有效地開(kāi)展甲氧芐啶殘留的快檢監(jiān)控工作，確保食品安全[4]。本文面向社會(huì)廣泛征集符合評(píng)價(jià)驗(yàn)證方案要求的快檢產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)，參加評(píng)價(jià)驗(yàn)證，組建專家組對(duì)各品牌快檢產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)科研能力等技術(shù)實(shí)力進(jìn)行資格審查，擇優(yōu)篩選出5個(gè)品牌快檢產(chǎn)品進(jìn)入檢測(cè)能力方面的現(xiàn)場(chǎng)質(zhì)量評(píng)價(jià)環(huán)節(jié)。通過(guò)統(tǒng)一制備盲樣，由企業(yè)實(shí)驗(yàn)人員自行快檢實(shí)驗(yàn)操作的方式，對(duì)這5個(gè)品牌商品化甲氧芐啶膠體金試劑盒產(chǎn)品進(jìn)行統(tǒng)一的現(xiàn)場(chǎng)質(zhì)量評(píng)價(jià)。本文擬對(duì)這5個(gè)品牌試劑盒產(chǎn)品的假陰性率、假陽(yáng)性率、相對(duì)準(zhǔn)確度等性能指標(biāo)進(jìn)行考察，為確定動(dòng)物源性食品中甲氧芐啶的快速檢測(cè)方法的研究方向提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

本次評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)使用的甲氧芐啶快速檢測(cè)試劑盒由各品牌生產(chǎn)企業(yè)自行準(zhǔn)備。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

依據(jù)《食品快速檢測(cè)方法評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（食藥監(jiān)辦科[2017]43號(hào)）[5]和《關(guān)于規(guī)范使用食品快速檢測(cè)的意見(jiàn)》（征求意見(jiàn)稿）[6]制定評(píng)價(jià)方案?！妒称钒踩珖?guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量》（GB 31650—2019）對(duì)家禽中肌肉靶組織的最大殘留限量為50 μg/kg。因此，本文考察試劑盒對(duì)甲氧芐啶的檢測(cè)限要求為50 μg/kg，并根據(jù)《食品快速檢測(cè)方法評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》設(shè)定試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)性能指標(biāo)考察要求為假陰性率應(yīng)≤5%，假陽(yáng)性率應(yīng)≤15%。每家企業(yè)盲樣數(shù)均為50份，其中陽(yáng)性樣和陰性樣均為20～30份。各企業(yè)自行準(zhǔn)備參加評(píng)價(jià)驗(yàn)證所必需的食品快檢設(shè)備、輔助設(shè)備、試劑及實(shí)驗(yàn)耗材，由企業(yè)實(shí)驗(yàn)人員自行進(jìn)行快檢實(shí)驗(yàn)操作、出具快檢結(jié)果。對(duì)所有快檢結(jié)果進(jìn)行匯總分析，統(tǒng)計(jì)各品牌甲氧芐啶試劑盒產(chǎn)品的假陰性率、假陽(yáng)性率、相對(duì)準(zhǔn)確度等指標(biāo)。

2 結(jié)果與分析

為避免對(duì)企業(yè)造成影響，對(duì)試劑盒品牌進(jìn)行編號(hào)表示，分別為A品牌、B品牌、C品牌、D品牌和E品牌，質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果見(jiàn)表1和表2。質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，5個(gè)品牌產(chǎn)品的假陰性率在9.1%～25.0%，均不符合規(guī)定的假陰性率應(yīng)≤5%的考察要求，其中A品牌、B品牌和E品牌產(chǎn)品假陰性率較高，漏檢風(fēng)險(xiǎn)較高;5個(gè)品牌產(chǎn)品的假陽(yáng)性率在0%～10.0%，均符合規(guī)定的假陽(yáng)性率應(yīng)≤15%的考察要求。

A品牌試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果所示，A品牌試劑盒在0.5倍檢測(cè)限未出現(xiàn)假陽(yáng)性，對(duì)空白基質(zhì)的快檢結(jié)果假陽(yáng)性率卻高達(dá)12.0%，而且對(duì)1倍檢測(cè)限的假陰性率高達(dá)25.0%，漏檢率是5個(gè)品牌中最高的，快檢結(jié)果相對(duì)準(zhǔn)確度只有84.0%，是5個(gè)品牌試劑盒快檢結(jié)果相對(duì)準(zhǔn)確度中最低的。通過(guò)查閱各品牌試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)，發(fā)現(xiàn)在5個(gè)品牌中，只有A品牌試劑盒為消線法膠體金快檢產(chǎn)品，其余4個(gè)品牌的判定方式均為檢測(cè)線（T線）與控制線（C線）比色法。經(jīng)過(guò)市場(chǎng)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，甲氧芐啶消線法膠體金試劑盒品牌極少，只調(diào)研到2家。根據(jù)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)，A品牌適用于雞肌肉靶組織的檢測(cè)，另一個(gè)品牌適用基質(zhì)為血清。A品牌試劑盒產(chǎn)品的質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果，假陽(yáng)性率高可能是受甲氧芐啶的消線法膠體金快檢技術(shù)的技術(shù)瓶頸影響，或是A品牌試劑盒產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝問(wèn)題所導(dǎo)致。

B品牌、C品牌、D品牌和E品牌試劑盒假陰性率分別為19.0%、11.1%、9.1%和19.2%，B品牌和D品牌假陽(yáng)性率分別為3.4%和7.1%，C品牌和E品牌未出現(xiàn)假陽(yáng)性情況。結(jié)果顯示，4個(gè)品牌試劑盒都存在不同程度的漏檢風(fēng)險(xiǎn)，假陰性率均不符合考察要求的≤5%，試劑盒產(chǎn)品的實(shí)際檢測(cè)靈敏度均不夠，應(yīng)該對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行優(yōu)化，降低各品牌產(chǎn)品的實(shí)際檢測(cè)限，以降低產(chǎn)品假陰性率。

3 結(jié)論

膠體金快檢試劑盒最理想的檢測(cè)效果是0和0.5倍檢測(cè)限的快檢結(jié)果為明顯的陰性（T線顏色明顯深于C線顏色），1倍及以上檢測(cè)限的快檢結(jié)果為強(qiáng)陽(yáng)性（T線顏色明顯淺于C線顏色，甚至T線幾乎不顯色）。在試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)現(xiàn)場(chǎng)觀察到，雖然B品牌試劑盒產(chǎn)品的絕對(duì)靈敏度最高，但是對(duì)空白基質(zhì)的快檢，B品牌試劑盒的快檢結(jié)果為比較弱的陰性（T線顏色略深于C線顏色），試劑盒對(duì)0.5倍檢測(cè)限和1倍檢測(cè)限的識(shí)別差異不大，0.5倍檢測(cè)限為弱陰性（T線顏色與C線顏色相當(dāng)），1倍檢測(cè)限為比較弱的陽(yáng)性（T線顏色略淺于C線顏色）。在降低產(chǎn)品實(shí)際檢測(cè)限后，試劑盒的假陽(yáng)性率可能增高，增加誤檢風(fēng)險(xiǎn)。

因此，有必要進(jìn)行快檢方法研究，對(duì)方法進(jìn)行優(yōu)化，提高試劑盒產(chǎn)品實(shí)際檢測(cè)靈敏度，提高快檢準(zhǔn)確度，確保試劑盒產(chǎn)品的快檢監(jiān)管效果。

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