楊文卿，姜濤，程路峰*（. 新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，烏魯木齊 8300；. 新疆醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，烏魯木齊 8300）

近年來，癌癥的發(fā)病率逐年升高[1]。有研究發(fā)現(xiàn)2018年全球新發(fā)癌癥人數(shù)達(dá)1810萬，我國(guó)占24%（約430萬）[2]。目前對(duì)于腫瘤的治療以免疫治療與靶向治療為主，但治療過程中易產(chǎn)生耐藥、副作用大等問題[3]。

天然多糖為結(jié)構(gòu)多樣的生物大分子，從不同的植物、動(dòng)物以及微生物中分離得到，在抗氧化[4]、抗凝血[5]、抗腫瘤[6]及刺激免疫[7]等方面表現(xiàn)出良好的活性。多種食用菌多糖已在體內(nèi)外體現(xiàn)出明顯的抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用[8-9]。本研究利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，以β-葡聚糖與腹水瘤作為研究對(duì)象，預(yù)測(cè)相關(guān)靶點(diǎn)及通路，并建立相關(guān)模型對(duì)其進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，以闡述其抗腫瘤的作用機(jī)制。

1 材料

1.1 軟件與數(shù)據(jù)庫

β-葡聚糖靶點(diǎn)的預(yù)測(cè)：Swiss Target Prediction數(shù)據(jù)庫（http：//www.swisstargetprediction.ch）；疾病靶點(diǎn)的獲取：Geen Cards數(shù)據(jù)庫（https：//www.genecards.org）；OMIM數(shù)據(jù)庫（https：//omim.org）。靶點(diǎn)間相互作用關(guān)系分析：String網(wǎng)站（https：//string-db.org）。相關(guān)關(guān)系圖的繪制：Draw Veen網(wǎng)站（http：//bioinfornatics.psb.ugent.be/webtools/Veen/）?；プ骶W(wǎng)絡(luò)圖的繪制：Cytoscape 3.8.0軟件。相關(guān)通路分析：R Studio 3.6.3軟件。

1.2 細(xì)胞株與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

S180細(xì)胞（中喬新舟細(xì)胞庫）；C57小鼠，雌鼠體質(zhì)量20～23 g；雄鼠體質(zhì)量28～31 g，SPF級(jí)[新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證編號(hào)：SCXK（新）2018-0002]。

1.3 試藥

β-葡聚糖（S24487，上海源葉）；順 鉑（IC0440，索萊寶公司）；胎牛血清（FBS10099-141，Gibco）；RPMI1640培養(yǎng)基（AE29163439，Hyclone）；雙抗鏈霉素混液（Gibco）；二甲基亞砜（DMSO，Sigma）；小鼠白細(xì)胞介素（IL）-2、IL-4、IL-6、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、γ干擾素（IFN-γ）酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）試劑盒（鈺博生物有限公司）。Bcl-2、Bax、Caspase-3、VEGF、JAK2、STAT3兔抗小鼠抗體（Abcam）；山羊抗兔二抗（Bioss，bs-40295G-HRP）。

1.4 儀器

光學(xué)顯微鏡、3-18K離心機(jī)（Sigma）；蛋白電泳儀及轉(zhuǎn)印儀（Bio-Rad）；凝膠圖像分析軟件。

2 方法

2.1 β-葡聚糖及腹水瘤疾病靶點(diǎn)預(yù)測(cè)

采用Swiss Target Prediction對(duì)β-葡聚糖作用靶點(diǎn)進(jìn)行預(yù)測(cè)，使用Geen Cards與OMIM數(shù)據(jù)庫預(yù)測(cè)腹水瘤疾病靶點(diǎn)。

2.2 β-葡聚糖抗腫瘤作用靶點(diǎn)預(yù)測(cè)與Network網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建

將上述β-葡聚糖作用靶點(diǎn)與抗腫瘤相關(guān)靶點(diǎn)導(dǎo)入Veen數(shù)據(jù)庫進(jìn)行交互分析，將藥物作用靶點(diǎn)與Veen圖中交集靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape 3.8.0，獲得藥物-疾病-靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)圖。

2.3 蛋白互作、GO與KEGG分析

將交互靶點(diǎn)導(dǎo)入String數(shù)據(jù)庫，將得到的蛋白互作關(guān)系網(wǎng)導(dǎo)入Cytoscape軟件，得到PPI互作圖。使用R Studio對(duì)所有預(yù)測(cè)靶點(diǎn)進(jìn)行GO與KEGG富集分析，獲得目的靶點(diǎn)參與關(guān)鍵通路的信息。

2.4 β-葡聚糖對(duì)S180細(xì)胞活性的影響

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的S180細(xì)胞接種于96孔板中，每孔5000個(gè)細(xì)胞，培養(yǎng)2 h后，加入不同濃度的β-葡聚糖，每組設(shè)置5個(gè)復(fù)孔，同時(shí)設(shè)定空白對(duì)照組。藥物分別作用24、48 h后，每孔加入10 μL的CCK-8，孵育1.5 h，使用酶標(biāo)儀于450 nm處測(cè)定光密度值（OD）。根據(jù)公式記錄β-葡聚糖對(duì)S180細(xì)胞的抑制率。抑制率（%）＝[（OD對(duì)照孔－OD實(shí)驗(yàn)孔）/（OD對(duì)照孔－OD空白孔）]×100%。

2.5 動(dòng)物模型的建立

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期S180細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度為7×105個(gè)·mL－1，于每只小鼠皮下接種0.2 mL細(xì)胞懸液，并對(duì)小鼠荷瘤情況進(jìn)行觀察及記錄，接種部位出現(xiàn)實(shí)體瘤并伴隨腹部腫大則提示造模成功。

2.6 分組及給藥

取80只造模成功的荷瘤小鼠，適應(yīng)環(huán)境飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分為正常組，模型組，順鉑組，β-葡聚糖低（50 mg·kg－1）、中（100 mg·kg－1）、高（200 mg·kg－1）劑量組。正常組與模型組灌胃等體積的蒸餾水，順鉑組按照0.2 mg·kg－1的劑量腹腔注射順鉑，β-葡聚糖組按照對(duì)應(yīng)劑量灌胃給藥。隔日給藥，1次·d－1。連續(xù)給藥3周，每周根據(jù)動(dòng)物體質(zhì)量情況調(diào)整給藥體積。

2.7 觀察指標(biāo)

2.7.1 測(cè)定各組小鼠的抑瘤率及脾臟指數(shù) 給藥21 d后，眼球取血，頸椎脫臼法處死小鼠。檢測(cè)各組小鼠的抑瘤率及脾臟指數(shù)。抑瘤率（%）＝[（模型組腫瘤質(zhì)量－實(shí)驗(yàn)組腫瘤質(zhì)量）/模型組腫瘤質(zhì)量]×100%，脾臟指數(shù)＝脾臟質(zhì)量/體質(zhì)量。

2.7.2 小鼠血清中IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ的含量 采小鼠眼球靜脈血，放置6 h，使血清充分析出，1500 r·min－1離心10 min，收集血清。參照ELISA試劑盒說明書方法測(cè)定小鼠血清中IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ的含量。

2.7.3 蛋白印跡法（Western blot）測(cè)定小鼠瘤組織中Bax、Bcl-2、VEGFA、JAK2、STAT3蛋白的表達(dá) 將瘤組織加入液氮，研磨粉碎。通過增量法稱定質(zhì)量，按照每1 mg添加10 μL的比例添加裂解液（RIPA∶PMSF＝100∶1），置于冰上裂解30 min。裂解后于4℃、12 000 r·min－1離心10 min，取上清液，采用BCA蛋白定量試劑盒進(jìn)行蛋白定量。取高溫變性后的蛋白質(zhì)（20 μg/lane），采用8%SDS聚丙烯酰胺凝膠分離，轉(zhuǎn)移至PVDF膜上，使用5%脫脂奶粉封閉2 h，用1×TBST清洗3次，每次10 min，一抗4℃孵育過夜；加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗避光孵育2 h；曝光、顯影、定影。用凝膠圖像分析軟件分析各條帶光密度值，以β-actin為內(nèi)參照，目的蛋白相對(duì)表達(dá)量以目的蛋白與β-actin光密度比值表示。

2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用單因素方差分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 β-葡聚糖作用靶點(diǎn)及腹水瘤靶點(diǎn)預(yù)測(cè)結(jié)果、藥物-疾病-靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建

分別從數(shù)據(jù)庫中獲取β-葡聚糖的作用靶點(diǎn)33個(gè)與腹水瘤疾病靶點(diǎn)3116個(gè)。將上述靶點(diǎn)導(dǎo)入Veen數(shù)據(jù)庫進(jìn)行交互分析（見圖1A），獲得交集靶點(diǎn)12個(gè)用于本實(shí)驗(yàn)的后續(xù)研究。將藥物作用靶點(diǎn)與Veen圖中交集靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape 3.8.0，獲得藥物-疾病-靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)圖，涉及DRD1、VEGFA、FGF2、HPSE、CDK1等12個(gè)交集靶點(diǎn)，見圖1B。

圖1 藥物-靶點(diǎn)Veen圖（A）與藥物-疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖（B）Fig 1 Drug-target veen diagram（A） and drug-disease-target network diagram（B）

3.2 蛋白互作、GO及KEGG分析

將交互基因?qū)隨tring數(shù)據(jù)庫，分析獲得VEGFA、STAT3、FGF2、HSP90AA1等8個(gè)靶點(diǎn)的相互作用關(guān)系，見圖2A。使用R Studio對(duì)交集靶點(diǎn)進(jìn)行GO及KEGG富集分析，GO分析得到MAPK激酶的正向調(diào)控、內(nèi)皮細(xì)胞趨化性的調(diào)節(jié)、蛋白激酶活性的激活、血管生成的正向調(diào)節(jié)、中腎小管形態(tài)的發(fā)生等生物過程與化學(xué)誘導(dǎo)活性、生長(zhǎng)因子受體結(jié)合、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體結(jié)合以及熱休克蛋白結(jié)合等分子功能，見圖2B、2C。通路富集分析得到癌癥中的蛋白多糖、EGFR酪氨酸激酶抑制劑、鈣信號(hào)通路、PI3K-Akt通路、MAPK信號(hào)通路、TH17細(xì)胞分化通路及HIF-1信號(hào)通路等15條通路，見圖2D。

圖2 蛋白互作網(wǎng)與GO、KEGG分析Fig 2 Protein interaction network and GO，KEGG analysis A.蛋白互作網(wǎng)絡(luò)圖（protein interaction network）；B.生物過程圖（bioprocess）；C.細(xì)胞組成圖（cell composition）；D.分子功能圖（molecular function）

3.3 生物學(xué)驗(yàn)證

3.3.1β-葡聚糖對(duì)S180細(xì)胞活性的影響 如圖3所示，與對(duì)照組相比，各劑量β-葡聚糖作用24 h對(duì)S180細(xì)胞均無直接抑制作用。

圖3 不同濃度β-葡聚糖對(duì)S180細(xì)胞活性的影響Fig 3 Effect of different concentrations of β-glucan on S180 cell

3.3.2β-葡聚糖對(duì)S180荷瘤小鼠腫瘤生長(zhǎng)的影響

如表1所示，與模型組比較，各給藥組均有顯著的抑瘤作用。其中順鉑組抑瘤作用最強(qiáng)，抑瘤率達(dá)到64.76%；β-葡聚糖給藥組抑瘤率伴隨著給藥劑量的增加呈上升趨勢(shì)。

3.3.3β-葡聚糖對(duì)S180荷瘤小鼠脾臟指數(shù)的影響如表1所示，與空白組比較，模型組脾臟指數(shù)顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，各劑量β-葡聚糖給藥組脾臟指數(shù)均顯著降低（P＜0.01）。

表1 β-葡聚糖對(duì)S180荷瘤小鼠腫瘤生長(zhǎng)及脾臟指數(shù)的影響( ±s，n＝8)Tab 1 Effect of β-glucan on tumor growth and spleen index of S180 tumor-bearing mice ( ±s，n＝8)

表1 β-葡聚糖對(duì)S180荷瘤小鼠腫瘤生長(zhǎng)及脾臟指數(shù)的影響( ±s，n＝8)Tab 1 Effect of β-glucan on tumor growth and spleen index of S180 tumor-bearing mice ( ±s，n＝8)

注：與空白組比較，**P＜0.01；與模型組比較，##P＜0.01。Note：Compared with the blank group，**P＜0.01；compared with the model group，##P＜0.01.

組別 瘤質(zhì)量/g 抑瘤率/% 脾臟指數(shù)/（mg·g－1）空白組 － － 3.81±0.57模型組 5.54±0.82 － 9.09±1.37**順鉑組 1.95±0.42## 64.76 5.25±1.01##低劑量組 4.64±0.45# 16.28 5.91±1.32##中劑量組 4.14±0.48## 25.32 6.57±1.03##高劑量組 3.04±0.47## 45.14 6.66±1.18##

3.3.4β-葡聚糖對(duì)S180荷瘤小鼠相關(guān)細(xì)胞因子的影響 如表2所示，與空白組比較，模型組小鼠血清中IL-2、IL-4水平明顯降低（P＜0.01）。與模型組比較，順鉑組及β-葡聚糖各給藥組IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ水平具有上升趨勢(shì)，IL-6水平具有下降趨勢(shì)。

表2 β-葡聚糖對(duì)S180荷瘤小鼠細(xì)胞因子的影響( ±s，n＝8)Tab 2 Effect of β-glucan on cytokines in S180 tumor-bearing mice ( ±s，n＝8)

表2 β-葡聚糖對(duì)S180荷瘤小鼠細(xì)胞因子的影響( ±s，n＝8)Tab 2 Effect of β-glucan on cytokines in S180 tumor-bearing mice ( ±s，n＝8)

注：與空白組比較，**P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01。Note：Compared with the blank group，**P＜0.01；compared with the model group，#P＜0.05，# #P＜0.01.

組別 TNF-α/（pg·mL－1） IFN-γ/（pg·mL－1） IL-2/（pg·mL－1） IL-4/（pg·mL－1） IL-6/（pg·mL－1）空白組 183.83±7.98 17.43±4.77 9.46±1.09 7.75±0.68 7.65±0.77模型組 196.61±17.61 22.36±2.70 5.61±2.20** 4.26±0.35** 12.74±0.77**順鉑組 283.39±16.45## 36.95±3.63## 7.00±0.44 5.24±1.40 9.16±1.68低劑量組 224.26±21.59## 20.08±3.07 6.87±1.39 7.22±0.69## 9.3±0.64#中劑量組 234.84±7.91## 25.38±3.81 7.23±1.96 5.76±0.72## 9.97±1.39##高劑量組 257.78±26.78## 31.67±4.09## 6.78±1.71 5.08±0.78 11.61±1.33##

3.3.5β-葡聚糖對(duì)Bax、Bcl-2、VEGFA、JAK2、STAT3蛋白表達(dá)的影響 如圖4所示，與模型組比較，順鉑組與β-葡聚糖各給藥組均能使Bax蛋白的表達(dá)上調(diào)，使Bcl-2、VEGFA、JAK2以及STAT3蛋白的表達(dá)下調(diào)。

圖4 Bax（A）、Bcl-2（B）、VEGFA（C）、JAK2（D）、STAT3（E）蛋白的相對(duì)表達(dá)量（P＜0.05，P＜0.01）Fig 4 Relative expression of Bax（A），Bcl-2（B），VEGFA（C），JAK2（D），and STAT3（E）protein（P＜0.05，P＜0.01）

4 討論

作為真菌細(xì)胞壁含量最高的多糖[10]，β-葡聚糖可對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行有效攻擊而對(duì)正常細(xì)胞無殺傷作用[11]。天然多糖因其治療效果顯著且毒副作用較輕而受到關(guān)注[12]。有研究表明，β-葡聚糖作為一種高效的生物應(yīng)答物能夠提高機(jī)體免疫力[13]。因此本實(shí)驗(yàn)觀察β-葡聚糖在體內(nèi)外對(duì)S180腹水瘤的療效，并進(jìn)一步明確其作用機(jī)制。

本文通過對(duì)已有數(shù)據(jù)集分析β-葡聚糖可能作用于腹水瘤的靶點(diǎn)，獲得12個(gè)潛在靶點(diǎn)，對(duì)其進(jìn)一步分析明確交集靶點(diǎn)涉及VEGFA、STAT3等8個(gè)靶點(diǎn)；從GO與KEGG富集結(jié)果來看，β-葡聚糖可能通過干預(yù)MAPK激酶的正向調(diào)控、內(nèi)皮細(xì)胞趨化性的調(diào)節(jié)、蛋白激酶活性的激活、血管生成的正向調(diào)節(jié)，調(diào)控PI3K-Akt、EGFR、MAPK等信號(hào)通路發(fā)揮作用。

本研究發(fā)現(xiàn)高劑量β-葡聚糖對(duì)S180荷瘤小鼠的抑瘤作用較好，抑瘤率為45.14%。本實(shí)驗(yàn)選擇了能夠反映細(xì)胞及體液免疫的脾臟指數(shù)[14]進(jìn)行考察，發(fā)現(xiàn)各劑量β-葡聚糖給藥組均可降低脾臟指數(shù)。提示其抗腫瘤機(jī)制可能與對(duì)機(jī)體免疫器官的保護(hù)作用相關(guān)。

在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中，T淋巴細(xì)胞會(huì)釋放出多種細(xì)胞因子。細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4及IL-6可以結(jié)合自身相對(duì)應(yīng)的受體調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化并對(duì)免疫應(yīng)答過程進(jìn)行調(diào)控[15]。其中，TNF-α含量在一定的范圍內(nèi)可對(duì)受損的組織起到修復(fù)作用，但當(dāng)其濃度異常升高時(shí)，也會(huì)對(duì)組織造成一定的損傷[16]。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究表明，β-葡聚糖能夠升高小鼠血清中TNF-α含量，可能與增加血清中腫瘤壞死因子含量從而發(fā)揮抗腫瘤作用有關(guān)。IFN-γ由活化的Th細(xì)胞與NK細(xì)胞產(chǎn)生，可以促進(jìn)Th1細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育，對(duì)于免疫調(diào)控也具有一定的影響[17]。β-葡聚糖能升高小鼠血清中IFN-γ水平，可能與其可促進(jìn)機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的免疫因子相關(guān)。IL-2可促進(jìn)T細(xì)胞的生長(zhǎng)，在抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的特異性免疫反應(yīng)中扮演重要角色。IL-4作為具有生物學(xué)活性的細(xì)胞因子，可以通過少量的分泌對(duì)人體起到保護(hù)作用，在感染以及腫瘤的治療中發(fā)揮作用。但當(dāng)其分泌量較大時(shí)，將會(huì)促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展。IL-6最初被作為一種炎癥因子被人們所認(rèn)識(shí)，之后越來越多的研究發(fā)現(xiàn)IL-6在癌癥患者的體內(nèi)還可作為“促瘤因子”發(fā)揮促瘤效應(yīng)[18]。

有研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞凋亡過程中紊亂的發(fā)生與腫瘤的產(chǎn)生密切相關(guān)，多種基因共同調(diào)控腫瘤細(xì)胞的凋亡過程，例如促凋亡基因、抑制凋亡基因及凋亡效應(yīng)基因等[19]。Bcl-2家族在凋亡的過程中扮演著重要的角色，以具有對(duì)抗凋亡的Bcl-2蛋白以及促進(jìn)凋亡的Bax蛋白為代表。當(dāng)Bcl-2表達(dá)過高時(shí)，可以抑制細(xì)胞凋亡；但Bcl-2表達(dá)不足，Bax表達(dá)過量時(shí)，體內(nèi)的Bax同源二聚體占據(jù)優(yōu)勢(shì)，會(huì)促進(jìn)細(xì)胞凋亡[20]。在本實(shí)驗(yàn)中，相較于模型組，各給藥組的Bcl-2蛋白表達(dá)量均降低，Bax蛋白表達(dá)量均升高，以順鉑組最為明顯，高、中劑量的β-葡聚糖次之。

JAK-STAT信號(hào)通路經(jīng)上游細(xì)胞因子產(chǎn)生刺激，而對(duì)下游包括Bcl-2、Bax及VEGF等靶基因進(jìn)行調(diào)控并參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡、血管生成等生物學(xué)過程[21]。VEGF作為生理和病理性血管生成所必需的促血管生成因子在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要的角色[22]。STAT3作為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活蛋白家族成員之一，其異常激活可上調(diào)VEGF的表達(dá)[23]。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)結(jié)果表明，VEGF、STAT3靶點(diǎn)在β-葡聚糖治療腹水瘤中發(fā)揮重要作用。Western blot結(jié)果提示，相較于模型組，小劑量β-葡聚糖給藥組對(duì)其抑制作用不顯著，而β-葡聚糖中、高劑量組均能降低JAK2、STAT3以及VEGFA蛋白的表達(dá)量，并能顯著抑制腫瘤的生長(zhǎng)。

聯(lián)合作用靶點(diǎn)分析發(fā)現(xiàn)VEGFA、JAK、STAT3與多條通路密切相關(guān)，表皮生產(chǎn)因子通路中的VEGF/JAK/STAT3靶點(diǎn)與凋亡抑制基因Bcl2及促癌基因Bax的蛋白表達(dá)情況如圖5所示。

圖5 PI3K-Akt及EGFR富集通路圖Fig 5 PI3K-Akt and EGFR enrichment pathway

一方面，β-葡聚糖通過影響JAK與Bcl-2蛋白相對(duì)表達(dá)量調(diào)控PI3K-Akt通路，改善腹水瘤小鼠炎癥狀態(tài)；另一方面，β-葡聚糖通過下調(diào)VEGFA、JAK2、STAT3蛋白表達(dá)水平及IL-6表達(dá)水平，上調(diào)IFN-γ、IL-2、IL-4水平，影響EGFR信號(hào)通路，從而抑制小鼠腹水瘤組織的表皮生長(zhǎng)因子通路，發(fā)揮抗腫瘤作用，且β-葡聚糖還通過降低Bcl2和升高Bax的蛋白表達(dá)水平，抑制腹水瘤組織中腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。

綜上所述，β-葡聚糖可能是通過影響JAK2/STAT3/VEGF等靶點(diǎn)，參與調(diào)節(jié)PI3K-Akt、EGFR等通路，從而發(fā)揮促進(jìn)腫瘤凋亡的作用。