任勝科

摘要：通過(guò)HPLC-DAD研究紫菀中酚酸類(lèi)、環(huán)肽類(lèi)和皂苷類(lèi)成分的含量，發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地和采收時(shí)間的紫菀化學(xué)成分含量差異明顯，旨在為紫菀的種植、儲(chǔ)存和有效利用提供參考意見(jiàn)。

關(guān)鍵詞：紫菀;HPLC-DAD;酚酸類(lèi);環(huán)肽類(lèi);皂苷類(lèi)

紫菀入藥部位是菊科植物紫菀（Aster tataricus L.f.）干燥的根和根莖，具有潤(rùn)肺止咳、下氣化痰及通便，利尿，止血，開(kāi)喉痹、潤(rùn)肌膚等功效，常被用于喘咳痰多，咳血?jiǎng)谒院托戮每人?。該屬所含化學(xué)成分十分豐富，包括萜類(lèi)及其皂苷、肽類(lèi)、有機(jī)酸、酚類(lèi)、蒽醌類(lèi)、香豆素類(lèi)、甾醇類(lèi)、黃酮類(lèi)及生物堿等化合物。

在含量測(cè)定上，主要應(yīng)用高效液相色譜法，亦有熒光分光光度法、UV法、薄層掃描法等。選擇測(cè)定的化學(xué)成分有紫菀酮、阿魏酸、槲皮素、山柰酚、黃酮類(lèi)成分和三萜類(lèi)成分。如2020版藥典以高效液相色譜法測(cè)定紫菀酮，且規(guī)定本品按干燥品計(jì)算，含紫菀酮（CHO）不得少于0.15%。亦有以HPLC測(cè)定紫菀中阿魏酸、槲皮素、山柰酚和黃酮類(lèi)成分，以熒光分光光度法測(cè)定紫菀總黃酮含量，以UV法測(cè)定紫菀總?cè)祁?lèi)成分的含量。

本論文應(yīng)用HPLC-DAD方法，對(duì)河北安國(guó)、安徽亳州、南京三個(gè)不同產(chǎn)地的紫菀，及同一產(chǎn)地不同采收時(shí)間的紫菀藥材中酚酸類(lèi)（綠原酸，異綠原酸A，異綠原酸B）、環(huán)肽類(lèi)（AstinA，AstinB，AstinC）及三萜皂苷類(lèi)（皂苷A，皂苷C）這三大類(lèi)八個(gè)成分進(jìn)行含量測(cè)定分析，考察不同地點(diǎn)，不同采收時(shí)間對(duì)藥材中主要化學(xué)成分含量的影響，為紫菀藥材的種植、儲(chǔ)存和有效利用提供一定的參考價(jià)值。

一、不同產(chǎn)地對(duì)紫菀化學(xué)成分的影響

1.1實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備

1.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器

HPLC檢測(cè)器（Agilent公司，1260型號(hào)），KH-500DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山樂(lè)創(chuàng)超聲儀器有限公司），AL104電子天平，TGL-16高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)，SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司），WH-3微型旋渦混合儀（上海滬西分析儀器廠有限公司），高速萬(wàn)能粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司），GZX-9240MBE數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱（上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠），微孔濾膜（0.2um）

1.1.2? 實(shí)驗(yàn)藥材

紫菀藥材經(jīng)中國(guó)藥科大學(xué)生藥研究室張勉教授鑒定為菊科植物紫菀Aster tataricus L. f.，A1～A8產(chǎn)地為河北安國(guó)，B1～B8為安徽亳州，T1為江蘇南京，該實(shí)驗(yàn)所用藥材部位為紫菀的根。

1.1.3實(shí)驗(yàn)試劑

綠原酸（南京澤朗），異綠原酸A、異綠原酸B、AstinA、AstinB、AstinC、皂苷A、皂苷C等對(duì)照品為實(shí)驗(yàn)室自制，純度達(dá)到98%以上，乙腈（德國(guó)，Merck），甲醇（色譜純，分析純），甲酸（分析純），娃哈哈純凈水等。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1色譜條件

檢測(cè)方法：HPLC-DAD，Agilent EC-C18柱（150mm×4.6mm，2.7μm），流動(dòng)相0.03%甲酸水-乙腈梯度洗脫（洗脫方法見(jiàn)表2-2），流速0.5mL·min-1，柱溫30℃，進(jìn)樣量5μL，檢測(cè)波長(zhǎng)210nm。對(duì)照品及樣品色譜圖見(jiàn)圖 1-1。

1.2.2 對(duì)照品溶液的配制

分別取綠原酸，異綠原酸A，異綠原酸B，AstinA，AstinB，AstinC，皂苷A，皂苷C對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇溶解制成各對(duì)照品貯備液，取各對(duì)照品貯備液適量，加甲醇稀釋制成每1ml含綠原酸0.524mg、異綠原酸B0.440 mg、異綠原酸A0.454 mg、AstinA1.08 mg、AstinB1.10 mg、AstinC1.035 mg、皂苷C1.3mg、皂苷A1.02mg的混合對(duì)照品溶液。

1.2.3樣品溶液的配制

將藥材以低溫烘干，打粉，過(guò)40目篩，備用。精密稱取紫菀粉末0.5g，用40倍量50%甲醇超聲提取45分鐘，稱重，補(bǔ)足減失的重量，離心，微孔濾膜過(guò)濾，即得樣品溶液。

1.3實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

取不同產(chǎn)地的紫菀藥材樣品，按1.2.3項(xiàng)下方法制得樣品溶液，并按1.2.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，以下含量均為百分比，結(jié)果見(jiàn)表1-1。

1.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

由上表分析可知，各化學(xué)成分含量及變化范圍如下（見(jiàn)表1-2和1-3、圖1-2和1-3）：

結(jié)果分析表明，產(chǎn)地不同，紫菀中各化學(xué)成分含量不同，尤其以皂苷類(lèi)中皂苷C差異最大。

二、不同采收時(shí)間對(duì)紫菀化學(xué)成分的影響

2.1實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備

除實(shí)驗(yàn)藥材外，其他同上。

紫菀藥材經(jīng)中國(guó)藥科大學(xué)生藥研究室張勉教授鑒定為菊科植物紫菀Aster tataricus L. f.，產(chǎn)地為南京，該實(shí)驗(yàn)所用藥材于中國(guó)藥科大學(xué)江寧校區(qū)植物園9月種植，藥材部位為紫菀的根。

2.2實(shí)驗(yàn)方法

同上

2.3實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

取不同產(chǎn)地的紫菀藥材樣品，按1.2.3項(xiàng)下方法制得樣品溶液，并按1.2.1 項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2-1至表2-4和圖2-1;同時(shí)測(cè)試浸膏得率，結(jié)果見(jiàn)表2-5和圖2-2。

浸膏得率：將提取到的各樣品溶液離心過(guò)濾后分別量取4ml（相當(dāng)于藥粉0.1g）于潔凈的蒸發(fā)皿中，水浴鍋上蒸干至恒重。

表2-3? 浸膏得率

由上述圖表分析可知，隨采收時(shí)間變化，總體上酚酸類(lèi)（CA、異B、異A）呈下降趨勢(shì)，而Astin（AstinA、AstinB、AstinC）和皂苷（皂苷C、皂苷A）呈上升趨勢(shì)。浸膏得率先增加后降低，1月份的時(shí)候浸膏得率最高。

三、總結(jié)

本文考察了不同產(chǎn)地和采收時(shí)間對(duì)紫菀化學(xué)成分的影響。通過(guò)HPLC-DAD定量測(cè)定，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)地不同，紫菀中各化學(xué)成分含量不同，尤其以皂苷類(lèi)中皂苷C差異最大。這意味著中藥材想要做到安全可控，必須制訂相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，以規(guī)范其種植與生產(chǎn)加工。

同時(shí)發(fā)現(xiàn)隨采收時(shí)間變化，總體上酚酸類(lèi)呈下降趨勢(shì)，而環(huán)肽類(lèi)和皂苷類(lèi)呈上升趨勢(shì)，尤其是皂苷類(lèi)上升趨勢(shì)明顯。這些結(jié)果表明采收時(shí)間不同，紫菀的化學(xué)成分含量是會(huì)變化的，這為紫菀的采收儲(chǔ)存與有效利用提供了一定的參考價(jià)值。

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