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        電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜(ICP-AES)法測(cè)定胡蜂酒中無機(jī)元素

        2022-03-23 07:58:26李秀林田先嬌田孟華郭云膠楊新周
        關(guān)鍵詞:胡蜂種元素原子熒光

        李秀林 田先嬌 田孟華 郭云膠 楊新周,4*

        (1.瑞麗海關(guān),云南 瑞麗 678600;2.德宏師范高等??茖W(xué)校 民族醫(yī)藥研究所,云南 芒市 678400; 3.昭通市天麻研究院,云南 昭通 657000;4.德宏師范高等??茖W(xué)校 理工學(xué)院,云南 芒市 678400)

        胡蜂酒來源于景頗民族醫(yī)藥,由德宏州瑞麗人梅干家族發(fā)明[1]。自1977年以來一直收錄在中國(guó)藥典中,胡蜂酒不僅可以去除風(fēng)濕,治療急性風(fēng)濕病,風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、而且對(duì)治療肩周炎、坐骨神經(jīng)痛、四肢麻木、跌打損傷都有一定的療效,用法上不僅可以口服,還可以外用[2]。胡蜂酒承載著民族文化和歷史的文化,目前對(duì)胡蜂酒的研究主要集中在制作工藝上,對(duì)胡蜂酒中化學(xué)成分研究較少,對(duì)胡蜂酒金屬元素的測(cè)定鮮見報(bào)道。

        酒中含有的醇類、酯類、有機(jī)酸、羰基化合物及各種無機(jī)金屬元素等會(huì)直接影響其品質(zhì)和風(fēng)格[3],如Fe3+、Cu2+能催化白酒的老熟,若含量過高致使酒質(zhì)變差,甚至使白酒出現(xiàn)金屬味[4-6];Na+、K+、Mg2+過多導(dǎo)致酒質(zhì)變差[4-5]。 有害金屬元素(As、Pb、Cd、Hg)含量過高對(duì)人們健康造成不良影響[4-8]。為了確保胡蜂酒的品質(zhì)和飲用安全,對(duì)胡蜂酒進(jìn)行金屬元素分析尤為重要。

        目前檢測(cè)酒中金屬元素的方法主要有火焰原子吸收光譜法、石墨爐原子吸收光譜法[9-11]、原子熒光光譜法[12-13]、電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法[14]、電感耦合等離子體質(zhì)譜法[4,15]?;鹧嬖游展庾V法、石墨爐原子吸收光譜法、原子熒光光譜法適用于單元素的分析,對(duì)于多元素的測(cè)定速度慢,且操作復(fù)雜繁瑣[16]。電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法、電感耦合等離子體質(zhì)譜法均具有高靈敏度和檢出限低的特點(diǎn),且能同時(shí)測(cè)定多種元素,能提高工作效率[17]。本實(shí)驗(yàn)采用消解電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法同時(shí)測(cè)定不同產(chǎn)區(qū)胡蜂酒中Al、B、Ba、Cu、Fe、Mn、Ni、Sr、Ti、V、Zn、Ca、K、Mg、Na、P等16種元素,用石墨爐原子吸收光譜法測(cè)定Cd、Pb,并用原子熒光光譜法測(cè)定As、Hg元素,分析不同產(chǎn)區(qū)間胡蜂酒金屬元素含量之間的差異,以期為胡蜂酒的品質(zhì)、安全評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。

        1 實(shí)驗(yàn)部分

        1.1 主要試劑與儀器

        7200電感耦合等離子體光譜儀(美國(guó)熱電公司),AFS-9530雙通道原子熒光光度計(jì)(北京海光儀器有限公司),AL204電子分析天平(梅特勒-托利多),Milli-Q純水儀。

        金屬元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(GSB G62027-90(3301),國(guó)家鋼鐵材料測(cè)試中心),濃硝酸(MOS級(jí),天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司)。

        1.2 樣品信息及制備

        實(shí)驗(yàn)樣品金環(huán)胡蜂成熟職蜂來自云南省14個(gè)不同地區(qū),所有樣品經(jīng)德宏師范高等??茖W(xué)校郭云膠教授鑒定胡蜂科金環(huán)胡蜂的職蜂。各樣品信息如表1所示。胡蜂群中存在職蜂、雄蜂、蜂王。其中職蜂能釋放蜂毒,且數(shù)量大,雄蜂主要負(fù)責(zé)交配,沒有毒液。實(shí)驗(yàn)中選擇職蜂進(jìn)行浸泡制作胡蜂酒。按照2020版藥典,稱取100 g鮮胡蜂(成熟職蜂)于玻璃瓶中,加入1 000 mL 50%~60%(vol)白酒,浸泡90 d,得胡蜂酒。

        表1 樣品信息

        1.3 儀器測(cè)試條件

        ICP-OES觀測(cè)方式:K、Ca、Na三種元素為垂直觀測(cè),其他元素為水平觀測(cè);功率1 150 W,輔助氣流量0.5 L/min,霧化器氣體流量0.65 L/min,分析泵速50 r/min。

        石墨爐原子吸收光譜儀測(cè)定Cd波長(zhǎng)228.8 nm,狹縫0.5 nm,測(cè)量模式為峰高,燈電流7.0 mA,采用扣背景。

        原子熒光測(cè)定As燈總電流50 mA,負(fù)高壓:260 V,原子化器高度10 mm,載氣流速400 mL/min,屏蔽器流量1 000 mL/min;原子熒光測(cè)定Hg燈總電流20 mA,負(fù)高壓240 V,原子化器高度8 mm,載氣流速400 mL/min,屏蔽器流量1 000 mL/min。

        1.4 樣品溶液制備

        稱量3 g(精確至0.000 1 g)胡蜂酒樣品,100 ℃加熱至溶液剩余0.5~1.0 mL,加5 mL硝酸,105 ℃消解2 h,用超純水定容至25 mL,上機(jī)測(cè)定。利用ICP-OES法測(cè)定。其中Cd、Pb利用石墨爐原子吸收光譜法測(cè)定,汞利用原子熒光光譜法測(cè)定。

        胡蜂酒中As、Hg含量較低適用于用原子熒光光譜法進(jìn)行測(cè)定。

        砷消解方法:稱量3 g胡蜂酒,100 ℃加熱至溶液剩余約1.0 mL,加5 mL硝酸,150 ℃消解至剩余1 mL,加入1 mol/L鹽酸至22.5 mL,加入2.5 mL 硫脲-抗壞血酸(50 g/L),放置0.5 h后,用原子熒光光譜法測(cè)定。

        1.5 非致癌重金屬健康風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)模型

        Cu、Pb、Cd、Hg 4種重金屬元素主要具有非致癌毒性。根據(jù)美國(guó)國(guó)家環(huán)保署創(chuàng)建的非致癌風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)方法[18-21],長(zhǎng)期服用胡蜂酒重金屬元素造成的健康風(fēng)險(xiǎn)可以運(yùn)用靶標(biāo)危害系數(shù)來評(píng)價(jià),計(jì)算公式如式(1)、(2)所示。

        EDI=(Ci×FIR×EF×ED)/(WAB×TA)

        (1)

        THQ=EDI/RfD

        (2)

        EDI—重金屬i的平均日攝入量,mg/(kg·d);RfD—重金屬i的每日允許最大攝入量,mg/(kg·d);Ci—胡蜂酒中重金屬i的平均含量,mg/kg;EF—暴露頻率,d/a;ED—接觸年限,a;TA—接觸時(shí)間,d;WAB—成年人體重以60 kg計(jì)算;FIR—每日胡蜂酒攝入量,g/d。

        2 結(jié)果分析

        2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線方程

        20種無機(jī)金屬元素線性方程如表2所示。從表2中可得,20種金屬線性方程相關(guān)系數(shù)(r)在0.998 5~1.0,說明20種金屬線性關(guān)系良好,適合檢測(cè)胡蜂酒中金屬元素。

        表2 20種無機(jī)元素線性回歸方程

        2.2 精密度實(shí)驗(yàn)

        將同一份混合標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)測(cè)定6次,得出各元素相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.05%~1.3%,表明儀器精密度良好。

        2.3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

        以1號(hào)樣品為例,按照1.5平行3組實(shí)驗(yàn),18種元素以檢測(cè)濃度表示,Hg、As以檢測(cè)熒光強(qiáng)度表示,利用檢測(cè)平均值計(jì)算3組間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,結(jié)果見表3,由表3可得20種無機(jī)元素的精密度為0.25%~3.4%,說明該檢測(cè)方法偏差較小。

        2.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

        以1號(hào)樣品為例,按照實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行樣品制備,在不同時(shí)間段(0、2、4、6、8、16、24 h)測(cè)定樣品溶液中20種無機(jī)元素,18種元素以檢測(cè)濃度表示,Hg、As以檢測(cè)熒光強(qiáng)度表示,結(jié)果見表4,由表4可知20種無機(jī)元素的RSD為0.10%~4.60%,表明在24 h之內(nèi)無機(jī)元素穩(wěn)定。

        表3 20種元素精密度測(cè)試

        表4 20種元素穩(wěn)定性測(cè)試

        2.5 方法回收率

        以1號(hào)樣品進(jìn)行加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn),加標(biāo)回收率為平行測(cè)定3次的平均值,通過實(shí)驗(yàn)得出,樣品溶液的加標(biāo)回收率均在80.0%~120%,說明該方法準(zhǔn)確度好(表5)。

        表5 20種元素方法回收率

        2.6 不同產(chǎn)地胡蜂酒金屬元素的測(cè)定結(jié)果及分析

        對(duì)不同產(chǎn)區(qū)胡蜂制作的胡蜂酒進(jìn)行元素測(cè)定,結(jié)果見表6。從表6中可以看出,胡蜂酒中含有Al、B、Ba、Cu、Fe、Mn、Ni、Sr、Ti、V、Zn、Ca、K、Mg、Na、P等16種元素,16種無機(jī)元素中P含量最高,為118.132 mg/kg,Sr元素含量最低,為0.011 9 mg/kg。所有產(chǎn)區(qū)胡蜂酒中均未檢出Hg、Cd、Pb、As等元素。其中Cu元素含量為0.258 3 mg/kg。胡蜂酒中Pb、Cd、As、Hg、Cu含量均符合2020版中國(guó)藥典限定值。16種元素中Ti變異系數(shù)最大,說明Ti元素含量在不同產(chǎn)區(qū)胡蜂酒中差異較大。變異系數(shù)最小的是K元素,說明K元素含量在不同產(chǎn)區(qū)胡蜂酒中較穩(wěn)定。從圖1可看出,P、K、Na含量分別占據(jù)16種元素的43.64%、38.58%、13.92%,其余元素占比3.86%。

        2.7 胡蜂酒金屬元素指紋圖譜的建立

        按照元素的原子順序,以元素含量為縱坐標(biāo),元素名稱為橫坐標(biāo),繪制胡蜂酒金屬元素指紋圖譜。由于胡蜂酒中部分元素含量級(jí)別相差較大,在建立指紋圖中將部分金屬元素?cái)U(kuò)大或縮小到一個(gè)數(shù)量級(jí),Na、P、K元素含量均縮小100倍,繪制的金屬元素指紋圖譜見圖2??梢姴煌a(chǎn)區(qū)胡蜂酒金屬元素含量存在差異,但整體上呈現(xiàn)相似的分布態(tài)勢(shì)。胡蜂酒中金屬元素譜具有很強(qiáng)的一致性和特征性,生成的金屬元素指紋圖譜可為胡蜂酒的質(zhì)量控制研究提供思路和科學(xué)依據(jù)。

        2.8 胡蜂酒中Cu、Pb、Cd、Hg的健康風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)

        Cu、Pb、Cd、Hg等4種重金屬主要具有非致癌毒性,為評(píng)價(jià)胡蜂酒中Cu、Pb、Cd、Hg等4種重金屬的非致癌健康風(fēng)險(xiǎn),但是胡蜂酒中Pb、Cd、Hg未檢測(cè)出,所以主要考慮Cu的健康風(fēng)險(xiǎn)。為評(píng)價(jià)胡蜂酒中Cu的非致癌健康風(fēng)險(xiǎn),采用1.6中的模型進(jìn)行研究。通過查閱《中國(guó)藥典》可得胡蜂酒使用方法為每日服用2次,每次為15~25 mL,綜合考慮,本文中以其平均值40 mL(大約為36 g)為胡蜂酒日攝入量進(jìn)行計(jì)算。根據(jù)美國(guó)環(huán)保署規(guī)定的安全限量和世界衛(wèi)生組織暫定的每周可耐受攝入量,其他參數(shù)假設(shè)如下:ED=30 a,EF=90 d/a,WAB=60 kg,TA=30 a×365 d/a,重金屬Cu的每日允許最大攝入量(RfD)為4.00×10-2mg/(kg·d)[18,20]。通過計(jì)算得出胡蜂酒中Cu的每日攝入量(EDI)為3.82×10-5mg/(kg·d),低于每日允許攝取最大量值(RfD),Cu的靶標(biāo)危險(xiǎn)系數(shù)(THQ)為1.00×10-2。THQ<1說明攝入的重金屬對(duì)人體健康造成的影響不明顯,THQ>1時(shí),表明暴露量高于不良反應(yīng)的閾值,對(duì)人體可造成非致癌健康風(fēng)險(xiǎn)[18]。胡蜂酒中Cu元素THQ值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于1,從金屬元素方面單一來看,飲用胡蜂酒沒有明顯的健康風(fēng)險(xiǎn)。

        表6 胡蜂酒中金屬元素含量

        圖1 胡蜂酒金屬元素占比分析Figure 1 Proportion of elements in vespa wine.

        圖2 胡蜂酒無機(jī)元素指紋圖譜Figure 2 Metal elemental fingerprint of Vespa wine.

        3 結(jié)論

        收集不同產(chǎn)區(qū)金環(huán)胡蜂,按照中國(guó)藥典(2020版)浸制胡蜂酒,測(cè)定胡蜂酒中20種金屬元素。通過實(shí)驗(yàn)從胡蜂酒中檢測(cè)出16種無機(jī)元素,其中重金屬Hg、Cd、Pb、As等4種元素未被檢出。其中非金屬P含量最大,為118.132 mg/kg,Sr元素含量最低,為0.011 9 mg/kg。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)得出胡蜂酒中含有P、K、Na、Mg、Ca等營(yíng)養(yǎng)元素,其中P、K Na含量占比16種金屬元素的96.14%,說明胡蜂酒中營(yíng)養(yǎng)元素在就所含有的金屬元素中含量較高。

        胡蜂酒中未檢出Pb、Cd、As、Hg,Cu含量為0.258 3 mg/kg,5種重金屬元素均未超過中國(guó)藥典限定值。對(duì)胡蜂酒中Cu、Pb、Cd、Hg等4種重金屬健康風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)(主要考慮Cu的健康風(fēng)險(xiǎn)),經(jīng)過健康風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)胡蜂酒中Cu元素THQ值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于1,從金屬元素方面單一來看,飲用胡蜂酒沒有明顯的健康風(fēng)險(xiǎn)。

        15個(gè)不同產(chǎn)區(qū)金環(huán)胡蜂泡制的胡蜂酒中金屬元素含量存在差異,由于泡制胡蜂酒的基酒、容器、環(huán)境都一致,導(dǎo)致存在差異的原因主要是胡蜂的生長(zhǎng)環(huán)境、進(jìn)食種類等不同。通過對(duì)胡蜂酒中金屬元素含量分析,建立了胡蜂酒金屬元素指紋圖譜,可為胡蜂酒的鑒別提供思路和科學(xué)依據(jù)。

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