史大川，初慧，孫偉杰，李燕，姚雪，劉偉，郝珍珍，孫青菊，鄭長(zhǎng)青

根據(jù)《全血及成分血質(zhì)量要求》（GB 18469－2012），去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞的儲(chǔ)存期末溶血率應(yīng)小于0.8%，而紅細(xì)胞溶血率需要測(cè)定游離血紅蛋白（free hemoglobin，F(xiàn)Hb）含量［1-2］，通過(guò)計(jì)算得出儲(chǔ)存期末溶血率，因此，游離血紅蛋白含量是血液制品中，尤其是去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一，過(guò)高的游離血紅蛋白含量會(huì)對(duì)輸血治療的患者存在安全隱患［2-3］。

血液經(jīng)過(guò)采集、運(yùn)輸、過(guò)濾、離心以及成分制備等多個(gè)環(huán)節(jié)，紅細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生一定的機(jī)械性損傷［4］。再加上海上的隨機(jī)搖擺，船上儲(chǔ)血冰箱中去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞長(zhǎng)期處于晃動(dòng)狀態(tài)，容易使紅細(xì)胞發(fā)生溶血現(xiàn)象［5］，隨著保存時(shí)間的增加，溶血現(xiàn)象會(huì)加劇。本研究將著重探討和研究長(zhǎng)航保存去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞的不同儲(chǔ)存期對(duì)游離血紅蛋白含量和紅細(xì)胞溶血率的影響及其變化。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 長(zhǎng)航區(qū)域海洋氣象條件 天氣晴轉(zhuǎn)多云，氣溫23.2～26.3℃，海水溫度21.9～24.1℃，浪高3～5 m，海況3～5 級(jí)，搖擺度平均3.4°，航行時(shí)間45 d。1.1.2 試驗(yàn)儀器與試劑 自動(dòng)溫控運(yùn)血箱（軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生裝備研究所研制）、三洋儲(chǔ)血冰箱（日本三洋集團(tuán)）、南京德鐵BS-1101 酶標(biāo)儀（南京德鐵試驗(yàn)設(shè)備有限公司）、600A 白洋離心機(jī)（北京白洋醫(yī)療器械有限公司）、生物安全柜HR40-IIA2（中國(guó)海爾集團(tuán)）、Mindray BC-5000 全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）、Beckman J6-HC 型低溫大容量離心機(jī)（美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司）、Hemoglobin Assay Kit（西格瑪奧德里奇上海貿(mào)易有限公司）及去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞保存液四聯(lián)袋（四川南格爾生物醫(yī)學(xué)有限公司）等。

1.1.3 血液采集與分組 根據(jù)《獻(xiàn)血者健康檢查要求》（GB 18467－2011），于長(zhǎng)航前1 d，隨機(jī)采集和制備去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞（red blood cells in additive solution leukocytes reduced）5 人份（每份2 U）。每份血液等分為2 份，標(biāo)記為試驗(yàn)組和對(duì)照組。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)標(biāo)本處理與數(shù)據(jù)采集 對(duì)照組血液儲(chǔ)存于科室專(zhuān)用儲(chǔ)血冰箱內(nèi)，溫度為（4±2）℃。長(zhǎng)航試驗(yàn)組血液儲(chǔ)存于醫(yī)療救護(hù)船專(zhuān)用儲(chǔ)血冰箱內(nèi)，溫度為（4±2）℃。試驗(yàn)組血液在運(yùn)輸過(guò)程中，血液均置于專(zhuān)用運(yùn)血箱內(nèi)運(yùn)輸，溫度為（4±2）℃。試驗(yàn)組與對(duì)照組血液標(biāo)本，分別于航行第28、35、42 天取樣進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 檢測(cè)數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)軟件分析，所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（xˉ±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，重復(fù)測(cè)量資料采用方差分析進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 游離血紅蛋白濃度的檢測(cè)分析

對(duì)照組和試驗(yàn)組分別于儲(chǔ)存第28、35 和42 天取樣檢測(cè)游離血紅蛋白濃度的變化。見(jiàn)表1。由統(tǒng)計(jì)結(jié)果可知，分組效應(yīng)與時(shí)間效應(yīng)的交互作用對(duì)游離血紅蛋白濃度的影響不顯著（P=0.059），組內(nèi)的游離血紅蛋白濃度隨保存時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸增大（P＜0.01），試驗(yàn)組和對(duì)照組的游離血紅蛋白濃度之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

表1 對(duì)照組和試驗(yàn)組游離血紅蛋白濃度檢測(cè)結(jié)果（mg/L，± s，每組n=5）

表1 對(duì)照組和試驗(yàn)組游離血紅蛋白濃度檢測(cè)結(jié)果（mg/L，± s，每組n=5）

注：分組效應(yīng)與時(shí)間效應(yīng)交互作用的分析結(jié)果P=0.059

時(shí)間第28 天第35 天第42 天P 值0.229 0.037 0.002對(duì)照組336.04±40.30 454.12±49.28 622.44±60.15試驗(yàn)組389.70±82.75 565.36±86.40 888.36±112.01 t 值-1.304-2.501-4.677

2.2 紅細(xì)胞溶血率的計(jì)算分析

對(duì)照組和試驗(yàn)組分別于儲(chǔ)存第28、35 和42 天取樣檢測(cè)游離血紅蛋白濃度的變化，紅細(xì)胞溶血率由紅細(xì)胞比容、總血紅蛋白濃度和游離血紅蛋白濃度計(jì)算得到，具體結(jié)果見(jiàn)表2。由統(tǒng)計(jì)結(jié)果可知，分組效應(yīng)與時(shí)間效應(yīng)的交互作用對(duì)紅細(xì)胞溶血率的影響不顯著（P=0.097），組內(nèi)的紅細(xì)胞溶血率隨保存時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸增大（P＜0.01），試驗(yàn)組和對(duì)照組的紅細(xì)胞溶血率之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.002）。在保存至第42 天時(shí)，2 組的游離血紅蛋白濃度均小于國(guó)標(biāo)《全血及成分血質(zhì)量要求》（GB 18469－2012）規(guī)定的0.8%。

表2 對(duì)照組和試驗(yàn)組紅細(xì)胞溶血率檢測(cè)結(jié)果（%，xˉ±s，每組n=5）

3 討論

隨著輸血醫(yī)學(xué)的飛速發(fā)展，臨床輸血已由全血發(fā)展到成分輸血。成分血的制備是指用過(guò)濾、離心分離、輻照、速凍和融化等方法，分離出全血中的各種有效血液成分，制備成高濃度和高純度的血液成分的過(guò)程［6-7］。在臨床輸血中，去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞是使用最多的血液制品之一，主要適用于糾正因紅細(xì)胞數(shù)量減少而引起的缺氧現(xiàn)象，能提高患者的攜氧能力［8］。去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞是使用白細(xì)胞過(guò)濾器清除懸浮紅細(xì)胞中幾乎所有的白細(xì)胞，并使殘留在懸浮紅細(xì)胞中的白細(xì)胞數(shù)量低于一定數(shù)值的紅細(xì)胞成分血；或使用帶有白細(xì)胞過(guò)濾器的多聯(lián)塑料血袋采集全血，并通過(guò)白細(xì)胞過(guò)濾器清除全血中幾乎所有的白細(xì)胞，將該去白細(xì)胞全血中的大部分血漿分離出后，向剩余物內(nèi)加入紅細(xì)胞添加液制成的紅細(xì)胞成分血［9］。輸注去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞可以減少白細(xì)胞引起的免疫反應(yīng)和減少輸血相關(guān)性移植物抗宿主?。╰ransfusion associated graft versus host disease，TA-GVHD）的發(fā)生。去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞在臨床廣泛應(yīng)用，輸血反應(yīng)明顯減少，從而使輸血工作做到更安全有效，為臨床治療及搶救工作發(fā)揮了很好的保障作用。對(duì)紅細(xì)胞的質(zhì)量以及輸血救治技術(shù)提出了更高的要求。因此，在海上對(duì)去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞溶血性的研究是非常有必要的［10］。

本次試驗(yàn)重點(diǎn)研究了長(zhǎng)航保存去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞的不同儲(chǔ)存期對(duì)游離血紅蛋白濃度和紅細(xì)胞溶血率的影響。此次海上航行共45 d，期間天氣狀況良好，海況3～5 級(jí)。在這種海洋氣候條件下的試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)：（1）隨著保存時(shí)間的增加，試驗(yàn)組和對(duì)照組組內(nèi)的游離血紅蛋白濃度逐漸增大，2 組濃度之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；（2）隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)，試驗(yàn)組和對(duì)照組組內(nèi)的紅細(xì)胞溶血率也逐漸增大，2 組溶血率之間的差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是均小于國(guó)標(biāo)《全血及成分血質(zhì)量要求》（GB 18469－2012）的0.8%，上述結(jié)果與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致［11-12］。從試驗(yàn)結(jié)果分析可知：2 組指標(biāo)的變化趨勢(shì)基本上是一致的，但試驗(yàn)組的變化幅度明顯大于對(duì)照組。出現(xiàn)上述結(jié)果，可能是由于艦艇在航行期間隨機(jī)搖擺，試驗(yàn)組血液長(zhǎng)期處于晃動(dòng)狀態(tài)，隨機(jī)晃動(dòng)和離散沖擊力容易導(dǎo)致紅細(xì)胞膜出現(xiàn)損傷，引起紅細(xì)胞變形和溶血，造成游離血紅蛋白濃度和溶血率增加。這一研究結(jié)果對(duì)于如何提高紅細(xì)胞的質(zhì)量，開(kāi)展海上血液運(yùn)輸與儲(chǔ)存具有重要的意義。如何減少血液的晃動(dòng)和離散沖擊力，使去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞的儲(chǔ)存期延長(zhǎng)，將是下一步研究和探討的內(nèi)容。