李麗琴，譚 鑫，楊彩麗，黃愛(ài)花，程 鵬，張 蓮，羅 宏

(1.長(zhǎng)沙市第一醫(yī)院a.皮膚科； b.兒科； c.檢驗(yàn)科，長(zhǎng)沙 410005； 2.南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院a.皮膚科； b.兒科，南昌 330006)

血管瘤是嬰幼兒最常見(jiàn)的良性腫瘤，一般在出生后1～2周發(fā)病，增生較快，前12個(gè)月為增生期[1]?？诜蛰谅鍫栔委煁胗變貉芰霭踩?、有效,不良反應(yīng)小，是治療血管瘤的一線(xiàn)藥物[2-3]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)為特異性生長(zhǎng)因子，主要作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，能夠刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖，還具有強(qiáng)烈的趨化和促分裂作用，可刺激腫瘤血管生長(zhǎng)，在增生期血管瘤血清中的表達(dá)明顯升高[4]。有研究[5-6]顯示，普萘洛爾可能通過(guò)下調(diào)增生期血管瘤瘤體中VEGF的表達(dá)促進(jìn)瘤體消退，然而，血管生成抑制因子(PEDF)的作用和影響卻較少被關(guān)注。本研究觀察增生期血管瘤患兒血清VEGF、PEDF水平的變化及與口服普萘洛爾療效的關(guān)系，并探討其療效機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 病例來(lái)源

選取2019年1月至2020年6月在長(zhǎng)沙市第一醫(yī)院及南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院皮膚科、兒科收治的增生期血管瘤患兒72例(增生組)，消退期血管瘤患兒60例作為消退組，同期行健康體檢的嬰幼兒40例為正常對(duì)照組。增生組，年齡1個(gè)月～1歲，年齡(3.19±1.48)個(gè)月；男36例，女36例；頭面部40例，頸部12例，軀干10例，四肢6例，外陰4例；消退組年齡1～3歲，平均(14.18±1.35)個(gè)月；男31例，女29例；正常對(duì)照組，年齡1個(gè)月～3歲，平均(3.58±1.51)個(gè)月；男22例，女18例。3組性別比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)長(zhǎng)沙市第一醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且患兒家長(zhǎng)知情同意并簽署知情同意書(shū)。

1.2 病例選擇標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：1)所有患兒均符合2016年國(guó)際血管異常研究協(xié)會(huì)(ISSVA)制定的血管瘤相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；2)診斷為血管瘤(草莓狀、海綿狀、混合型)，多發(fā)和(或)瘤體直徑超過(guò)2 cm，或者瘤體部位在眼、鼻、口腔、女?huà)肴榉?、外陰等部位，不適應(yīng)手術(shù)及激光等有損傷性治療的血管瘤患兒。

排除標(biāo)準(zhǔn)：患有心臟病變(傳導(dǎo)阻滯)、氣道敏感性疾病、通氣困難或其他肺部疾病(尤其有哮喘者)者。

1.3 治療方法

增生組給予普萘洛爾口服，起始劑量為0.5 mg·kg-1·d-1，分2次口服，服藥時(shí)心電監(jiān)護(hù)，無(wú)不良反應(yīng)時(shí)，年齡不足3個(gè)月患兒可選擇1.0 mg·kg-1·d-1劑量，大于3個(gè)月患兒可選擇1.5～2.0 mg·kg-1·d-1劑量，分2～3次口服，治療期間定期復(fù)查血清電解質(zhì)、血糖及肝腎功能，如有不良反應(yīng)則及時(shí)處理，必要時(shí)停用藥物。

1.4 標(biāo)本采集及檢測(cè)

增生期血管瘤組(治療前，治療后第4周、第8周、第12周)、正常對(duì)照組、消退期血管瘤組分別抽取空腹靜脈血3 mL，以3000 r·kg-1速度離心10 min，取上層血清置于-20 ℃冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融，實(shí)驗(yàn)試劑選擇人VEGF ELISA試劑盒(英國(guó)Abcam公司，產(chǎn)品編號(hào)：ab246535)和人PEDF ELISA試劑盒(英國(guó)Abcam公司，產(chǎn)品編號(hào)：ab222510)，以酶聯(lián)免疫吸附法(ELLSA)檢測(cè)血清VEGF、PEDF水平。

1.5 療效評(píng)價(jià)

參照國(guó)際常用4級(jí)分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ級(jí)(差)，瘤體縮小<25%；Ⅱ級(jí)(中)，瘤體縮小26%～50%；Ⅲ級(jí)(好)，瘤體體積縮小51%～75%；Ⅳ級(jí)(優(yōu))，瘤體縮小76%～100%[8]。有效率=(Ⅲ級(jí)+Ⅳ級(jí))例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 增生組療效

治療12周時(shí)，增生組治療總有效率為93.06%，見(jiàn)表1。

表1 增生組治療12周時(shí)的臨床療效 n(%)

2.2 3組患兒血清VEGF、PEDF水平比較

治療前，增生組血清VEGF水平高于正常對(duì)照組及消退期組(P<0.05)，血清PEDF水平低于正常對(duì)照組及消退期組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 3組患兒血清VEGF、PEDF水平比較

2.3 增生組治療前后血清VEGF、PEDF水平變化

增生組治療前、治療4周、治療8周、治療12周，血清VEGF水平依次降低(P<0.05)，血清PEDF水平依次升高(P<0.05)。治療12周時(shí)血清VEGF水平較治療前下降(296.64±72.91)pg·mL-1、血清PEDF上升(7.61±1.43)μg·mL-1。見(jiàn)表3。

表3 增生組治療前后血清VEGF、PEDF水平比較

2.4 增生組治療12周時(shí)血清VEGF下降水平、PEDF上升水平與療效的相關(guān)性分析

Spearman等級(jí)相關(guān)性分析結(jié)果顯示，增生組治療12周時(shí)血清VEGF下降水平與療效呈正相關(guān)(r=0.489，P<0.05)，血清PEDF上升水平與療效呈正相關(guān)(r=0.380，P<0.05)。

2.5 增生組治療12周時(shí)血清VEGF下降水平與PEDF上升水平的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，增生組患兒治療12周血清VEGF下降水平與PEDF上升水平呈正相關(guān)(r=0.369，P<0.05)。見(jiàn)圖1。

圖1 治療12周時(shí)增生組血清VEGF下降水平與PEDF上升水平的相關(guān)性分析

3 討論

血管瘤對(duì)患兒的美容及心理影響較大，尤其發(fā)生在重要解剖部位(如面部、乳房、關(guān)節(jié)、外陰等)的增生期血管瘤，甚至?xí)鸸δ苷系K，因此需要早期干預(yù)治療。本研究使用普萘洛爾治療72例增生期血管瘤患兒，治療總有效率為93.06%，療效顯著。

有研究[9-10]表明，VEGF的表達(dá)與血管瘤發(fā)病關(guān)系密切，增生期血管瘤患者血清及組織中VEGF表達(dá)均明顯升高。筆者的既往研究[6]也提示，口服普萘洛爾治療增生期血管瘤的機(jī)制可能是下調(diào)患者血清VEGF水平。PEDF為重要的抗腫瘤因子，可通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞凋亡、減少腫瘤細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移、抑制血管新生等多種機(jī)制抑制腫瘤生長(zhǎng)，還可通過(guò)水解血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-1的蛋白抑制血管增生，且在血管瘤發(fā)展過(guò)程中，PEDF水平升高可抑制VEGF表達(dá)[11-12]。本研究結(jié)果顯示，增生組患兒血清VEGF水平高于正常對(duì)照組、消退組，血清PEDF水平低于正常對(duì)照組、消退瘤組，提示VEGF、PEDF與血管瘤疾病進(jìn)展有關(guān)。增生組口服普萘洛爾治療前、治療4周、治療8周、治療12周血清VEGF逐漸降低，血清PEDF水平逐漸升高，提示，普萘洛爾治療血管瘤療效顯著，可能與血清VEGF水平下調(diào)、PEDF水平升高有關(guān),這與周昱川等[13]的研究結(jié)果一致。

本研究結(jié)果還顯示，增生組治療12周血清VEGF下降水平與療效呈正相關(guān)(r=0.489，P<0.05)，血清PEDF上升水平與療效呈正相關(guān)(r=0.380，P<0.05)；增生組治療前與治療12周時(shí)血清VEGF下降水平與PEDF上升水平呈正相關(guān)(r=0.369，P<0.05)。提示，血清VEGF下降水平和血清PEDF上升水平可能反映口服普萘洛爾治療增生期血管瘤患兒的療效，且血清VEGF下降的水平與PEDF水平上升的水平可能存在相關(guān)性。進(jìn)而推測(cè)，口服普萘洛爾可能通過(guò)上調(diào)患兒PEDF水平，降低患兒VEGF水平，抑制血管瘤瘤體生長(zhǎng)，促進(jìn)瘤體消退。

雖然本研究發(fā)現(xiàn)PEDF上調(diào)水平與療效等級(jí)具有正相關(guān)性，但仍需擴(kuò)大病例數(shù)同時(shí)從PEDF核酸水平進(jìn)行研究，觀察其他抑血管形成因子及促血管形成因子間的相互作用，從而對(duì)普萘洛爾治療增生期血管瘤的作用機(jī)制做更全面的評(píng)估。