王志剛

（河北省灤州市王店子鎮(zhèn)動物防疫站，河北灤州 063700）

由于我國對飼用抗生素進行了限用，因此，為了提高動物抗病及生長性能，需要開發(fā)新的替代品。益生菌對動物腸道健康具有調(diào)節(jié)作用，因此，在動物日糧中的應(yīng)用日益增加。芽孢桿菌屬是革蘭氏陽性芽孢菌，其耐熱、冷、酸，并可以促進腸道消化酶的分泌，此外，盡管芽孢桿菌不能在動物腸道中定植，但其對生產(chǎn)力有有益影響（張愛武和薛軍，2011）。已有研究報道了芽孢桿菌益生菌的作用，其中陳旭東等（2003）發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌可抑制豬腸道中梭狀芽孢桿菌和大腸桿菌的水平，提高豬的生長性能，而林顯華等（2013）在肉雞日糧中添加枯草芽孢桿菌也提高了肉雞的生長性能。符運勤等（2012）報道了枯草芽孢桿菌可促進荷斯坦后備牛的生長和瘤胃發(fā)育。在泌乳奶牛中添加納豆枯草芽孢桿菌提高了產(chǎn)奶量和瘤胃丙酸濃度，還提高了乳蛋白質(zhì)水平、總固體物和乳能量分泌（李吉楠等，2014）。有研究人員研究了枯草芽孢桿菌在奶牛上的效果，其會產(chǎn)生高熱量，占能量攝入的30%，但這種高熱量使動物容易受到熱應(yīng)激（Galan等，2018）。目前關(guān)于益生菌對干乳期奶牛生長、瘤胃及代謝相關(guān)的研究比較有限，因此，本研究評估了在全混合日糧中添加枯草芽孢桿菌對干乳期奶牛生長性能、瘤胃發(fā)酵及氮平衡的影響。

1 材料與方法

1.1 飼養(yǎng)管理與試驗動物分組 試驗將體重為（440.92±3.33）kg、平均干乳期為42 d的60頭荷斯坦奶牛隨機分為2組，每組5個重復(fù)，每個重復(fù)6頭。對照組飼喂玉米-豆粕型全混合日糧，處理組飼喂基礎(chǔ)全混合日糧+200mg/kg益生菌（枯草芽孢桿菌含量：1×106CFU/g）?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。在飼養(yǎng)試驗期間，每天在早上8點和下午2點各飼喂1次，期間為其提供礦鹽舔塊。記錄試驗結(jié)束后的體重及整個42 d的飼料用量。

表1 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2 樣品采集采用Keaokliang等（2018）報道的方法采集糞便和尿液樣品，同時收集飼料樣品，60℃下干燥72 h，用于化學分析。根據(jù)采食量計算氮的攝入量及養(yǎng)分攝入量，然后測定糞便和尿液氮含量后，用于計算養(yǎng)分消化及氮代謝相關(guān)指標。在試驗結(jié)束的最后1 d，早晨飼喂前4 h后，用帶有柔性胃導管的抽吸泵采集瘤胃液，瘤胃液樣品立即通過四層紗布過濾，用pH計測定pH。瘤胃液樣品存儲在-20℃，然后參考董瑞陽（2014）的方法進行揮發(fā)性脂肪酸和氨氮分析。在晨飼前從頸靜脈采血至肝素化管，分離血漿樣品。

1.3 血漿指標分析使用南京建成生物工程研究所的商品試劑盒測定血漿尿素氮和非酯化脂肪酸濃度。

1.4 統(tǒng)計分析試驗數(shù)據(jù)在Microsoft EXCEL 2020軟件中計算出各重復(fù)的平均值和標準誤差，之后將均值代入SPSS軟件單因素方差分析模型，P＜0.05表示組間差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 益生菌對干乳期奶牛生長性能和養(yǎng)分消化的影響由表2可知，全混合日糧添加益生菌對干乳期奶牛體重、采食量和料重比及營養(yǎng)物質(zhì)消化率（干物質(zhì)、有機物、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維）無顯著影響（P＞0.05），但益生菌組干乳期奶牛的平均日增重較對照組顯著提高10.69%（P＜0.05）。

表2 益生菌對干乳期奶牛生長性能和養(yǎng)分 消化的影響

2.2 益生菌對干乳期奶牛瘤胃發(fā)酵性能的影響由表3可知，全混合日糧中添加益生菌對瘤胃揮發(fā)性脂肪酸總量、乙酸、丙酸、戊酸和異戊酸濃度及乙酸與丙酸比值無顯著影響（P＞0.05）。益生菌組奶牛瘤胃pH、氨氮、丁酸和異丁酸濃度較對照組分別顯著提高1.71%、59.22%、13.61%和19.54%（P＜0.05）。

表3 益生菌對干乳期奶牛瘤胃發(fā)酵性能的影響

2.3 益生菌對干乳期奶牛氮平衡和血漿生化指標的影響由表4可知，對照組與益生菌組對干乳期奶牛的氮攝入量、糞氮排泄量及血漿尿素氮濃度的影響無顯著差異（P＞0.05）。與對照組相比，益生菌組干乳期奶牛的氮沉積量顯著提高48.46%（P＜0.05），而尿氮排泄量和血漿非酯化脂肪酸濃度分別顯著降低13.50%和44.44%（P＜0.05）。

表4 益生菌對干乳期奶牛氮平衡和血漿 生化指標的影響

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加枯草芽孢桿菌對干乳期奶牛的體重、采食量、飼料效率及養(yǎng)分消化率無顯著影響。Suzuki等（2014）報道，奶牛產(chǎn)奶量、采食量、飼料中的能量和纖維含量都可能影響產(chǎn)熱水平，在本試驗中，試驗組和對照組干乳期奶牛采食量無差異，可以推測其能量損失也無差異，這可能與試驗日糧營養(yǎng)水平基本一致有關(guān)。

Peng等（2012）報道，給泌乳奶牛飼喂枯草芽孢桿菌可提高瘤胃丙酸含量，進而導致牛奶產(chǎn)量增加，因為泌乳需要大量葡萄糖，丙酸是糖異生的重要底物。本研究中益生菌顯著提高了瘤胃pH、氨氮、丁酸和異丁酸濃度，但對丙酸濃度無顯著影響。Peng等（2012）的研究是在飼喂高精料和高能量日糧的奶牛中進行的。目前還沒有關(guān)于等營養(yǎng)水平下評估枯草芽孢桿菌對干乳期奶牛影響的報道。在本試驗中，飼喂枯草芽孢桿菌瘤胃丙酸水平?jīng)]有增加，在消化率和能源效率方面沒有改善。Qiao等（2010）研究表明，日糧添加枯草芽孢桿菌顯著提高了瘤胃氨氮濃度，這與本研究結(jié)果一致。

Hoover和Stokes（2001）報道，奶牛瘤胃微生物的最佳生長可能需要瘤胃有效蛋白質(zhì)濃度為14%～15%的日糧，這與本研究中飼料蛋白質(zhì)水平相似。此外，飼喂枯草芽孢桿菌日糧組的干乳期奶牛血漿非酯化脂肪酸濃度顯著低于對照組，這與Peng等（2012）的結(jié)果一致。尿氮排泄量在枯草芽孢桿菌組顯著降低，這也與該組氮沉積升高的結(jié)果一致。Rabelo等（2001）研究發(fā)現(xiàn)，增加干乳期奶牛日糧中非纖維碳水化合物水平會增加瘤胃丙酸水平，增加胰島素分泌，降低血漿非酯化脂肪酸濃度，在本研究中，瘤胃異丁酸和丁酸濃度升高，可以間接說明胰島素水平升高，進而抑制脂肪降解來降低非酯化脂肪酸濃度。

4 結(jié)論

全混合日糧中添加益生菌對干乳期奶牛養(yǎng)分消化、體重和飼料效率無改善作用，但提高了日增重、瘤胃丁酸、異丁酸濃度和氮沉積，降低了尿氮排泄量。