刁體偉，陳曉姣，賴曉琴，魏 鑫，冷銀江，馬 懿

（四川輕化工大學(xué)生物工程學(xué)院，四川宜賓 644000）

殼聚糖（Chitosan，CS）由甲殼素（Chitin）經(jīng)脫乙酰作用而制得，又稱為聚葡萄糖胺（1-4）-2-氨基-β-D葡萄糖[1]。因其具有良好的生物相容性、可降解性和無(wú)毒等特征，被廣泛應(yīng)用于果蔬加工與保鮮領(lǐng)域，以提高食品質(zhì)量、保質(zhì)期和安全性[2]。美國(guó)食品藥品管理局（Food and Drug Administration, FDA）證實(shí)殼聚糖具有廣泛安全性（Generally Recognized as Safe,GRAS），允許在果酒釀造中使用（OIV-OENO 336A-2009）。殼聚糖可在釀造中發(fā)揮防腐、抗氧化和澄清等重要作用，因而受到果酒研究者的廣泛關(guān)注[3]。2010年歐盟也同意其應(yīng)用于果酒，發(fā)揮去除銅和鐵等金屬離子的作用[4]。研究者發(fā)現(xiàn)殼聚糖可與許多配體發(fā)生反應(yīng)，其羧基化反應(yīng)、?；磻?yīng)、季銨化反應(yīng)、醚化反應(yīng)、接枝共聚反應(yīng)等產(chǎn)物將進(jìn)一步增強(qiáng)其潛在應(yīng)用價(jià)值，殼聚糖的改性是提高其活性的重要方法[5]。目前殼聚糖在果酒中的主要功能有四大類（圖1）：a.能螯合果酒中的部分金屬離子，并去除多酚氧化酶和農(nóng)藥，起到澄清作用；b.作用微生物后使細(xì)胞膜通透性改變，細(xì)胞破碎，重要物質(zhì)泄露導(dǎo)致細(xì)胞死亡，達(dá)到滅菌抑菌的效果；c.與自由基形成穩(wěn)定化合物，清除自由基，使果酒具有良好抗氧化性；d.由其制作而成的保鮮復(fù)合膜能防腐保鮮，保證口感（可用于陳釀期或開瓶后）。因此，將殼聚糖及其衍生物作為抗氧化劑、抑菌劑、澄清劑等應(yīng)用于果酒釀造，可實(shí)現(xiàn)增香調(diào)色、提高果酒品質(zhì)安全的目的，同時(shí)對(duì)降低或取代SO2的使用起到積極作用[6]。

圖1 殼聚糖在釀酒中的主要應(yīng)用Fig.1 Main applications of chitosan in wine making

然而，殼聚糖及其衍生物的實(shí)際使用范圍及作用機(jī)理還未完全闡明，其作用效果有待進(jìn)一步提高。為全面深入總結(jié)殼聚糖及其衍生物的作用機(jī)理及其在果酒中的潛在應(yīng)用價(jià)值，本文對(duì)殼聚糖及其衍生物在果酒中應(yīng)用研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為殼聚糖在果酒釀造中的進(jìn)一步應(yīng)用，提高果酒品質(zhì)安全提供參考依據(jù)與思路。

1 殼聚糖及其衍生物抗氧化活性與影響因素

目前研究提出的殼聚糖及其衍生物抗氧化途徑主要有三種，包括阻斷自由基鏈反應(yīng)、金屬離子螯合作用以及減少乙醛的產(chǎn)生。殼聚糖及其衍生物中含有大量高活性氨基、乙?；⒘u基，可通過(guò)阻斷自由基鏈反應(yīng)來(lái)抑制酒體氧化損傷，一是可提供氫原子（H·）形成穩(wěn)定的DPPH-H和大分子化合物，因而具有較強(qiáng)的抗氧化性；二是抑制葡萄酒中乙醇氧化產(chǎn)物1-羥乙基自由基的形成，促進(jìn)葡萄酒中的酚類物質(zhì)形成聚合色素，增強(qiáng)葡萄酒顏色的穩(wěn)定性，葡萄酒抗氧化活性會(huì)隨著聚合度的增加而提高[7]。由于對(duì)果酒中金屬離子（Fe3+、Pb2+）的螯合作用形成鐵-酒石酸-殼聚糖絡(luò)合物后抑制果酒的氧化反應(yīng)，去除果酒中的多酚氧化酶，從而能減少或者緩解多酚物質(zhì)被氧化。果酒中乙醛和乙醛酸是引起葡萄酒氧化腐敗的關(guān)鍵活性醛，而殼聚糖能有效減少兩者的生成從而減少果酒的褐變。此外，殼聚糖還能提高釀酒原材料的抗氧化性，在作用果實(shí)樹藤后，能增加葡萄、草莓、無(wú)花果在生長(zhǎng)過(guò)程中所含芳香化合物的含量，強(qiáng)化水果的抗氧化性[8]。

1.1 殼聚糖抗氧化性

殼聚糖在果酒釀造中的抗氧化活性貫穿整個(gè)釀造過(guò)程（表1），并且其綠色、無(wú)毒性使得生產(chǎn)低硫高質(zhì)果酒具有一定的可行性。在果酒生產(chǎn)中將殼聚糖替代SO2作為抗氧化劑的使用不僅在口感上無(wú)差異，而且安全性更占上風(fēng)。但是因殼聚糖來(lái)源于甲殼素不易并且溶解度不高，將殼聚糖作為抗氧化劑添加必定會(huì)增加釀造成本，因而提高產(chǎn)量、降低成本與溶解度是目前研究者需要解決的問(wèn)題。

表1 殼聚糖在果酒釀造中的抗氧化效果Table 1 Antioxidant effect of chitosan in fruit wine brewing

1.2 殼聚糖衍生物抗氧化性

殼聚糖因分子結(jié)構(gòu)聚合度高而不溶于水，因而需要通過(guò)改性成為衍生物來(lái)解決溶解度問(wèn)題。破壞分子鏈的整體完整性并從側(cè)鏈引入親水基團(tuán)能使得部分殼聚糖衍生物比原殼聚糖和其他抗氧化劑具有更優(yōu)的抗氧化活性和溶解度，Zhao等[14]制備了N-呋喃酰殼聚糖（N-Furanyl Chitosan，NF-CS）和 N-呋喃酰殼寡糖（N-Furanyl Chitosan Oligosaccharide，NF-COS）并研究他們體外抗氧化活性，結(jié)果顯示兩種殼聚糖衍生物比殼聚糖具有更高的抗氧化活性，在 50%（IC50）條件下，NF-CS和 NF-COS對(duì) DPPH的清除作用分別為1.3和0.76 mg/mL，并且清除率與殼聚糖濃度和劑量密切相關(guān)。朱廣楠[15]探究不同分子量殼聚糖尿素衍生物對(duì)于超氧陰離子、羥基自由基和DPPH自由基的清除效果，結(jié)果表明殼聚糖尿素衍生物都具有比VC和原殼聚糖更好的抗氧化活性，高分子和低分子量殼聚糖對(duì)于羥基（·OH）和DPPH的清除效果有所差異，主要原因是由于衍生物溶解度和活性基團(tuán)數(shù)量不同所導(dǎo)致。將酚類化合物通過(guò)接枝和偶聯(lián)反應(yīng)與殼聚糖結(jié)合，從而提高抗氧化性是目前常見(jiàn)的改性方法[16]。Xie等[17]以殼聚糖（CS）為原料在水溶液中成功接枝沒(méi)食子酸（Gallic acid，GA），并研究其抗氧化活性，高接枝率共聚物（GA-g-CS）兼有CS和GA的強(qiáng)抗氧化活性、可調(diào)流變性能等優(yōu)點(diǎn)，并且抗氧化活性和溶解性都高于普通CS和GA。Eom等[18]把8種酚酸與不同的共軛低聚糖采用酰胺偶聯(lián)反應(yīng)制備酚酸偶聯(lián)殼寡糖；制備殼寡糖均有抗氧化性，其中咖啡酸-c-COS自由基清除能力最好。然而在果酒釀造中，對(duì)殼聚糖衍生物抗氧化功能的研究較為空缺，這跟其活性易變難控以及果酒成分復(fù)雜有很大關(guān)系，部分衍生物羥基數(shù)量和劑量的增加雖然會(huì)讓其性能增強(qiáng)，但也體現(xiàn)出不同衍生物之間性能差異性較大。分子質(zhì)量和脫乙酰度的不同導(dǎo)致衍生物化學(xué)性能難以穩(wěn)定和統(tǒng)一是改性殼聚糖應(yīng)用于果酒產(chǎn)品的難題之一。

1.3 分子質(zhì)量對(duì)抗氧化性的影響

目前研究表明低分子質(zhì)量殼聚糖（分子量低于50 kDa）及其衍生物的氨基和羥基基團(tuán)活性較高，對(duì)自由基的清除作用更強(qiáng)，抗氧化能力越高[19]。其原因可能是低分子質(zhì)量會(huì)提高其溶解度從而促進(jìn)活性基團(tuán)與自由基的反應(yīng)。此外，高分子質(zhì)量的殼聚糖及其衍生物分子內(nèi)氫鍵結(jié)合更為緊密，導(dǎo)致活性基團(tuán)與果酒中自由基接觸面積降低；小分子質(zhì)量結(jié)構(gòu)更為疏散，因而在果酒中呈現(xiàn)更優(yōu)的抗氧化性。郝振銘等[20]測(cè)評(píng)了小分子物殼寡糖在葡萄酒樣中的抗氧化性和對(duì)葡萄酒風(fēng)味的影響，結(jié)果顯示添加了殼寡糖后對(duì)DPPH清除效果增加了3.96%，對(duì)羥自由基的清除率增加了4.48%，葡萄酒的風(fēng)味口感沒(méi)有發(fā)生明顯變化。Chinnici等[12]首次在葡萄酒的模型環(huán)境中，研究低分子量殼聚糖對(duì)兒茶素氧化以及對(duì)硫醇氧化降解的保護(hù)作用，結(jié)果表明殼聚糖聚電解質(zhì)行為降低了硫醇的氧化，能很好保持葡萄酒芳香，是一種潛在替代亞硫酸鹽釀酒的添加劑。

1.4 脫乙酰度對(duì)抗氧化性的影響

在一定范圍內(nèi)，殼聚糖及其衍生物作用在葡萄酒中時(shí)還原效率會(huì)隨著用量和脫乙酰度的增加而增強(qiáng)，這表明高脫乙酰度的殼聚糖及衍生物抗氧化活性更好，其原因是由于脫乙酰度增加使得活性基團(tuán)氨基和羥基數(shù)量變多且活性增強(qiáng)，從而更易更快形成穩(wěn)定的殼聚糖-NH3+大分子化合物。Marin等[13]通過(guò)電子順磁共振研究了70%～85%脫乙酰度殼聚糖對(duì)葡萄酒氧化降解影響，結(jié)果顯示高脫乙酰度殼聚糖擁有高密度高活性的羥基和氨基，有顯著的金屬螯合能力，能直接清除氧化物，表現(xiàn)出較好的抗氧化能力。此外，對(duì)兩種不同乙酰化的N-乙?；鶜ぞ厶牵∟Acetyl chitosan, NA-CS）和 N，N-二乙?；∟, NDiacetyl Group chitosan, NNDG-CS）殼聚糖清除羥基自由基和超氧自由基的活性進(jìn)行探究，NNDGCS和NA-CS清除羥基自由基的IC50值分別為1.43和1.93 mg/mL，NNDG-CS因乙?；潭雀叨寡趸芰υ酵怀鯷21]。

目前在果酒研究中把殼聚糖及其衍生物單獨(dú)作為抗氧化劑使用鮮有報(bào)道。主要原因有：在果酒中含有大量酚類和其他易氧化物質(zhì)，殼聚糖加入后所引起反應(yīng)順序錯(cuò)綜復(fù)雜；殼聚糖及其衍生物因制備難度較大，而其抗氧化活性會(huì)受到溶解度、去乙酰度、分子質(zhì)量、聚合度和反應(yīng)條件（溫度、pH）等因素的影響而具有不穩(wěn)定性，并且同一種衍生物對(duì)不同自由基清除效果也具有差異性；加入后須保證最終果酒口感和風(fēng)味不變，難度較大，缺乏專屬于釀酒的殼聚糖衍生物抗氧化劑。

2 殼聚糖及其衍生物抑菌活性與影響因素

殼聚糖及其衍生物作為一種陽(yáng)離子抗菌劑，能吸附帶負(fù)電的細(xì)菌并與細(xì)菌表面酸性聚合物反應(yīng)形成殼聚糖聚電解質(zhì)復(fù)合物阻礙營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸，改變微生物細(xì)胞膜通透性，破壞壁膜結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致重要物質(zhì)被泄露出細(xì)胞外，因而具有良好的抑菌活性[22]。此外，殼聚糖及其衍生物因具有金屬離子螯合作用，可將微生物必需微量元素進(jìn)行螯合吸附，從而抑制雜菌的正常生長(zhǎng)。研究顯示多數(shù)殼聚糖及其衍生物對(duì)枯草桿菌、芽孢桿菌、金黃色葡萄球、布魯氏酵母菌等常見(jiàn)果酒致腐菌均有較好的抑制效果[23]。酒精發(fā)酵階段，釀酒酵母對(duì)殼聚糖的抑菌作用表現(xiàn)出一定的耐受性，酵母活性與發(fā)酵性能并未受到顯著影響；在蘋果酸-乳酸發(fā)酵中，因乳酸菌（酒酒球菌）生長(zhǎng)會(huì)被殼聚糖抑制從而會(huì)影響果酒二次發(fā)酵效果，此抑菌性能與SO2較為相似[24]。此外，殼聚糖及其衍生物抑菌活性同樣受到分子量、脫乙酰度、溶解度等因素的影響[25]。

2.1 殼聚糖抑菌性

在果酒抑菌實(shí)驗(yàn)中，郝振銘等[20]把殼寡糖作為抑菌劑替代SO2加入到葡萄酒中，發(fā)現(xiàn)500 mg/L的殼寡糖對(duì)葡萄酒中腐敗菌都具有很好的抑制效果，其抑菌效果優(yōu)于膠體銀和SO2（50 mg/L）。此外，由殼聚糖和梔子中梔子苷的苷元衍生物（Genipin）制備的復(fù)合保鮮薄CS-Genipin可以用于葡萄酒的保鮮防腐，薄膜具有良好的抗自由基活性和機(jī)械性能，葡萄酒不會(huì)造成過(guò)敏反應(yīng)，在葡萄酒儲(chǔ)存一年期間并未發(fā)現(xiàn)有新增細(xì)菌的出現(xiàn)，能保證葡萄酒的感官質(zhì)量[11]。因此殼聚糖在果酒釀造中可作為抑菌劑使用（表2），但對(duì)不同腐敗菌的抑制效果會(huì)具有差異性，殼聚糖抑菌時(shí)酒體環(huán)境對(duì)其用量和作用是不可忽略的因素。

表2 殼聚糖在果酒釀造中的抑菌效果Table 2 Antibacterial effect of chitosan in fruit wine brewing

2.2 殼聚糖衍生物抑菌性

殼聚糖衍生物因其溶解度和生物活性明顯高于殼聚糖而使得抑菌范圍更為廣泛，部分衍生物還具有雙抑菌功能團(tuán)和大量的正電荷，可以有效地預(yù)防和抑制果酒的微生物，避免因微生物的二次污染和繁殖造成果酒出現(xiàn)異雜味。此外，殼聚糖衍生物在果酒中的抑菌效果突出，主要是因?yàn)樵谒嵝原h(huán)境下溶解度更高并具有較多的質(zhì)子化氨基，因而可考慮在果酒發(fā)酵期間不影響釀酒酵母生長(zhǎng)的情況下降低pH，使得其具有更好的抑菌性能。

于沛沛等[31]通過(guò)酯化反應(yīng)合成苯甲酸殼聚糖酯并研究其對(duì)酵母和黑曲霉菌的抑制效果，結(jié)果顯示在酸性條件下苯甲酸殼聚糖酯有很好的抑菌作用，抑菌活性遠(yuǎn)高于殼聚糖。Papineau等[32]探究了殼聚糖乳酸鹽和殼聚糖水谷氨酸鹽兩者對(duì)金黃色葡萄球菌和釀酒酵母的滅活作用，結(jié)果顯示兩者的抑菌活性較為明顯，低濃度殼聚糖乳酸鹽能使釀酒酵母直接失去活性，殼聚糖谷氨酸鹽也能抑制酵母菌的繁衍。N-膦基殼聚糖[33]和O-胺功能化殼聚糖[34]兩者具有比殼聚糖更好的抑菌活性，能較好抑制金黃色葡萄球菌和蠟樣芽孢桿菌生長(zhǎng)，是一種新型高分子抑菌劑。殼聚糖衍生物對(duì)不同生長(zhǎng)階段和變異的菌種的抑菌效果有著差異性，但季銨鹽衍生物、羧甲基殼聚糖和?；瘹ぞ厶强咕钚愿鼮橥怀鯷23]。原因可能是季銨化、羧甲基化和酰化能增加衍生物的水溶性或形成更多抑菌功能團(tuán)。

2.3 分子量和脫乙酰度對(duì)抑菌活性的影響

殼聚糖及其衍生物抑菌活性不僅與果酒中微生物種類相關(guān)，還會(huì)因分子量、脫乙酰度不同而出現(xiàn)差異性，低乙酰度和低分子量的殼聚糖抑菌活性總體相對(duì)較好[35]?？赡苁且?yàn)闅ぞ厶羌捌溲苌锟梢宰鳛榛蜉d體，而低分子量的殼聚糖更易穿過(guò)細(xì)胞壁進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，與DNA結(jié)合從而阻止轉(zhuǎn)錄過(guò)程的發(fā)生。Simel等[24]探究了不同基質(zhì)下脫乙酰75%～85%低分子量殼聚糖對(duì)七種葡萄酒相關(guān)微生物的抑菌效果，結(jié)果顯示，在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基上或葡萄酒中，殼聚糖對(duì)腐壞菌（Brettanomyces bruxellensis、Hanseniaspora uvarum、Zygosaccharomyces bailii）都具有抑制作用，但在葡萄酒環(huán)境中由于殼聚糖會(huì)與其他成分發(fā)生復(fù)雜反應(yīng)而導(dǎo)致抑制效果會(huì)減弱。Taillandier等[36]同樣也發(fā)現(xiàn)在釀酒條件下，殼聚糖能破壞B.bruxellensis細(xì)胞膜使ATP外泄，導(dǎo)致菌種數(shù)量和生物活性都下降。在釀造中殼聚糖相比部分抑菌劑優(yōu)勢(shì)突出，Vitalini等[37]比較分子量76 kDa殼聚糖和抑菌劑苯并噻唑?qū)ζ咸丫品枷愣群透泄俚挠绊懀Y(jié)果顯示，殼聚糖葡萄酒的抑菌活性較好，總體接受度更高（酯醇提高），能更好的降低葡萄酒的酸度和危害，具備良好的香味持久性和化學(xué)性。

3 殼聚糖及其衍生物澄清作用

殼聚糖及其衍生物作為綠色陽(yáng)離子澄清劑，其良好的絮凝性能吸附果酒中的膠體微粒（蛋白質(zhì)、果膠、單寧）并選擇性螯合部分金屬離子（Fe3+、Pb2+），降低微生物代謝毒素并保證果酒安全，有效提高果酒的澄清度并提升果酒口感[38]。除了殼聚糖自身物理性質(zhì)外，其澄清效果突出還依賴于可以與果酒中的微粒發(fā)生靜電作用、分解作用和沉降作用。表3對(duì)比了殼聚糖、果膠酶、明膠、硅藻土等多種澄清劑在果酒釀造中的澄清效果，通過(guò)透光率及感官評(píng)價(jià)進(jìn)行綜合比較，得出殼聚糖澄清效果較為突出。此外，含有殼聚糖的復(fù)合澄清劑對(duì)果酒澄清效果更佳，澄清效果遠(yuǎn)高于單一殼聚糖，復(fù)合澄清劑殼聚糖-聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinyl Pyrrolidone，PVPP）在甘蔗果酒中澄清效果比硅藻土-PVPP的澄清效果要好，透光率最高可達(dá)到89.77%，澄清后總多酚含量明顯降低，果酒的風(fēng)味和主成分無(wú)明顯變化[39]。

表3 殼聚糖在多種果酒中澄清效果Table 3 Clarification effect of chitosan in fruit wine

與物理澄清法比較，殼聚糖的使用具有一定的優(yōu)勢(shì)，體現(xiàn)在能較好的保持果香和酒質(zhì)。唐玲[47]在研究無(wú)花果果酒發(fā)酵中，比較靜置、冷凍、離心和添加殼聚糖等方法對(duì)無(wú)花果果酒的澄清效果，結(jié)果顯示添加殼聚糖組澄清效果最好，透光率能達(dá)到93.77%，多糖、黃酮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)得到較好保留。在草莓果酒研究中，李亞輝等[45]同樣比較了冷凍、過(guò)濾、添加澄清劑對(duì)果酒的澄清效果，當(dāng)殼聚糖濃度低于200 mg/L具有較好的澄清效果，澄清度最高能達(dá)到95.5%，但對(duì)草莓果酒色度影響較大。此外，殼聚糖作為澄清劑具有混凝和絮凝性能，Venkatachalapathy等[48]研究了殼聚糖對(duì)葡萄汁中農(nóng)藥的去除效率，結(jié)果顯示殼聚糖（0.05%）能夠去除葡萄汁中86%～96%的農(nóng)藥，是一種有效的農(nóng)藥清除劑。殼聚糖衍生物同樣具有澄清作用，在黑莓果酒研究中，殼聚糖季銨鹽（0.3 g/L）與皂土（0.1 g/L）組成的復(fù)合澄清劑澄清效果最佳，澄清后對(duì)果酒總糖、乙醇無(wú)明顯影響[49]。

綜上所述，殼聚糖在多數(shù)酒體中的澄清效果都優(yōu)于明膠、皂土、果膠酶等澄清劑，并且在不同酒體中澄清效果穩(wěn)定，是一種簡(jiǎn)便、易操作的理想澄清劑。未來(lái)果酒研究趨向于純果汁或濃縮果汁發(fā)酵，在澄清方面難度增大，可考慮使用復(fù)合澄清劑或與物理澄清法聯(lián)用，以致于優(yōu)化澄清效果并加快澄清時(shí)間，縮短果酒釀造周期。

4 總結(jié)與展望

殼聚糖及其衍生物具有良好的抗氧化性、抑菌性和澄清功能，是一種無(wú)毒無(wú)害的綠色添加劑。目前我國(guó)對(duì)殼聚糖的使用僅作為澄清劑被應(yīng)用于果酒（汁）中（GB2760），國(guó)際葡萄與葡萄酒組織已經(jīng)開始將其作為抑菌防腐劑添加使用，對(duì)殼聚糖的抗氧化性應(yīng)用探究目前還基于模型葡萄酒中（表1），但其作用效果是顯著可見(jiàn)的。總體而言，在果酒中低分子量、高脫乙酰度的殼聚糖及衍生物抗氧化性能更佳，部分低分子質(zhì)量、低脫乙酰度的抑菌活性效果較好；作為澄清劑使用時(shí)澄清效果較為穩(wěn)定，受分子質(zhì)量和脫乙酰度的影響不大?；诖?，在果酒領(lǐng)域應(yīng)用研究時(shí)可考慮殼聚糖及衍生物單一功能或兼顧多個(gè)性能，通過(guò)調(diào)節(jié)脫乙酰度來(lái)進(jìn)行設(shè)計(jì)研究，可趨向于低分子量、中等脫乙酰度且水溶性好的衍生物來(lái)替代或者減少SO2在果酒中的使用。相比于二氧化硫的加入，殼聚糖及其衍生物還可作為膳食補(bǔ)充品或抗生素替代品，能增加酒體的附加風(fēng)味或功能。

此外，除了與其他添加劑復(fù)配或者增大用量可強(qiáng)化性能外，也可將殼聚糖及其衍生物的改性與配體反應(yīng)范圍擴(kuò)大，如殼聚糖與葡萄糖兩者美拉德反應(yīng)的衍生物就保留了殼聚糖自身的抑菌性[50]。盡管殼聚糖及其衍生物具有多樣化的應(yīng)用特點(diǎn)，從實(shí)驗(yàn)室研究層面應(yīng)用到果酒工業(yè)中或想完全替代SO2仍舊存在許多問(wèn)題。主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：a.脫乙酰度和平均分子量等因素較為難控，殼聚糖改性和衍生化的不易；b.殼聚糖衍生物的最優(yōu)性能單一，需配合其他添加劑才能提高其功能性從而保證果酒的口感，缺乏高活性多功能專屬釀酒殼聚糖衍生物；c.釀造果酒種類和工藝多樣繁瑣，發(fā)酵、陳釀期間可能會(huì)與其他物質(zhì)發(fā)生交叉連鎖反應(yīng)從而影響殼聚糖作用效果，并且添加的時(shí)間位點(diǎn)也是不可忽視的因素。