劉姍姍，陶璐，馬曉艷

（平頂山市第一人民醫(yī)院 病理科，河南 平頂山 467000）

胃癌是常見消化系統(tǒng)惡性腫瘤，因其發(fā)病早期癥狀較隱匿，多數(shù)患者確診時已處于Ⅲ期或Ⅳ期階段，累及神經(jīng)、脈管等組織，嚴重者可發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，具有發(fā)病率高、病死率高等特點，嚴重威脅患者生存質(zhì)量。相關(guān)研究顯示，胃癌患者5 a生存率＜20%，這與其發(fā)病高侵襲率、高轉(zhuǎn)移率等生物學(xué)特點相關(guān)，因此，早期診斷胃癌患者病情程度，對改善預(yù)后、提高患者生存率具有重要意義［1］。近年，胃癌相關(guān)蛋白表達作為臨床檢驗指標，為胃癌病情評估、診治提供了一定有效參考信息。白細胞分化抗原151（cluster of differentiation 151，CD151）屬四跨膜蛋白，在腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移過程中具有重要作用，現(xiàn)階段主要應(yīng)用于結(jié)腸癌、前列腺癌、胰腺癌、肺癌、腎透明細胞癌等病情評估。細胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶1（extracellular signal－regulated kinase 1，ERK1）是絲裂原活化蛋白激酶（mitogen－activated protein kinases，MAPK）信號通路中的關(guān)鍵因子，參與腫瘤轉(zhuǎn)移，調(diào)控腫瘤細胞增殖。本研究選取于平頂山市第一人民醫(yī)院進行手術(shù)切除治療的96例胃癌患者，旨在研究CD151、ERK1蛋白表達與疾病病理學(xué)參數(shù)的關(guān)聯(lián)性?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年3月至2020年11月于平頂山市第一人民醫(yī)院進行手術(shù)切除治療的96例胃癌患者，其中男57例，女39例，年齡36～75（55.24±9.18）歲，腫瘤直徑2～10（5.83±1.62）cm。浸潤深度：9例（9.38%）T1，12例（12.50%）T2，26例（27.08%）T3，49例（51.04%）T4。分 化 程 度：低 分 化 32 例（33.33%），中分化46例（47.92%），高分化18例（18.75%）。TNM 分期：Ⅰ期20例（20.83%），Ⅱ期22例（22.92%），Ⅲ期35例（36.46%），Ⅳ期19例（19.79%）。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：52例發(fā)生（54.17%），44例未發(fā)生（45.83%）。復(fù)發(fā)情況：34例復(fù)發(fā)（35.42%），62例未復(fù)發(fā)（64.58%）。本研究經(jīng)平頂山市第一人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過。

1.2 納入及排除標準 納入標準：（1）經(jīng)臨床診斷、病理證實確診為胃癌；（2）為原發(fā)性胃癌；（3）無放化療史；（4）近3個月未接受激素類藥物等相關(guān)治療；（5）患者及家屬簽署知情同意書。排除標準：（1）除胃癌外存在其他惡性腫瘤；（2）存在自身免疫性疾??；（3）發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移；（4）伴有糖尿病、甲狀腺疾?。唬?）存在肝、腎等嚴重功能障礙；（6）存在感染性疾病、血液系統(tǒng)疾病；（7）伴有呼吸或心力衰竭；（8）伴有認知、精神障礙。

1.3 檢測與評估

1.3.1 ERK1、CD151蛋白檢測 檢測胃癌組織、癌旁組織ERK1、CD151蛋白表達，分別采集腫瘤原發(fā)灶及腫瘤邊緣組織標本，以免疫組化法測定。將所采集標本立刻置入體積分數(shù)為4%的甲醛水溶液，固定12～24 h，采用石蠟包埋法，進行厚度為3～4μm連續(xù)切片，將切片去離子化（二甲苯），采用乙二胺四乙酸修復(fù)并打孔劑洗滌，采用過氧化氫（3%）進行10 min室溫孵育，采用磷酸鹽緩沖液洗滌，加一抗，以4℃溫度孵育過夜，再次洗滌，加二抗，以37℃溫度孵育0.5 h，之后進行顯色（二氨基聯(lián)苯胺），再次沖洗后復(fù)染（蘇木精），洗片（洗潔精），脫水（梯度乙醇），封固（中性樹膠）。二氨基聯(lián)苯胺酶底物顯色試劑盒、抗原修復(fù)液、磷酸鹽緩沖液、二基聯(lián)苯胺、SP免疫組化染色試劑盒均購自大連寶生物公司；ERK1、CD151抗體購自英國Abcam公司。

1.3.2 ERK1、CD151蛋白表達評估標準 以雙盲法判斷染色結(jié)果評價ERK1、CD151蛋白陽性表達，根據(jù)陽性細胞比例判定陽性表達，陽性細胞所占比例根據(jù)平滑肌細胞、陽性細胞數(shù)總數(shù)進行計數(shù)計算；ERK1、CD151蛋白陰性評估標準為不染色或陽性細胞比例≤5%；ERK1、CD151蛋白陽性評估標準為陽性細胞比例＞5%。

1.4 觀察指標 （1）對比ERK1、CD151蛋白在胃癌組織、癌旁組織的陽性表達率。（2）對比ERK1、CD151蛋白在TNM分期、分化程度、神經(jīng)侵犯、脈管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理學(xué)參數(shù)中的表達陽性率。（3）采用Spearman分析ERK1、CD151蛋白表達與胃癌患者TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、低分化程度、有神經(jīng)侵犯、有脈管侵犯、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等相關(guān)病理學(xué)參數(shù)的關(guān)聯(lián)性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析。計數(shù)資料以頻數(shù)和率（%）表示，采用χ2檢驗，應(yīng)用Spearman相關(guān)分析ERK1、CD151蛋白表達與胃癌患者相關(guān)病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ERK 1、CD151蛋白在胃癌組織、癌旁組織陽性表達率對比 ERK1、CD151蛋白在胃癌組織陽性表達率高于癌旁組織（P＜0.05）。見表1。

表1 ERK1、CD151蛋白在胃癌組織、癌旁組織陽性表達率對比［n（%）］

2.2 ERK 1、CD151蛋白在胃癌不同臨床病理學(xué)參數(shù)中表達陽性率對比 脈管侵犯、TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、神經(jīng)侵犯等因素與胃癌患者ERK1、CD151蛋白表達陽性率相關(guān)（P＜0.05）；年齡、性別、腫瘤直徑、T分期與胃癌患者ERK1、CD151蛋白表達陽性率無明顯相關(guān)性（P＞0.05）。見表2。

表2 ERK1、CD151蛋白在胃癌不同臨床病理學(xué)參數(shù)中表達陽性率對比［n（%）］

2.3 ERK1、CD151蛋白表達與胃癌患者相關(guān)病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系 Spearman相關(guān)性分析，ERK1、CD151蛋白表達陽性與胃癌患者有TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、低分化程度、神經(jīng)侵犯、有脈管侵犯、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)（P＜0.05）。見表3。

表3 ERK1、CD151蛋白表達與胃癌患者相關(guān)病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系

3 討論

胃癌為常見消化道癌癥，臨床研究顯示，其發(fā)生、進展過程復(fù)雜漸進，具有多階段、多步驟、多因子、多途徑等特點［2］。此外，胃癌發(fā)生浸潤、轉(zhuǎn)移過程中一般包括細胞間黏附性改變、細胞外基質(zhì)降解、形成新生血管、腫瘤細胞遷移等組織結(jié)構(gòu)變化，嚴重影響患者生命健康［3］。因此，早期診斷胃癌患者意義重大，近年ERK1、CD151的發(fā)現(xiàn)為胃癌診斷提供了新思路。CD151已在腎癌、乳腺癌、膽管癌及肝癌等惡性腫瘤病情診斷及預(yù)后評估中廣泛應(yīng)用，但關(guān)于胃癌患者CD151水平的相關(guān)研究較少，值得臨床關(guān)注［4］。

血管內(nèi)皮細胞增殖是腫瘤血管形成最基本環(huán)節(jié)，此外，內(nèi)皮細胞遷移、蛋白溶解酶釋放改變、重建受損細胞外基質(zhì)亦為腫瘤血管形成的重要組成部分［5］。生長因子受體等細胞膜分子在血管形成過程中可介導(dǎo)傳遞促腫瘤血管生長信號［6］。ERK1是MAPK信號通路主要途徑，有研究顯示ERK1途經(jīng)異常與胃癌發(fā)生進展密切相關(guān)［7］。MAPK屬絲氨酸／蘇氨酸蛋白激酶，MAPK活化后可參與細胞生長、增殖等過程，由細胞質(zhì)進入核內(nèi)激活靶基因，將調(diào)節(jié)信號傳遞至細胞核，在胃癌腫瘤細胞浸潤、轉(zhuǎn)移等方面具有重要作用［8］。生長因子等外界刺激可激活ERK1有絲分裂原，使其磷酸化，調(diào)節(jié)細胞周期，參與多種癌細胞相關(guān)基因表達、轉(zhuǎn)錄，促使腫瘤血管生成，損傷細胞外基質(zhì)；同時ERK1對腫瘤細胞轉(zhuǎn)移具有促進作用，可促使胃癌浸潤加重及腫瘤血管產(chǎn)生，加劇胃癌患者病情進展［9］。本研究結(jié)果顯示，ERK1蛋白在胃癌組織陽性表達率高于癌旁組織，可見ERK1表達過度與胃癌病情進展聯(lián)系密切。原因可能在于，ERK1在基質(zhì)與細胞、細胞與細胞間的互相作用過程中發(fā)揮重要作用，損壞細胞外基質(zhì)，促使胃癌浸潤、轉(zhuǎn)移、發(fā)展［10］。

相關(guān)研究顯示，CD151細胞因機體所受刺激而過度表達，加快細胞磷酸化過程，刺激細胞增殖活性，抑制細胞凋亡，導(dǎo)致細胞代謝失衡、分化不良，進而提高腫瘤發(fā)生率［11］。CD151可將其接收的細胞增殖、凋亡、轉(zhuǎn)移等生物信號，以結(jié)合多種整合素的方式傳導(dǎo)到細胞內(nèi)［12］。CD151可促使磷酸肌醇3－激酶表達增加，影響惡性腫瘤細胞的黏附、遷移，具有促血管內(nèi)皮細胞增殖、促腫瘤血管生成作用，在胃癌腫瘤細胞轉(zhuǎn)移中具有重要作用［13］。CD151可結(jié)合整合素亞型，發(fā)揮張力纖維絲、肌動蛋白聚合調(diào)節(jié)作用，進而重組細胞骨架，促使部分組織產(chǎn)生黏著斑，對腫瘤細胞黏附、轉(zhuǎn)移具有一定影響。本研究結(jié)果顯示，CD151蛋白在胃癌組織陽性表達率高于癌旁組織，提示CD151高表達與胃癌的浸潤、分化、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。此外，Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，ERK1、CD151蛋白表達陽性與胃癌患者TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、低分化程度、有神經(jīng)侵犯、有脈管侵犯、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，可見臨床檢測ERK1、CD151蛋白表達有利于胃癌患者臨床診斷、評估及治療方案的制定。

綜上所述，胃癌患者ERK1、CD151蛋白表達與胃癌患者TNM分期、分化程度、神經(jīng)侵犯、脈管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等病理學(xué)參數(shù)聯(lián)系密切，通過臨床檢測可評估胃癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及預(yù)后，對臨床治療方案制定具有指導(dǎo)作用。