蘇芳芳，錢丹，陳敏*，楊光*，高峰，李敏，楊以明

1.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 中藥資源中心，北京 100700；

2.河北中醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，河北 石家莊 050200；

3.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 西苑醫(yī)院，北京 100091；

4.成都中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，四川 成都 611137；

5.三臺(tái)縣麥冬產(chǎn)業(yè)化辦公室，四川 綿陽(yáng) 621100

“藥食同源”是我國(guó)勞動(dòng)人民在總結(jié)食物和藥物的食用特性后留下的智慧結(jié)晶，體現(xiàn)了食物在保健和治療方面的功能。隨著現(xiàn)代生活水平的不斷提高，人們的養(yǎng)生意識(shí)日益加強(qiáng)，對(duì)飲食健康的要求也逐漸提高。為了保障食品供給的安全和來(lái)源的可持續(xù)性，早在2007 年原衛(wèi)生部就頒布了《新資源食品管理辦法》[1]，后經(jīng)多次修訂和完善，最終于2018 年通過(guò)修正后的《新食品原料安全性審查管理辦法》[2]。隨著國(guó)家對(duì)食品安全問(wèn)題的不斷重視，作為食品來(lái)源的物品均要經(jīng)過(guò)食用歷史考證、生產(chǎn)工藝核查、安全性評(píng)價(jià)、全成分檢測(cè)、食用風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估等一系列環(huán)節(jié)的科學(xué)評(píng)估才能獲得相關(guān)管理部門的認(rèn)可。

麥冬又名麥門冬，為我國(guó)大宗常用中藥之一，《神農(nóng)本草經(jīng)》列之為上品。2002 年原衛(wèi)生部將麥冬列入《可用于保健食品的物品名單》中，其保健功效得到認(rèn)可。近年來(lái)，中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)多次發(fā)布藥食同源和新食品原料的征求意見稿，越來(lái)越多的中藥經(jīng)過(guò)食用歷史考證和安全性評(píng)價(jià)等審核后被開發(fā)應(yīng)用為食品，如人參、當(dāng)歸等常用大宗中藥材已先后列入新資源食品和藥食同源物品名錄中。四川省衛(wèi)生健康委員會(huì)在2019 年針對(duì)麥冬須根出臺(tái)了《食品安全地方標(biāo)準(zhǔn) 麥冬須根》（DBS 51/007—2019）[3]，這為麥冬在食品領(lǐng)域的發(fā)展提供了參考標(biāo)準(zhǔn)。從食用歷史來(lái)看，早在唐代就出現(xiàn)有關(guān)麥冬食用的記載，在民間，麥冬也已成為廣東、四川等地區(qū)的傳統(tǒng)食品，四川居民常將麥冬加入牛奶、火鍋等日常食物中共同熬煮[4]，因此將麥冬作為食品來(lái)源也符合社會(huì)發(fā)展需求。

本研究針對(duì)道地藥材三臺(tái)麥冬進(jìn)行毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)和抗?fàn)I養(yǎng)因子成分分析，為三臺(tái)麥冬的食用安全性提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與菌株

SD 大鼠（雌鼠110 只、雄鼠60 只），SPF 級(jí)，體質(zhì)量180～200 g；離乳SD 大鼠（雌鼠50 只、雄鼠50 只），SPF 級(jí)，體質(zhì)量60～90 g；昆明種小鼠（雌鼠25 只、雄鼠75 只），SPF 級(jí)，體質(zhì)量18～22 g；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（陜）2012-0003；動(dòng)物飼養(yǎng)于SPF 級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房，室溫20～25 ℃，濕度45%～65%，在新環(huán)境適應(yīng)飼養(yǎng)3 d，給藥前禁食8～12 h，不限制飲水。

鼠傷寒沙門氏菌突變型TA97、TA98、TA100、TA102均由國(guó)家（成都）中藥安全性評(píng)價(jià)中心提供。

1.2 試藥

麥冬采自四川省綿陽(yáng)市三臺(tái)縣10 個(gè)不同地區(qū)，樣品采集時(shí)間為2017 年3 月21 日—4 月30 日，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)李敏教授鑒定為百合科植物麥冬Ophiopogon japonicus（L.f.）Ker-Gawl.的塊根，采用球磨儀進(jìn)行打粉處理，備用，用蒸餾水做溶劑配制樣品。毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)中所用麥冬粉末為10 批樣品的混合品，樣品產(chǎn)地信息見表1。

表1 麥冬樣品取樣地信息

環(huán)磷酰胺（CP）、2-氨基芴、1，8-二羥基蒽醌（Sigma-Aldrich 公司）；敵克松（Chemservice 公司）；疊氮化鈉（中國(guó)北京鼎國(guó)生物技術(shù)有限責(zé)任公司）；大鼠肝微粒體酶（美國(guó)Moltox公司）。

1.3 儀器

BS-420 型全自動(dòng)生化分析儀、BC-2800Vet 型血細(xì)胞分析儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）；Uritest-200B 型尿液分析儀（桂林優(yōu)利特醫(yī)療電子有限公司）。

2 方法

2.1 安全性及毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)

2.1.1 大鼠急性毒性實(shí)驗(yàn) 取SD 大鼠20 只，雌雄各半。按限量法設(shè)定灌胃給藥劑量為17.0 g·kg-1（相當(dāng)于人體推薦量的340 倍），給予0.425 mg·mL-1樣品溶液2次，灌胃體積為20 mL·kg-1。灌胃后連續(xù)觀察14 d內(nèi)大鼠的中毒癥狀及死亡情況，記錄實(shí)驗(yàn)開始、第7天及第14天大鼠體質(zhì)量[5]。

2.1.2 遺傳毒性實(shí)驗(yàn)

2.1.2.1 細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn) 采用平板摻入法[5]。選用經(jīng)鑒定符合要求的鼠傷寒沙門氏菌突變型TA97、TA98、TA100、TA102 4 種菌株，以多氯聯(lián)苯誘導(dǎo)的大鼠肝微粒體酶（S9）作為體外代謝活化系統(tǒng)，將菌株接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)。加入麥冬塊根溶液0.1 mL，使麥冬塊根終劑量分別為5000.0、1000.0、200.0、40.0、8.0 μg/皿。并設(shè)溶劑（蒸餾水）對(duì)照組、自發(fā)回變組和陽(yáng)性對(duì)照組。自發(fā)回變組不做處理。每組做3 個(gè)平行皿。-S9 陽(yáng)性對(duì)照藥物：TA97 采用敵克松50.0 μg/皿；TA98采用敵克松50.0 μg/皿；TA100采用疊氮化鈉1.5 μg/皿；TA102 采用敵克松50.0 μg/皿。+S9 陽(yáng)性對(duì)照藥物：TA102采用1，8-二羥基蒽醌50.0 μg/皿，其余3 個(gè)菌株均采用2-氨基芴10.0 μg/皿。每皿加入陽(yáng)性對(duì)照的體積為0.1 mL。37 ℃培養(yǎng)48 h，計(jì)數(shù)每皿回變菌落數(shù)。

2.1.2.2 哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn) 采用30 h 2 次灌胃給藥法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。選用昆明種小鼠50 只，雌雄各半，隨機(jī)分為5 組，設(shè)對(duì)照組（蒸餾水）、CP（40 mg·kg-1）陽(yáng)性對(duì)照組及麥冬塊根10.0、5.0、2.5 g·kg-1組，給藥量為20 mL·kg-1。末次給藥6 h后，頸椎脫臼處死小鼠，取股骨骨髓于小牛血清中涂片、固定、染色，觀察計(jì)數(shù)[5]。

2.1.2.3 小鼠精原細(xì)胞畸變實(shí)驗(yàn) 選用雄性昆明種小鼠50 只，隨機(jī)分為5 組，每組10 只。分組及給藥劑量同2.1.2.2 項(xiàng)下，連續(xù)灌胃5 d。在處死前5 h按5 mg·kg-1劑量給小鼠腹腔注射秋水仙素溶液，脫頸椎處死小鼠，取雙側(cè)附睪制片，染色、觀察。每只動(dòng)物計(jì)數(shù)100 個(gè)中期分裂相細(xì)胞，記錄染色體畸變類型、數(shù)量和畸變細(xì)胞率[5]。

2.1.3 大鼠致畸實(shí)驗(yàn) 取SD 大鼠雌性100 只、雄性50 只，按雌性-雄性2∶1 同籠，次晨查陰栓確定受精鼠并隨機(jī)分到各組。將受精鼠稱體質(zhì)量、編號(hào)、記錄受精日期，作為受孕0 d。設(shè)置麥冬塊根5.00、2.50、1.25 g·kg-1組和溶劑（蒸餾水）對(duì)照組。課題組曾用CP 做陽(yáng)性藥開展過(guò)致畸實(shí)驗(yàn)，在SD 大鼠中有陽(yáng)性結(jié)果發(fā)現(xiàn)，所以本實(shí)驗(yàn)略去陽(yáng)性對(duì)照組。在大鼠受孕的第6～15 d，按10 mL·kg-1的灌胃量每日1 次進(jìn)行灌胃，溶劑對(duì)照組灌胃等體積蒸餾水，并記錄大鼠在孕期第0、6、9、12、15、20 天體質(zhì)量，觀察記錄動(dòng)物的一般行為、表現(xiàn)及有無(wú)中毒體征；在孕第20 天處死母體，剖腹取出子宮，檢查黃體數(shù)、胚胎著床數(shù)、吸收胎數(shù)、活胎數(shù)及死胎數(shù)。逐一記錄胎鼠性別、體質(zhì)量、身長(zhǎng)，檢查有無(wú)外觀畸形。分別將每窩各1/2左右的胎鼠作內(nèi)臟及骨骼檢查[5]。

2.1.4 90 d 喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 選用離乳SD 大鼠100 只，雌雄各半，隨機(jī)分成5 組，設(shè)溶劑（蒸餾水）對(duì)照組和麥冬塊根5.00、2.50、1.25 g·kg-1（分別相當(dāng)于人體推薦量的100、50、25倍）組。另設(shè)5.00 g·kg-1作為高劑量組和溶劑（蒸餾水）對(duì)照組做衛(wèi)星組，每組10 只大鼠，雌雄各半，用于中期血液指標(biāo)測(cè)定。按10 mL·kg-1每日經(jīng)口灌胃1 次，連續(xù)90 d，每周稱1次體質(zhì)量和2次飼料量，記錄給食量和剩食量，計(jì)算每周及總增質(zhì)量、進(jìn)食量和食物利用率。實(shí)驗(yàn)中期和結(jié)束后采血進(jìn)行血液學(xué)檢查，動(dòng)物進(jìn)行大體解剖，觀察臟器變化[5]。

2.2 抗?fàn)I養(yǎng)因子實(shí)驗(yàn)

2.2.1 胰蛋白酶抑制劑的測(cè)定 參考付煊赫等[6]的方法，采用分級(jí)鹽析的方式進(jìn)行胰蛋白酶抑制劑提取。稱取麥冬樣品1.00 g于10 mL去離子水中，室溫磁力攪拌2 h（400 r·min-1），離心（4 ℃，4000 r·min-1，30 min，離心半徑為13.5 cm）。沉淀用去離子水5 mL重復(fù)以上操作，合并2次上清液。上清液用65 ℃水浴加熱10 min，迅速冷卻后離心（4 ℃，4000 r·min-1，30 min，離心半徑為13.5 cm），上清液加固體硫酸銨至飽和度為35%，4 ℃靜置過(guò)夜，離心（4 ℃，4000 r·min-1，30 min，離心半徑為13.5 cm）；繼續(xù)取上清，加固體硫酸銨至飽和度為55%，4 ℃靜置8 h，離心（4 ℃，4000 r·min-1，30 min，離心半徑為13.5 cm），取沉淀，用去離子水800 μL 溶解，在去離子水中充分透析24 h，離心（4 ℃，10 000 r·min-1，10 min，離心半徑為13.5 cm），上清液即為胰蛋白酶抑制劑粗提物。胰蛋白酶活性測(cè)定方法參照《中華人民共和國(guó)藥典》2020 年版（二部）N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（BAEE）法測(cè)定。

2.2.2 凝集素的測(cè)定 稱取麥冬塊根粉末1 g，加0.9%氯化鈉溶液8 mL提取10 h，離心（4 ℃，5000 r·min-1，20 min，離心半徑為13.5 cm）；取上清液，加入硫酸銨達(dá)到飽和度為50%，4 ℃過(guò)夜；離心（4 ℃，5000 r·min-1，30 min，離心半徑為13.5 cm）后收集沉淀，用pH 7.40 的磷酸鹽緩沖液（PBS）溶解，離心（4 ℃，4000 r·min-1，10 min，離心半徑為13.5 cm），上清液在PBS 中透析過(guò)夜，之后繼續(xù)在蒸餾水中透析2～4 h，置于聚乙二醇中吸水濃縮，得到粗凝集素。用二喹啉甲酸（BCA）法測(cè)定麥冬塊根的凝集素含量[7]。

2.2.3 植酸的測(cè)定 稱取麥冬粉末1 g 于50 mL 離心 管。加0.01 mol·L-1HCl 20 mL，離心（4 ℃，6000 r·min-1，10 min，離心半徑為13.5 cm），上清液用20 mL 量瓶定容。稱取FeCl3·6H2O 磺基水楊酸30 mg定容至100 mL，做反應(yīng)液。以不同質(zhì)量濃度植酸鈉做對(duì)照品，按樣品-反應(yīng)液-水5∶5∶4 混勻，離心（4 ℃，3000 r·min-1，10 min，離心半徑為13.5 cm），室溫靜置20 min，于500 nm處測(cè)吸光度[8]。

2.2.4 非淀粉多糖的測(cè)定 稱取麥冬樣品0.5 g 于15 mL 離心管中，加80%乙醇5 mL，水浴90 ℃加熱30 min；離心（4 ℃，6000 r·min-1，2 min，離心半徑為13.5 cm）。上清液用氮?dú)獯蹈伞＜觩H 為5的醋酸緩沖液5 mL，金屬浴100 ℃加熱30 min，取出即加入15 U·mL-1的α-淀粉酶375 μL，加醋酸緩沖液，補(bǔ)足樣品液至10 mL，混勻，離心（4 ℃，9000 r·min-1，2 min，離心半徑為13.5 cm）。上清液備用。以無(wú)水葡萄糖為對(duì)照品，按照樣品-苯酚-濃硫酸4∶2∶10室溫放置25 min進(jìn)行反應(yīng)，在490 nm處測(cè)吸光度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算供試品溶液中葡萄糖含量[9]。

2.2.5 多酚類化合物的測(cè)定

2.2.5.1 槲皮素的測(cè)定 稱量麥冬粉末1.00 g，加80%乙醇8 mL浸泡24 h。超聲提取1 h，離心（4 ℃，3500 r·min-1，15 min，離心半徑為13.5 cm），上清液烘干得到塊狀固體。精密稱取塊狀固體0.05 g，加60%乙醇溶解定容至50 mL，作為供試品溶液。采用紫外分光光度法，以60%乙醇作為空白對(duì)照，以不同質(zhì)量濃度的槲皮素為對(duì)照品，在371 nm 測(cè)定樣品吸光度[10]。

2.2.5.2 沒(méi)食子酸的測(cè)定 精密稱取麥冬粉末0.2 g，加50%乙醇4 mL，浸提24 h，超聲提取30 min，離心（4 ℃，3500 r·min-1，10 min，離心半徑為13.5 cm），取上清液2 mL，定容至25 mL量瓶中。取上述定容液體0.1 mL，加福林酚試劑50 μL，反應(yīng)3 min，再加6%碳酸鈉溶液3 mL，加蒸餾水稀釋至5 mL，混勻，避光保存2 h。采用紫外-可見分光光度法，以相應(yīng)試劑作為空白對(duì)照，以不同質(zhì)量濃度的沒(méi)食子酸為對(duì)照品，760 nm測(cè)樣品吸光度[11]。

2.2.5.3 阿魏酸的測(cè)定 稱量麥冬粉末0.2 g 置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇20 mL，浸提24 h，超聲1 h，離心取上清液，采用紫外-可見分光光度法，以相應(yīng)試劑作為空白對(duì)照，以不同質(zhì)量濃度的阿魏酸為對(duì)照品，在316 nm處測(cè)樣品吸光度[12]。

2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)采用u檢驗(yàn)。小鼠精原細(xì)胞畸變實(shí)驗(yàn)采用二項(xiàng)分布統(tǒng)計(jì)處理。90 d 喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析。在統(tǒng)計(jì)分析時(shí)，先對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，若方差齊，采用單因素方差分析進(jìn)行總體比較，發(fā)現(xiàn)差異再用Dunnett檢驗(yàn)進(jìn)行多劑量組與對(duì)照組均數(shù)間的兩兩比較。若方差不齊則對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，滿足方差齊性檢驗(yàn)后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)仍未達(dá)到方差齊要求，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。上述統(tǒng)計(jì)均用SPSS 20.0軟件處理。

3 結(jié)果與分析

3.1 安全性及毒理學(xué)評(píng)價(jià)

3.1.1 急性毒性實(shí)驗(yàn) 結(jié)果顯示，按限量法以17.0 g·kg-1劑量給藥后，大鼠生長(zhǎng)良好，未見體質(zhì)量受到影響。雌性大鼠初始、給藥第7 天、給藥第14 天體質(zhì)量分別為（193.0±7.3）、（230.0±13.1）、（259.6±14.1）g，雄性大鼠初始、給藥第7天、給藥第14 天體質(zhì)量分別為（199.3±10.5）、（199.3±10.5）、（199.3±10.5）g。雌、雄大鼠均未見有明顯中毒癥狀，無(wú)死亡。實(shí)驗(yàn)結(jié)束解剖大鼠，大體觀察未見明顯異常。結(jié)果表明，三臺(tái)麥冬對(duì)雌、雄大鼠急性經(jīng)口毒性半數(shù)致死量（LD50）均大于17.0 g·kg-1。根據(jù)急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，三臺(tái)麥冬屬于無(wú)毒級(jí)。

3.1.2 遺傳毒性實(shí)驗(yàn)

3.1.2.1 細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn) 由表2～5 可見，在加或不加S9 的情況下，樣品各劑量組的回變菌落數(shù)均未超過(guò)自發(fā)回變菌落的2 倍，亦無(wú)劑量-反應(yīng)關(guān)系，表明該樣品細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性。

表2 三臺(tái)麥冬塊根TA97細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)結(jié)果（,n=3）

表2 三臺(tái)麥冬塊根TA97細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)結(jié)果（,n=3）

注：-S9組陽(yáng)性藥為敵克松；+S9組陽(yáng)性藥為2-氨基芴；表3同。

3.1.2.2 哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn) 由表6 可見，麥冬各劑量組小鼠的紅細(xì)胞微核率與溶劑對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而CP陽(yáng)性對(duì)照組的微核率與溶劑對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），各劑量組的未成熟紅細(xì)胞（PCE）與成熟紅細(xì)胞（NCE）的比值在正常范圍內(nèi)，哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性。

3.1.2.3 小鼠精原細(xì)胞畸變實(shí)驗(yàn) 由表7 可見，與溶劑對(duì)照組比較，麥冬3 個(gè)劑量組畸變細(xì)胞率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而CP陽(yáng)性對(duì)照組畸變細(xì)胞率則顯著升高（P＜0.01）。染色體畸變類型主要表現(xiàn)以斷裂、斷片為主。結(jié)果表明，小鼠精原細(xì)胞畸變實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性。

表3 三臺(tái)麥冬塊根TA98細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)結(jié)果（,n=3）

表3 三臺(tái)麥冬塊根TA98細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)結(jié)果（,n=3）

表4 三臺(tái)麥冬塊根TA100細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)結(jié)果（,n=3）

表4 三臺(tái)麥冬塊根TA100細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)結(jié)果（,n=3）

注：-S9組陽(yáng)性藥為疊氮化鈉；+S9組陽(yáng)性藥為2-氨基芴。

表5 三臺(tái)麥冬塊根TA102細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)結(jié)果（,n=3）

表5 三臺(tái)麥冬塊根TA102細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)結(jié)果（,n=3）

注：-S9組陽(yáng)性藥為敵克松；+S9組陽(yáng)性藥為1，8-二羥基蒽醌。

表6 三臺(tái)麥冬塊根的哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)結(jié)果（,n=5）

表6 三臺(tái)麥冬塊根的哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)結(jié)果（,n=5）

注：每組檢查PCE數(shù)均為5000個(gè)；與對(duì)照組比較，**P＜0.01。

表7 三臺(tái)麥冬塊根對(duì)小鼠精原細(xì)胞畸變實(shí)驗(yàn)結(jié)果（,n=10）

表7 三臺(tái)麥冬塊根對(duì)小鼠精原細(xì)胞畸變實(shí)驗(yàn)結(jié)果（,n=10）

3.1.3 90 d 喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 90 d 喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與溶劑對(duì)照組比較，三臺(tái)麥冬各劑量組對(duì)大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)、進(jìn)食量、食物利用率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；血液學(xué)指標(biāo)、血液生化學(xué)指標(biāo)、臟器濕質(zhì)量、臟器質(zhì)量/體質(zhì)量差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表8～10）。實(shí)驗(yàn)前對(duì)所有大鼠進(jìn)行眼部檢查，實(shí)驗(yàn)后對(duì)高劑量組和溶劑對(duì)照組大鼠進(jìn)行眼部檢查，均未見明顯異常改變；大體解剖觀察和組織病理學(xué)檢查未見與樣品有關(guān)的異常改變。在受試劑量范圍內(nèi)均未見該樣品對(duì)大鼠各項(xiàng)觀察指標(biāo)產(chǎn)生影響。

表8 三臺(tái)麥冬塊根對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響（,n=10）

表8 三臺(tái)麥冬塊根對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響（,n=10）

3.1.4 致畸實(shí)驗(yàn) 結(jié)果表明，與溶劑對(duì)照組比較，三臺(tái)麥冬各劑量孕鼠體質(zhì)量及增質(zhì)量差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表11）；胎仔外觀、活胎總數(shù)、胎鼠體質(zhì)量、體長(zhǎng)、骨骼、內(nèi)臟檢查差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各劑量組孕鼠均未見明顯致畸作用。

注：受檢細(xì)胞數(shù)均為1000個(gè)；與對(duì)照組比較，**P＜0.01。

表9 三臺(tái)麥冬塊根對(duì)大鼠血液生化學(xué)指標(biāo)的影響（,n=10）

表9 三臺(tái)麥冬塊根對(duì)大鼠血液生化學(xué)指標(biāo)的影響（,n=10）

表10 三臺(tái)麥冬塊根對(duì)大鼠臟器質(zhì)量與體質(zhì)量比值的影響（,n=10）

表10 三臺(tái)麥冬塊根對(duì)大鼠臟器質(zhì)量與體質(zhì)量比值的影響（,n=10）

表11 三臺(tái)麥冬塊根對(duì)孕鼠體質(zhì)量的影響（,n=16）

表11 三臺(tái)麥冬塊根對(duì)孕鼠體質(zhì)量的影響（,n=16）

3.2 抗?fàn)I養(yǎng)因子實(shí)驗(yàn)

3.2.1 胰蛋白酶抑制劑、凝集素、植酸、非淀粉多糖 三臺(tái)麥冬塊根中胰蛋白酶抑制劑對(duì)胰蛋白酶的平均抑制率為35.19%（表12）。因文獻(xiàn)針對(duì)常見食品的胰蛋白抑制劑的描述較少，故缺少對(duì)比說(shuō)明。凝集素的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.737 mg·g-1，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，大豆中凝集素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高為37.5 mg·g-1，最低為1.88 mg·g-1，大部分集中在4.22～13.13 mg·g-1[13]，由此可見，三臺(tái)麥冬中凝集素質(zhì)量分?jǐn)?shù)低于大豆。植酸的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.120 8 mg·g-1，文獻(xiàn)報(bào)道中顯示，植酸在豆制品中如腐竹、青豆、黃豆等食物中質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為20.78、14.27、13.74 mg·g-1[14]，均高于三臺(tái)麥冬的植酸含量。三臺(tái)麥冬中非淀粉多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)均值為0.115 g·g-1。文獻(xiàn)顯示，在幾種常用中藥的非淀粉多糖含量研究中，蘆薈的非淀粉多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為41.55 g·kg-1，黃芪中為610.6 g·kg-1[15]，遠(yuǎn)高于在三臺(tái)麥冬中的含量。

表12 三臺(tái)麥冬塊根的胰蛋白酶抑制劑的測(cè)定結(jié)果（n=3）

3.2.2 多酚類化合物 三臺(tái)麥冬塊根中槲皮素平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.044 g·g-1，沒(méi)食子酸平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5.098 mg·g-1，阿魏酸的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.875 mg·g-1（表13）。

表13 三臺(tái)麥冬塊根中多酚類化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)（n=3）

4 討論

麥冬雖然在我國(guó)使用歷史悠久，但關(guān)于其毒理學(xué)評(píng)價(jià)的研究較少。本研究從多維度評(píng)價(jià)了三臺(tái)麥冬的毒性，在急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)、遺傳毒性實(shí)驗(yàn)、大鼠致畸實(shí)驗(yàn)和90 d 經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)中均未觀察到三臺(tái)麥冬對(duì)大鼠及小鼠的各項(xiàng)指標(biāo)產(chǎn)生不良影響。盡管在體外條件下麥冬水煎液可能會(huì)引起細(xì)胞位點(diǎn)突變，但經(jīng)體內(nèi)代謝活化后并未顯示遺傳毒性[16]。有學(xué)者在觀察麥冬水浸提液對(duì)大鼠胚胎/胎兒的發(fā)育毒性中發(fā)現(xiàn)，在相當(dāng)于人臨床最大用量的135 倍條件下，其仍表現(xiàn)出極好的安全性[17]。在對(duì)麥冬須根的安全性評(píng)價(jià)中，也未發(fā)現(xiàn)其對(duì)實(shí)驗(yàn)鼠健康造成影響[18]。這些都表明麥冬在臨床劑量范圍內(nèi)服用是安全的。

麥冬塊根中的抗?fàn)I養(yǎng)因子為植物中常見的幾類物質(zhì)，主要包括胰蛋白酶抑制劑、凝集素、植酸、非淀粉多糖、多酚化合物等。豆類、花生及谷實(shí)類、塊根、塊莖等食品中都含有微量的抗?fàn)I養(yǎng)因子，在加工、加熱等工藝過(guò)程中可以消除和破壞大部分的抗?fàn)I養(yǎng)因子。本研究表明，三臺(tái)麥冬的抗?fàn)I養(yǎng)因子在推薦劑量下無(wú)健康風(fēng)險(xiǎn)。

我國(guó)已步入老齡化社會(huì)，市場(chǎng)上面臨著巨大的養(yǎng)生保健需求。“藥食同源”和飲食療法是中華民族最古老的治病強(qiáng)身方法，中醫(yī)藥具有許多可作為食品食用的中藥材。現(xiàn)代研究表明，麥冬具有降血糖、保護(hù)心血管系統(tǒng)、增強(qiáng)免疫等活性，具有潛在的食用開發(fā)價(jià)值[19]。但是，限于《中華人民共和國(guó)食品安全法》等政策規(guī)定，麥冬尚不能作為普通食品使用，這嚴(yán)重地制約了麥冬產(chǎn)業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展。將麥冬推薦為食用來(lái)源，有助于滿足我國(guó)在養(yǎng)生保健和養(yǎng)老方面的訴求，豐富中醫(yī)藥大健康產(chǎn)業(yè)的內(nèi)涵。