顧笑笑 吳 湘 張 愛 俞程強(qiáng) 楊林浩 孫 怡 李珍珍

(湖州師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院， 浙江省水生生物資源養(yǎng)護(hù)與開發(fā)技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 湖州 313000)

β-N-甲氨基-L-丙氨酸(β-N-methylamino-Lalanine， BMAA)是一種由藍(lán)藻產(chǎn)生的具有慢性神經(jīng)毒性的藻毒素， 被認(rèn)為是誘導(dǎo)肌萎縮側(cè)索硬化-帕金森癡呆綜合征(ALS-PDS)的重要環(huán)境因子[1]。Purdie等[2]通過對斑馬魚的體外實(shí)驗(yàn)推測BMAA可以形成一種類似谷氨酸酯的物質(zhì)而促使神經(jīng)元退化， 誘發(fā)神經(jīng)發(fā)育系統(tǒng)或者神經(jīng)肌肉的異常。BMAA毒素具有生物累積和生物放大效應(yīng)[1，3—8]， 在深受藍(lán)藻水華污染的淡水養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)中生長的養(yǎng)殖產(chǎn)品也極易吸收、富集和放大BMAA毒素而最終進(jìn)入人體。我國作為世界第一水產(chǎn)養(yǎng)殖大國， 關(guān)注和調(diào)查淡水養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)中BMAA毒素的污染水平及在水產(chǎn)品中的富集效應(yīng)， 并對其進(jìn)行健康風(fēng)險(xiǎn)評估已顯得尤為迫切和亟需。

此外， 如何安全、高效、經(jīng)濟(jì)地調(diào)控藻毒素的污染問題一直是學(xué)者研究的熱點(diǎn)和重點(diǎn)。近年來，以水生植物化感物質(zhì)[9—12]和緩釋顆粒技術(shù)[13—16]為基礎(chǔ)制備的化感緩釋抑藻劑對產(chǎn)毒藍(lán)藻進(jìn)行生長抑制， 從而有效控制藻毒素產(chǎn)生與釋放為解決藻毒素污染問題提供了新思路與新方法。本文重點(diǎn)針對BMAA毒素在環(huán)境中降解緩慢等特點(diǎn)， 開發(fā)以沒食子酸為化感物質(zhì)、氧化石墨烯為控釋載體的新型化感緩釋抑藻劑用于抑制產(chǎn)毒藍(lán)藻生長和調(diào)控BMAA毒素污染， 研究結(jié)果將對保障我國淡水養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的安全生產(chǎn)和人類健康具有重要的意義。

綜上所述， 本文擬通過調(diào)查和檢測BMAA毒素在我國長江中下游地區(qū)典型淡水養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)的養(yǎng)殖水體、底泥及6種常見淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品(河蜆Corbiculafluminea、銅銹環(huán)棱螺Bellamya aeruginosa、日本沼蝦Macrobrachium nipponense、中華絨螯蟹Eriocheirsinensis、青魚Mylopharyngodon piceus和鯽Carassius auratus)中的污染水平， 開展BMAA毒素對人體的健康風(fēng)險(xiǎn)評估， 并在此基礎(chǔ)上初步提出基于我國國情的淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品質(zhì)量安全的BMAA毒素建議標(biāo)準(zhǔn)限值(GV); 同時(shí)針對新型化感緩釋抑藻劑的制備、調(diào)控BMAA毒素污染的效果及其生態(tài)安全性評價(jià)等方面逐一開展研究， 為其今后高效、安全地應(yīng)用于藍(lán)藻水華頻發(fā)的淡水養(yǎng)殖池塘藻毒素污染治理提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品的采集、處理與檢測

水體、底泥及生物樣品的采集與處理本實(shí)驗(yàn)于2019年7—9月在湖州市淡水養(yǎng)殖區(qū)域隨機(jī)選取3類藍(lán)藻水華暴發(fā)嚴(yán)重的淡水混合養(yǎng)殖池塘(河蜆+鯽混養(yǎng)、日本沼蝦+中華絨螯蟹混養(yǎng)、青魚+銅銹環(huán)棱螺混養(yǎng))作為BMAA調(diào)查采樣的研究對象， 上述每種混養(yǎng)池塘數(shù)量均設(shè)置為3個(gè)， 分別采集其養(yǎng)殖水體、底泥及養(yǎng)殖生物樣品(圖1)。每個(gè)池塘設(shè)置4個(gè)采樣點(diǎn)， 分別取其深層水及淺層水均勻混合得到養(yǎng)殖水體樣品; 采泥3次后均勻混合得到底泥樣品。水樣過500目不銹鋼篩后經(jīng)0.45 μm醋酸纖維濾膜減壓抽濾2次， 于-20℃凍存; 底泥去除雜物， 冷凍干燥處理后置于研缽中研碎， 于-20℃凍存; 同時(shí)在對應(yīng)的單個(gè)養(yǎng)殖池塘中隨機(jī)獲取河蜆10只(體長6—9 mm)、銅銹環(huán)棱螺10只(殼高15—22 mm)、日本沼蝦20只(體長5—6 cm)、中華絨螯蟹5只(體重100—150 g)、青魚3尾(體長75—85 cm)和鯽10尾(體重180—200 g)， 冷藏保存并帶回實(shí)驗(yàn)室解剖， 取肌肉組織粉碎勻漿， 于-80℃保存。

圖1 采樣點(diǎn)位示意圖Fig. 1 Schematic diagram of sampling points

樣品中BMAA含量的測定取水樣經(jīng)Waters Oasis MCX 混合型陽離子交換反向吸附柱處理(活化: 2 mL甲醇， 調(diào)整: 2 mL超純水， 上樣: 1.5 mL水樣， 淋洗1: 2 mL 2%甲酸， 淋洗2: 2 mL甲醇， 洗脫:2.5 mL 5%氨化甲醇)并收集洗脫液[8]。底泥及生物樣品分別取15 mg， 加入2 mL預(yù)冷的0.1 mol/L TCA，反復(fù)凍融并超聲波破碎后離心， 合并上清液[1]; 沉淀中加入2 mL 6 mol/L HCl于110℃水解24h后， 收集水解液。將上述各提取液氮吹至近干后， 使用Waters AccQ Tag化學(xué)試劑包進(jìn)行衍生化處理[1，17]， 后經(jīng)Agilent 1290/6460 HPLC-MS/MS檢測各樣品中BMAA的濃度水平。

BMAA毒素建議安全標(biāo)準(zhǔn)限值的確定及對人體的健康風(fēng)險(xiǎn)評估參照美國國家科學(xué)院提出的健康風(fēng)險(xiǎn)評價(jià)方法[18]， 開展BMAA毒素對人體的健康風(fēng)險(xiǎn)評估。參考Spencer等[19]的獼猴急性毒性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)， 確定BMAA不致引起有害健康效應(yīng)最高劑量NOAEL值， 并根據(jù)公式(1-1)推算出BMAA毒素人類每日容許攝入量TDI值， 根據(jù)公式(1-2)計(jì)算養(yǎng)殖水產(chǎn)品BMAA毒素的估計(jì)每日攝入量EDI值， 根據(jù)公式(1-3)確定淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品BMAA毒素建議安全標(biāo)準(zhǔn)限值GV; 通過EDI與TDI、BMAA濃度與GV值的比較， 評估淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品中的BMAA毒素對人體健康存在的潛在風(fēng)險(xiǎn)。

式中，NOAEL取值100 mg/(kg·d);UF是不確定系數(shù)，取值1000;BW是國際人體身體平均質(zhì)量， 取值60 kg(成人)或20 kg(兒童);AF是分配系數(shù)， 取值0.2;C是水產(chǎn)品體內(nèi)總BMAA濃度， 單位為μg/g干重;A是日常暴露量， 取值100 g干重/d。

1.2 新型化感緩釋抑藻劑的制備及其調(diào)控BMAA污染的效果研究

新型化感緩釋抑藻劑的制備稱取適量氧化石墨烯(GO， 圖2a)溶于水， 超聲波震蕩混合均勻后依次加入1.2 g氫氧化鈉和0.8 g氯乙酸， 并用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺溶液和N-羥基硫代琥珀酰亞胺溶液活化GO 1h。向上述混合液中加入適量L-半胱氨酸鹽酸鹽并孵育12h， 透析后冷凍干燥得到修飾后的氧化石墨烯(Cys-GO， 圖2b)粉末[20]。稱取適量沒食子酸和Cys-GO粉末溶于水，用磁力攪拌器混合均勻后加入適量海藻酸鈉并運(yùn)用超聲波輔助震蕩制備分散液， 用注射器移取分散液滴入10% CaCl2溶液中固化成鈣凝膠球后， 取出并用超純水清洗3次， 于40℃烘箱內(nèi)干燥得到新型化感緩釋抑藻劑。

圖2 GO(a)與Cys-GO(b)的掃描電鏡圖Fig. 2 Scanning electron microscopic images of GO (a) and Cys-GO (b)

新型化感緩釋抑藻劑調(diào)控BMAA污染的效果研究供試藻種選用產(chǎn)毒藍(lán)藻“銅綠微囊藻(Microcystis aeruginosa， FACHB-315)”， 購自中國科學(xué)院水生生物研究所淡水藻種庫， 采用BG-11培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)， 培養(yǎng)方法參考劉菲菲等[21]。根據(jù)前期開展的抑藻能力測試結(jié)果發(fā)現(xiàn)， 當(dāng)沒食子酸濃度為12.5 mg/L時(shí)制備的化感緩釋抑藻劑具有較強(qiáng)的抑制產(chǎn)毒藍(lán)藻生長的能力， 故后續(xù)的抑藻劑調(diào)控BMAA污染及其生態(tài)安全性評價(jià)均采用此濃度開展研究。通過比較分析上述化感緩釋抑藻劑添加前后銅綠微囊藻培養(yǎng)液中胞內(nèi)BMAA、胞外BMAA及BMAA總量的變化情況， 以此闡明抑藻劑對BMAA毒素污染的調(diào)控效果。具體步驟如下: 分別定量采集抑藻劑添加前后的受試藻液， 離心并冷凍干燥處理， 按照上述生物樣品處理方法進(jìn)行處理并檢測各組胞內(nèi)BMAA含量， 按上述水樣處理方法處理并檢測各組胞外BMAA含量， 同步測定藻細(xì)胞質(zhì)量濃度(ρ)， 并按照公式(1-4)計(jì)算各組BMAA總含量。

式中，C1是單位質(zhì)量細(xì)胞內(nèi)BMAA含量， 單位為μg/g干重;ρ是培養(yǎng)液的藻細(xì)胞的質(zhì)量濃度， 單位為g干重/mL;V是培養(yǎng)液體積， 單位為mL;C2是胞外BMAA的含量， 單位為μg/mL。

1.3 新型化感緩釋抑藻劑的生態(tài)安全性評價(jià)

參考GB/T 16125-2012《大型溞急性毒性實(shí)驗(yàn)方法》[22]和GB/T 13267-1991《物質(zhì)對淡水魚(斑馬魚)急性毒性測定方法》[23]選育受試對象。以重鉻酸鉀為參考毒物測試大型溞和斑馬魚的敏感性， 分別設(shè)置新型化感緩釋抑藻劑實(shí)驗(yàn)組及空白對照組，平行3次。實(shí)驗(yàn)連續(xù)觀察48h， 記錄受試生物活動(dòng)或死亡情況， 計(jì)算存活率(%)并評價(jià)其生態(tài)安全性。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

所有樣品平行測定3次， 所得數(shù)據(jù)采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。利用Excel 2016和Origin 2018進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和繪圖。用SPSS 25.0軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA)，P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 淡水池塘養(yǎng)殖池塘中BMAA的污染水平

根據(jù)養(yǎng)殖池塘水體、底泥、養(yǎng)殖產(chǎn)品(河蜆、銅銹環(huán)棱螺、日本沼蝦、中華絨螯蟹、青魚、鯽)樣本內(nèi)BMAA含量的HPLC-MS/MS檢測結(jié)果(圖3)，初步闡明了BMAA在淡水養(yǎng)殖池塘中的污染分布情況及其含量水平(表1)。

圖3 淡水池塘養(yǎng)殖池塘中水體、底泥以及6種水產(chǎn)品的BMAA色譜圖Fig. 3 BMAA chromatogram of water， sediment and six kinds of aquaculture products in freshwater aquaculture ponds

結(jié)果表明， 本實(shí)驗(yàn)所選取的軟體動(dòng)物(河蜆、銅銹環(huán)棱螺)檢測到的BMAA平均含量是甲殼動(dòng)物(日本沼蝦、中華絨螯蟹)含量的1.56倍， 是雜食性魚類(青魚、鯽)含量的1.85倍; 藍(lán)藻暴發(fā)時(shí)期6種水產(chǎn)品中銅銹環(huán)棱螺體內(nèi)的BMAA富集程度最高， 約為同時(shí)期河蜆體內(nèi)BMAA含量的2倍。由此可知，BMAA毒素在本文所調(diào)查的淡水養(yǎng)殖環(huán)境和生物體內(nèi)均有一定程度的污染， 且具有生物累積效應(yīng)。

2.2 淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品中BMAA的健康風(fēng)險(xiǎn)評估

TDI值 根據(jù)Spencer等[19]的獼猴急性毒性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)， 確定BMAA的不致引起有害健康效應(yīng)最高劑量NOAEL值為100 mg/(kg·d)， 設(shè)置不確定系數(shù)(UF)為種間差異10， 種內(nèi)差異10， 數(shù)據(jù)庫限制10， 根據(jù)上文公式(1-1)可推算出BMAA毒素的TDI值為100 μg/(kg·d)。

EDI值根據(jù)樣品中BMAA的含量及公式(1-2)， 可計(jì)算出6種淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品BMAA的估計(jì)每日攝入量EDI值(表2)。通過考察成人和兒童兩種情況均發(fā)現(xiàn): 上述6種水產(chǎn)品中BMAA的EDI值均遠(yuǎn)小于TDI值(圖3)。參照美國國家科學(xué)院提出的健康風(fēng)險(xiǎn)評價(jià)方法[18]， 若EDI值大于TDI值， 則認(rèn)為被BMAA毒素污染的淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品是不安全的， 反之則可認(rèn)為安全。因此可以認(rèn)為本實(shí)驗(yàn)所調(diào)查的6種淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品雖已被BMAA毒素污染， 但目前尚處于安全水平。

表2 6種淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品成人和兒童的EDI值Tab. 2 EDI values of six freshwater aquaculture products for adults and children

GV值根據(jù)公式(1-3)， 可計(jì)算出淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品BMAA的建議安全標(biāo)準(zhǔn)限值(GV): 成人為12 μg/g、兒童為3 μg/g。結(jié)合表1中6種淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品中BMAA的含量及圖4中BMAA含量與GV值的關(guān)系圖， 可以發(fā)現(xiàn)本文選取的6種淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品中的BMAA含量均遠(yuǎn)低于成人和兒童BMAA的GV值。

圖4 BMAA含量和EDI值(成人、兒童)、TDI值、GV值(成人、兒童)之間的關(guān)系圖Fig. 4 The relationships between BMAA contents， EDI values(adults， children)， TDI values and GV values (adults， children)

表1 淡水池塘養(yǎng)殖池塘中BMAA的含量Tab. 1 Contents of BMAA in freshwater aquaculture ponds

2.3 新型化感緩釋抑藻劑調(diào)控BMAA污染的效果

對12.5 mg/L新型化感緩釋抑藻劑投放前后銅綠微囊藻受試藻液中的胞內(nèi)、胞外BMAA含量及藻細(xì)胞質(zhì)量濃度進(jìn)行分析檢測， 并計(jì)算BMAA總量(表3)。

表3 新型化感緩釋抑藻劑添加前后銅綠微囊藻受試藻液中BMAA含量的變化Tab. 3 Changes of BMAA content in the algae solution of M.aeruginosa before and after adding new allelopathic sustainedrelease algae inhibitors

結(jié)果表明， 新型化感緩釋抑藻劑投放前后受試藻液的胞外BMAA含量都非常低， 雖略有增加但是差異不顯著(P＞0.05)， 由此可知， 抑藻劑的添加對銅綠微囊藻BMAA毒素的釋放無顯著影響; 抑藻劑添加7d后胞內(nèi)BMAA含量出現(xiàn)顯著下降， 而胞外BMAA增加不明顯， BMAA總量下降69.72%。綜上所述， 12.5 mg/L新型化感緩釋抑藻劑對BMAA毒素污染具有較好的調(diào)控效果。

2.4 新型化感緩釋抑藻劑的生態(tài)安全性評價(jià)

新型化感緩釋抑藻劑的生物急性毒性測試結(jié)果表明， 新型化感緩釋抑藻劑投放濃度為12.5 mg/L時(shí)， 大型溞的24h存活率仍可達(dá)70%， 斑馬魚的48h存活率達(dá)到80%。由此可知， 本文所研發(fā)的新型化感緩釋抑藻劑在保證較好調(diào)控藻毒素污染效果的同時(shí)還具有良好的生態(tài)安全性。

3 討論

3.1 淡水養(yǎng)殖池塘中BMAA的污染水平及其健康風(fēng)險(xiǎn)評估

據(jù)報(bào)道， BMAA毒素在水生動(dòng)物中存在生物富集和生物放大等現(xiàn)象。Brand等[6]在調(diào)查佛羅里達(dá)州卡盧薩哈奇河中BMAA污染情況時(shí)發(fā)現(xiàn)， 貽貝(Mytilus edulis)、弓鰭魚(Amia calva)、鱷雀鱔(Atractosteus spatula)、大嘴鱸(Largemouth bass)等水生生物中BMAA的累積濃度達(dá)到250—2559 μg/g FW; Mondo等[24]調(diào)查了南佛羅里達(dá)7種鯊魚魚翅中BMAA的富集情況， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)其濃度介于144—1836 ng/mg FW。BMAA沿“藍(lán)藻-蘇鐵-果蝠”這一食物鏈的傳遞過程中， 其濃度被放大了1萬倍以上[3，4]; 在波羅的海區(qū)域生態(tài)系統(tǒng)中， 浮游動(dòng)物體內(nèi)BMAA含量比它們的食物-藍(lán)藻平均增加6倍， 在一些魚類的組織中， BMAA含量被放大200倍[25]。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明， BMAA毒素在所調(diào)查的6種典型淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品中的濃度介于0.363—1.040 μg/g FW， 遠(yuǎn)低于上述研究的BMAA污染水平， 這可能是由于人工養(yǎng)殖環(huán)境下的淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品主要食物來源為飼料餌料等， 食物鏈結(jié)構(gòu)相對比較簡單， 從而養(yǎng)殖生物體內(nèi)通過食物鏈途徑積累和富集的BMAA毒素要遠(yuǎn)低于自然條件下生長的水生生物。

WHO等國際組織和多數(shù)國家均未對BMAA開展健康風(fēng)險(xiǎn)評估工作， 導(dǎo)致BMAA的相關(guān)限量標(biāo)準(zhǔn)缺失。根據(jù)Roney等[26]的研究推測， 中國居民接觸到BMAA毒素最可能的途徑是食用受BMAA污染的水產(chǎn)品， 但是我國目前尚未制定關(guān)于BMAA的淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品質(zhì)量安全的標(biāo)準(zhǔn)限值。本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果表明， BMAA毒素在所調(diào)查的淡水養(yǎng)殖環(huán)境和生物體內(nèi)均有一定程度的污染， 且具有生物累積效應(yīng)。6種淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品中BMAA的EDI值(估計(jì)每日攝入量)均遠(yuǎn)小于TDI值(每日容許攝入量)， 其濃度水平也遠(yuǎn)低于GV值(建議安全標(biāo)準(zhǔn)限值: 成人12 μg/g、兒童3 μg/g)， 對人體的健康風(fēng)險(xiǎn)較低。但是考慮到本研究中實(shí)驗(yàn)樣品的采集區(qū)域有限， 需要在今后的工作中繼續(xù)驗(yàn)證研究結(jié)果的準(zhǔn)確和可靠性。

3.2 化感緩釋抑藻劑對BMAA毒素污染的調(diào)控效果及其生態(tài)安全性

BMAA化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定， 不易分解， 并且國內(nèi)外針對BMAA毒素去除技術(shù)的研究也鮮有報(bào)道。Esterhuizen等[27，28]采用沉積物物理吸附和大型水生植物吸收BMAA等方式降低水體中BMAA毒素的污染水平， 但是沉積物吸附的BMAA極易轉(zhuǎn)移至底棲動(dòng)物而被其他水生動(dòng)物捕食， 受BMAA污染的大型水生植物也可被魚類直接攝食， 故均不宜用于淡水養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)中BMAA毒素的去除。利用化感物質(zhì)對產(chǎn)毒藍(lán)藻生長進(jìn)行抑制， 進(jìn)而從源頭上減少BMAA毒素的產(chǎn)生與釋放可作為一種調(diào)控淡水養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)中BMAA毒素污染較為切實(shí)有效的方法。但是必須注意到， 在養(yǎng)殖水體中直接投放化感物質(zhì)容易造成局部濃度過高而對其他水生生物產(chǎn)生不利影響， 同時(shí)抑藻的有效時(shí)間也大大縮短[29，30]。為此， 使用具有緩釋功能的化感抑藻劑可避免上述弊端的發(fā)生。劉振宇和劉彬[31]的研究發(fā)現(xiàn)， 使用青蒿素和殼聚糖/海藻酸鈉制成的緩釋體膠囊的抑藻有效時(shí)間比純青蒿素增加了54%; 黃皓旻[9]制備的黃酮仿生化感抑藻劑可持續(xù)釋放化感物質(zhì)的時(shí)間長達(dá)120d。本文研發(fā)的新型化感緩釋抑藻劑能有效調(diào)控BMAA毒素污染， 添加12.5 mg/L抑藻劑7d后銅綠微囊藻的胞內(nèi)BMAA含量顯著下降， 胞外BMAA無明顯增加， BMAA總量也隨之明顯減少?？梢姰a(chǎn)毒藍(lán)藻(銅綠微囊藻)在適當(dāng)劑量的化感緩釋抑藻劑的脅迫下其胞內(nèi)BMAA毒素的合成受到了一定程度的抑制， 并且不會(huì)促進(jìn)胞外BMAA毒素的釋放， 從而有效降低BMAA毒素總量， 對BMAA污染具有良好的調(diào)控效果。

作為植物的次生代謝產(chǎn)物， 化感物質(zhì)在投加過程中是否會(huì)對環(huán)境產(chǎn)生一定的副作用， 尤其是對水環(huán)境中其他水生生物的生態(tài)安全性也亟須研究明確。張庭廷等[32]研究發(fā)現(xiàn)， 一種名為“對羥基苯甲酸”的化感物質(zhì)以最佳抑藻濃度0.8 mmol/L作用于鯉(Cyprinus carpio)后， 通過對魚鰓、肌肉、肝臟及血液等多種生化指標(biāo)分析證明， 對羥基苯甲酸在該濃度下對鯉無明顯的毒性作用; 鄭春艷等[33]研究了3種化感物質(zhì)(亞油酸、水楊酸和對羥基苯甲酸)對多刺裸腹蚤(Moina macrocopa straus)的毒性作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)， 亞油酸對多刺裸腹蚤屬于高毒， 水楊酸及對羥基苯甲酸屬于低毒。本研究開發(fā)的新型化感緩釋抑藻劑投放濃度為12.5 mg/L時(shí)， 未對大型溞和斑馬魚產(chǎn)生明顯的毒性效應(yīng)。由此可知， 本文所研發(fā)的新型化感緩釋抑藻劑在保證較好抑藻效果的同時(shí)還具有良好的生態(tài)安全性， 可應(yīng)用至實(shí)際淡水養(yǎng)殖池塘產(chǎn)毒藍(lán)藻水華治理中。

4 結(jié)論

(1) BMAA毒素在本文所調(diào)查的淡水養(yǎng)殖環(huán)境和生物體內(nèi)均有一定程度的污染， 具有生物累積效。(2)本文所調(diào)查的6種淡水養(yǎng)殖產(chǎn)品中BMAA的EDI值遠(yuǎn)低于TDI值， BMAA濃度水平也遠(yuǎn)低于成人與兒童的BMAA建議安全標(biāo)準(zhǔn)限值(GV)， 因此可認(rèn)為其對人體的健康風(fēng)險(xiǎn)較小。(3)新型化感緩釋抑藻劑在有效降低BMAA毒素污染水平的同時(shí)兼具良好的生態(tài)安全性， 可應(yīng)用至實(shí)際養(yǎng)殖池塘產(chǎn)毒藍(lán)藻及藻毒素污染的防治工作。