呂 軍，李 慧，曹修才

（聊城市農(nóng)業(yè)科學院，山東 聊城 252000）

雙孢蘑菇（Agaricus bisporus） 簡稱雙孢菇，俗稱蘑菇，屬傘菌目 （Agaricales） 傘菌科 （Agaricaceae） 蘑菇屬（Agaricus），是目前世界上栽培最多、規(guī)模最大、產(chǎn)量最高的食用菌品種[1]。雙孢蘑菇營養(yǎng)豐富，味道鮮美，蛋白含量高（32.2%），脂肪含量低（2.2%），含膳食纖維（5.8%），是一種集美味和保健于一體的健康食品[2]。

目前，雙孢蘑菇的栽培分為工廠化栽培和農(nóng)家栽培。工廠化栽培是用以麥草（或稻草）及馬糞（或牛糞、雞糞）為主的糞草配方進行栽培，采用隧道二次或三次發(fā)酵技術，單產(chǎn)為 30 kg·m-2～35 kg·m-2[3]。農(nóng)家栽培普遍使用麥草、稻草、玉米芯、牛糞、杏鮑菇（Pleurotus eryngii）菌渣等為主的復合配方進行栽培，常采用棚外翻堆加棚內(nèi)二次發(fā)酵技術，單產(chǎn)為15 kg·m-2～25 kg·m-2[4-6]。近年來，隨著雙孢蘑菇栽培配方和栽培設施的改進，山東、河北等北方地區(qū)以玉米芯和牛糞為主，周年化生產(chǎn)雙孢蘑菇，單產(chǎn)可達22 kg·m-2，產(chǎn)值達150元/m2，產(chǎn)量和產(chǎn)值較傳統(tǒng)麥草栽培大幅提升。但由于玉米芯可用于生物化工領域生產(chǎn)糠醛，導致玉米芯價格攀升甚至翻番，造成雙孢蘑菇栽培原料成本增加，限制了雙孢蘑菇的生產(chǎn)。為降低成本，已有國內(nèi)學者將杏鮑菇菌渣、金針菇[Flammulina velutiper（Fr.）Sing]菌渣、草菇（Volvariella volvacea） 菌渣等用于雙孢蘑菇栽培的研究，可普遍降低其栽培成本，同時取得一定的栽培效益[7-8]。

草菇和雙孢蘑菇均為草腐菌，但二者生長發(fā)育所需的營養(yǎng)條件差異較大，草菇對氮源需求量小，而雙孢蘑菇對氮源需求量大。利用有機原料生產(chǎn)草菇后，草菇菌渣中尚含有較多碳氮養(yǎng)分，尤其是有機氮源，經(jīng)發(fā)酵后可作為雙孢蘑菇的生產(chǎn)原料[9]。利用玉米芯和杏鮑菇菌渣等原料栽培草菇，再將草菇菌渣用于雙孢蘑菇的栽培，在保障雙孢蘑菇產(chǎn)量的情況下，降低生產(chǎn)成本，提高生產(chǎn)效益，實現(xiàn)草菇-雙孢蘑菇周年輪作。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試菌株

雙孢蘑菇AS2796，由山東富邦菌業(yè)有限公司提供。

1.1.2 供試原材料

草菇培養(yǎng)料（玉米芯45%、杏鮑菇菌渣30%、牛糞20%、石灰5%）、雞糞、雙孢蘑菇常規(guī)培養(yǎng)料，以上原料均由山東富邦菌業(yè)有限公司生產(chǎn)或購買。所有原料按照比例用于配制草菇培養(yǎng)料，栽培草菇后剩余的廢料即為草菇菌渣。

1.2 栽培設施

采用周年化栽培大棚，大棚為拱形鋼架外包薄膜加巖棉結(jié)構，棚外設有空調(diào)和通風機組，與內(nèi)部風筒相連構成通風系統(tǒng)，通風系統(tǒng)與環(huán)境監(jiān)測和調(diào)控系統(tǒng)相連，用于棚內(nèi)溫度、CO2濃度等的監(jiān)測和調(diào)控，采用層架栽培[10]。

1.3 培養(yǎng)料生產(chǎn)設施

常規(guī)培養(yǎng)料使用山東富邦菌業(yè)有限公司的一次隧道發(fā)酵生產(chǎn)，隧道規(guī)格為長（20 m）×寬（6 m）×高（4.5 m），地面設通氣地板，頂部設防雨棚頂。

1.4 試驗設計

以雙孢蘑菇常規(guī)栽培配方為對照組（CK），共設計6個配方。每個配方3次重復，小區(qū)面積6 m2，隨機排列，試驗栽培面積108 m2，每個配方的投料量為 30 kg·m-2。

常規(guī)培養(yǎng)料（A）原料配比：玉米芯48%、牛糞49%、石灰1%、石膏1%、過磷酸鈣1%。

草菇菌渣培養(yǎng)料（B） 原料配比：草菇菌渣80%、雞糞20%。

6個配方的具體信息見表1。

表1 不同的培養(yǎng)料配方Tab.1 The different formulas for substrates

1.5 試驗方法

1.5.1 培養(yǎng)料制備和復配

配方1～配方6培養(yǎng)料的制備和復配分別按照如下方式進行，自二次發(fā)酵開始方法相同。

1） 配方CK：常規(guī)培養(yǎng)料（A） 的制備

預濕和配料：將生產(chǎn)原料按玉米芯48%、牛糞49%、石灰1%、石膏1%、過磷酸鈣1%的比例進行備料。先將玉米芯充分預濕，再將牛糞和玉米芯拌勻，最后加入石灰、石膏和過磷酸鈣。

一次發(fā)酵：將混合料堆放入一次發(fā)酵隧道，料高2.5 m～3.0 m。當料溫升至75℃～80℃且不再繼續(xù)升高時進行轉(zhuǎn)倉，一般在第4天、第6天、第8天依次轉(zhuǎn)倉，轉(zhuǎn)倉3次后第9天時發(fā)酵完成，當外界氣溫偏高或偏低時，應根據(jù)實際情況靈活調(diào)整轉(zhuǎn)倉時間。發(fā)酵好的培養(yǎng)料要求無異味，無酸臭味。

2） 配方1：草菇菌渣培養(yǎng)料（B） 的制備

將生產(chǎn)原料按玉米芯45%、杏鮑菇菌渣30%、牛糞20%、石灰5%的比例調(diào)配成草菇培養(yǎng)料，按照草菇周年化栽培技術生產(chǎn)草菇[11]。待草菇栽培結(jié)束，將菌渣轉(zhuǎn)移至預設場地后，加入雞糞20%和物料腐熟劑0.1%，調(diào)節(jié)物料含水量約為65%，建堆進行一次發(fā)酵，料溫升至65℃以上后維持24 h，進行翻堆，共翻堆1次～3次。發(fā)酵好的培養(yǎng)料要求無明顯氨味，無酸臭味。

3） 配方2～配方5：物料復配

配方2～配方5按照表1的要求和原料比例混合草菇菌渣培養(yǎng)料和常規(guī)培養(yǎng)料。

1.5.2 二次發(fā)酵

將培養(yǎng)料進棚上架后，調(diào)節(jié)料內(nèi)含水量約為68%，關閉通風口。培養(yǎng)料不再升溫時，使用鍋爐加溫，至料溫62℃后維持24 h，滅火后通風降溫至52℃左右，以后每天通風1 h～2 h，控制料溫48℃～52℃，維持72 h。之后加大通風，使料溫在24 h內(nèi)降至40℃，即完成二次發(fā)酵過程。

1.5.3 接種和發(fā)菌管理

料溫降至28℃以下即可接種。接種前調(diào)節(jié)培養(yǎng)料表面的pH為7.2～7.8，含水率約65%。接種量約500 g·m-2，播種后控制料溫在22℃～25℃，空氣相對濕度在70%～75%。

1.5.4 覆土和出菇管理

當菌絲長滿培養(yǎng)料的三分之二，料溫20℃以下時搔菌、覆土，覆土厚度為3.5 cm～4.0 cm。當菌絲在土層內(nèi)充分伸展時，噴水降溫通風，控制菇棚內(nèi)空氣相對濕度保持85%～90%，棚溫15℃～17℃，二氧化碳濃度不高于0.15%。子實體直徑為3 cm～5 cm，菌膜未破裂時進行采收。

1.6 測定內(nèi)容及方法

1.6.1 樣品的采集及預處理

采集草菇菌渣培養(yǎng)料（B）一次發(fā)酵前、后和6個配方二次發(fā)酵后的培養(yǎng)料樣品。取樣方法為：在料堆選取4個點，每個點取樣約250 g，共取樣品1 000 g[12]?；旌喜⒓皶r帶回實驗室，充分混勻，取100 g樣品烘干，粉碎至0.15 mm以下。

1.6.2 pH及碳、氮指標的檢測

采用電位法測定培養(yǎng)料原料的pH；高溫電爐灼燒法測定培養(yǎng)料原料及各配方中的碳含量；凱氏定氮法測定培養(yǎng)料原料及各配方中的全氮[13]。

1.6.3 農(nóng)藝性狀及生物學效率

在菌絲生長階段，調(diào)查并記錄雙孢蘑菇的菌絲生長情況，即菌絲的顏色及粗壯程度。觀察并記錄其子實體形態(tài)特征及生長情況，測量每個配方前四潮菇的產(chǎn)量、總產(chǎn)量及生物學效率。生物學效率（R，%）的計算公式為：

式中：Y為鮮菇產(chǎn)量（kg）；W為培養(yǎng)料干質(zhì)量（kg）。

1.6.4 數(shù)據(jù)分析

用數(shù)據(jù)配方軟件SPSS 18中的LSD法對產(chǎn)量進行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試原料的主要理化性狀

對培養(yǎng)料中主要原料的pH、含碳量、全氮和碳氮比進行檢測計算，其結(jié)果詳見表2。

表2 原料的主要理化性狀Tab.2 The main physical and chemical properties of raw materials

2.2 培養(yǎng)料的碳、氮指標

不同處理方式對草菇菌渣培養(yǎng)料（B）中碳、氮含量的影響見表3。

表3 草菇菌渣培養(yǎng)料（B）的碳、氮含量Tab.3 The carbon and nitrogen content of Volvariella volvacea chaff substrate(B)

由表3可知，發(fā)酵對草菇菌渣培養(yǎng)料的影響較大。草菇菌渣經(jīng)發(fā)酵后含氮量上升，碳氮比下降，達到適宜雙孢蘑菇栽培的最佳范圍[14]。一次發(fā)酵時不同翻堆次數(shù)后，菌渣的指標發(fā)生一定程度的變化，表現(xiàn)為含碳量下降，含氮量略微下降，說明草菇菌渣培養(yǎng)料中纖維素等成分發(fā)生了一定程度的分解。

二次發(fā)酵對6個不同配方培養(yǎng)料中碳、氮含量的影響見表4。

表4 不同配方二次發(fā)酵培養(yǎng)料的碳、氮含量Tab.4 The carbon and nitrogen contents of secondary fermentation substrates with different formulas

由表4可知，經(jīng)二次發(fā)酵后，配方1草菇菌渣培養(yǎng)料的含碳量繼續(xù)下降，含氮量也有一定降低，說明物料中纖維素等成分進一步分解，并有氨氣釋放。不同配方各指標差別較大，配方CK常規(guī)培養(yǎng)料中的含碳量最高，含氮量最低；配方1草菇菌渣培養(yǎng)料含碳量最低，說明相比常規(guī)培養(yǎng)料，草菇菌渣具有更高的腐熟度和更低的碳素營養(yǎng)而含氮量相對較高，為2.01%；配方3與配方4含碳量與含氮量相差不多。配方5相比配方2含碳量和含氮量均更高，說明少翻堆一次可以減少養(yǎng)分損耗。

2.3 雙孢蘑菇的菌絲生長情況

6個不同配方對雙孢蘑菇菌絲生長的影響見表5。

表5 不同配方下雙孢蘑菇的菌絲生長情況Tab.5 The mycelial growth of Agaricus bisporus under different formulas

由表5可以看出，試驗各配方菌絲長勢差別較大，配方CK和配方3的菌絲生長速度和長勢較好，配方1的菌絲生長速度和長勢最差。相比配方2、配方4和配方5，配方3的菌絲生長速度更快，菌絲長勢更好，菌絲濃白，無雜菌污染，說明相比常規(guī)培養(yǎng)料，雙孢蘑菇菌絲在草菇菌渣含量較多的培養(yǎng)料中的生長較差，抗雜菌能力減弱，可能是因為草菇菌渣透氣性差，料中廢氣較難排出，抑制了雙孢蘑菇菌絲的生長。說明在常規(guī)培養(yǎng)料中添加草菇菌渣需適量，添加量較少時對生產(chǎn)過程影響不大，添加量較大時則會對生產(chǎn)構成不利影響。相比配方2，配方5的菌絲長勢較差，說明草菇菌渣培養(yǎng)料翻堆2次后仍可能存在氨氣含量高的問題，對雙孢蘑菇的菌絲生長造成不利影響。

2.4 雙孢蘑菇子實體的生長情況和產(chǎn)量

6個不同配方對雙孢蘑菇子實體的生長情況和產(chǎn)量的影響見表6。

表6 不同配方雙孢蘑菇子實體的生長情況和產(chǎn)量Tab.6 The growth and yield of fruit body of Agaricus bisporus with different formulas

由表6可以看出，各配方原基發(fā)生時間、商品性狀、產(chǎn)量等差異較大，以配方CK表現(xiàn)最好，表現(xiàn)為菇型圓潤緊實、出菇密集，后期產(chǎn)量高。其次是配方3，配方3相比配方CK原基發(fā)生時間及各潮產(chǎn)量基本相當，差異不顯著，但出菇密度低，菇體不夠緊實，說明在常規(guī)培養(yǎng)料中添加草菇菌渣培養(yǎng)料可滿足雙孢蘑菇生長，達到較高的產(chǎn)量，但存在碳源等養(yǎng)分相對不足的問題，造成子實體品質(zhì)的下降。配方1和配方4表現(xiàn)最差，表現(xiàn)為子實體松軟，菇體不夠潔白、圓潤，產(chǎn)量較低，說明草菇菌渣培養(yǎng)料不適宜單獨或較大量作為雙孢蘑菇培養(yǎng)料。配方2和配方5表現(xiàn)居中，表現(xiàn)為出菇早、菇體不夠緊實，前期產(chǎn)量高、后期產(chǎn)量低等特點，尤其是配方5出菇最早，說明在常規(guī)培養(yǎng)料中添加草菇菌渣培養(yǎng)料可能促進雙孢蘑菇菌絲較早成熟，這同前期碳、氮指標中配方5優(yōu)于其他配方的結(jié)果一致。但從產(chǎn)量上看，配方5低于配方CK和配方3，可能是由于草菇菌渣培養(yǎng)料的透氣性偏差，有氨氣殘留，導致鬼傘污染，一潮菇產(chǎn)量低；又因為長效養(yǎng)分的缺乏，導致三潮菇和四潮菇的產(chǎn)量也較低。但值得注意的是，配方5二潮菇產(chǎn)量與配方CK基本持平，說明草菇菌渣培養(yǎng)料在出菇前期的營養(yǎng)供給比較充足。相比配方2，配方5出菇早、中后期產(chǎn)量高，說明在草菇菌渣培養(yǎng)料制備時，翻堆次數(shù)過多易造成養(yǎng)分尤其是碳素營養(yǎng)的損耗。

2.5 成本及效益分析

6個不同配方對成本及效益的影響見表7。

由表7可以看出，各配方雙孢蘑菇栽培成本、產(chǎn)出、產(chǎn)值各不相同。從產(chǎn)量和產(chǎn)值上看，使用常規(guī)培養(yǎng)料最高；其次配方3、配方5和配方2的產(chǎn)量和產(chǎn)值也較好，均高于80元/m2；配方1和配方4的產(chǎn)量和產(chǎn)值較低，尤其是配方1的產(chǎn)值僅為30元/m2。從純利潤上看，配方3最高，其次是CK和配方5，而配方1和配方4最差，說明在常規(guī)培養(yǎng)料中少量添加草菇菌渣培養(yǎng)料可以在保障產(chǎn)量的同時減少栽培成本，提高生產(chǎn)效益；添加量過多則嚴重影響產(chǎn)量，降低生產(chǎn)效益。

3 結(jié)論與討論

試驗結(jié)果表明，在雙孢蘑菇常規(guī)培養(yǎng)料中添加不同比例的草菇菌渣培養(yǎng)料，對雙孢蘑菇的菌絲和子實體生長發(fā)育影響差別較大。各配方中以常規(guī)培養(yǎng)料∶草菇菌渣培養(yǎng)料為13∶7時的產(chǎn)量最高，效益最好，相比CK生產(chǎn)效益提高3元/m2，但子實體商品性狀受一定影響。草菇菌渣培養(yǎng)料添加量占比50%以上時，產(chǎn)量明顯下降，雜菌污染加重，栽培效益降低。純草菇菌渣培養(yǎng)料栽培時的產(chǎn)量和效益最差。

草菇菌渣培養(yǎng)料經(jīng)高溫發(fā)酵和草菇分解后，養(yǎng)分得到釋放，物料得到分解，添加適當比例的糞肥發(fā)酵后，各項營養(yǎng)指標均符合雙孢蘑菇栽培的標準，但透氣性稍差。與常規(guī)培養(yǎng)料適當配比后可達到理想狀態(tài)，確保產(chǎn)量的同時降低了成本。同時，草菇菌渣培養(yǎng)料還能提供較多的速效養(yǎng)分，有利于菌絲的成熟和分化，提早出菇。

為促進草菇菌渣培養(yǎng)料升溫和加強養(yǎng)分供應，在其中加入了雞糞作為輔料。這雖然提高了物料含氮量，但同時導致原料內(nèi)氨態(tài)氮含量過高。且因培養(yǎng)料透氣性偏差，氨氣排出不充分，在菌絲生長階段仍有殘留，影響了后期的發(fā)菌和出菇，造成了草菇菌渣培養(yǎng)料添加量較大的幾個配方出現(xiàn)鬼傘等雜菌污染，影響了產(chǎn)量和效益。同時，試驗中發(fā)現(xiàn)菌渣在翻堆次數(shù)過多后易出現(xiàn)碳素養(yǎng)分損耗過度，產(chǎn)量降低。為更好地利用草菇菌渣栽培雙孢蘑菇，可對草菇菌渣培養(yǎng)料的制備和栽培管理做進一步優(yōu)化，具體建議如下。

1）降低雞糞使用量或?qū)㈦u糞單獨發(fā)酵釋放氨氣后再使用。

2）使用牛糞、豆粕、玉米粉等代替雞糞。

3） 栽培過程中適當使用氨基酸肥、葡萄糖、磷酸二氫鉀等速效肥料補充養(yǎng)分，提高子實體商品性狀。