鐘寶珠，蒙太高，2，呂朝軍*，闞金濤，李文蓮

（1.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院椰子研究所 海南省檳榔產(chǎn)業(yè)工程研究中心， 海南 文昌 571339；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，云南 昆明 650000）

褐帶卷蛾繭蜂（Bracon adoxophyesiMinami?kawa）隸屬于膜翅目（Hymenoptera）繭蜂科（Braco?nidae）繭蜂屬（Bracon），是紅脈穗螟（Tirathaba ru?fivenaWalker）體外寄生蜂［1-3］，可寄生紅脈穗螟的中、高齡幼蟲(chóng)和預(yù)蛹。該寄生蜂產(chǎn)卵時(shí)先將寄主麻痹，然后產(chǎn)卵于其幼蟲(chóng)體表，當(dāng)褐帶卷蛾繭蜂幼蟲(chóng)發(fā)育至老熟后，即在寄主尸體周?chē)Y(jié)繭化蛹［4］。前人研究表明褐帶卷蛾繭蜂不僅可寄生紅脈穗螟，同時(shí)對(duì)椰子木蛾（Opisina arenosellaWalker）也有較好的寄生效果，在補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)條件下成蟲(chóng)期達(dá)60 d左右，單頭雌蜂1 d可麻痹椰子木蛾高齡幼蟲(chóng)6頭左右［5］。

寄生蜂產(chǎn)卵量會(huì)受到環(huán)境因子影響，合理、高效的寄生蜂繁育技術(shù)，不僅可提高寄生蜂的繁育效率，同時(shí)可降低繁育成本，以便于更好將其應(yīng)用于害蟲(chóng)的生物防治［6］。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于褐帶卷蛾繭蜂繁育技術(shù)研究較少，呂朝軍等研究表明采用大蠟螟為替代寄主，對(duì)褐帶卷蛾繭蜂繁育效果要優(yōu)于米蛾和黃粉蟲(chóng)，且最佳接種蜂蟲(chóng)比為1∶1和2∶1［1］，同時(shí)篩選出最佳的繁育器材為60目網(wǎng)管［7］。為提高褐帶卷蛾繭蜂的繁育效率，并為該蜂的后期應(yīng)用提供技術(shù)儲(chǔ)備，本文系統(tǒng)研究了溫濕度、補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)、接種密度等對(duì)褐帶卷蛾繭蜂產(chǎn)卵量、孵化率、羽化率及發(fā)育歷期等多項(xiàng)指標(biāo)的影響，以期為該寄生蜂的室內(nèi)規(guī)?；庇峁├碚撘罁?jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

褐帶卷蛾繭蜂采集于檳榔園中，在室內(nèi)選用大蠟螟（Galleria mellonellaLinnaeus）為寄主連續(xù)擴(kuò)繁不少于10代，試驗(yàn)選用羽化24 h內(nèi)，且已交配的健康成蟲(chóng)供試。

紅脈穗螟采集于檳榔園，室內(nèi)選用檳榔心葉繁育不少于3代，試驗(yàn)時(shí)選用預(yù)蛹供試。

1.2 試驗(yàn)方法

除溫、濕度實(shí)驗(yàn)外，所有試驗(yàn)均在溫度27 ℃、75% RH、光照L∶D=12∶12的人工氣候培養(yǎng)箱中進(jìn)行。

1.2.1 溫度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂繁殖影響

將紅脈穗螟預(yù)蛹5頭置于50 mL的透氣離心管中，接入交尾后的褐帶卷蛾繭蜂雌成蟲(chóng)2頭，置于培養(yǎng)箱中。設(shè)置18、2l、24、27、30 ℃共5個(gè)處理，相對(duì)濕度為75%。顯微鏡下持續(xù)觀察寄主體表著卵量至不再增加為止，統(tǒng)計(jì)寄生蜂初孵幼蟲(chóng)、蛹及成蟲(chóng)的數(shù)量，計(jì)算卵孵化率、化蛹率和羽化率。同時(shí)統(tǒng)計(jì)各蟲(chóng)態(tài)歷期，其中成蟲(chóng)期的計(jì)算為從羽化起單獨(dú)飼養(yǎng)直至死亡。每處理重復(fù)3次。

卵孵化率/%=初孵幼蟲(chóng)數(shù)/產(chǎn)卵數(shù)×100；

化蛹率/%=化蛹數(shù)/初孵幼蟲(chóng)數(shù)×100；

羽化率/%=羽化成蟲(chóng)數(shù)/化蛹數(shù)×100。

1.2.2 相對(duì)濕度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂繁殖影響

選擇初羽化并交尾24 h內(nèi)的褐帶卷蛾繭蜂雌蜂5頭置于產(chǎn)卵盒（9 cm×6 cm×3 cm）中，每盒放

隨溫度降低，褐帶卷蛾繭蜂各蟲(chóng)態(tài)的發(fā)育時(shí)間均延長(zhǎng)（圖1）。以18 ℃處理為例，卵期、幼蟲(chóng)期、蛹期及成蟲(chóng)期相比27℃處理分別延長(zhǎng)53.46%、58.57%、32.41%和71.94%，總發(fā)育歷期延長(zhǎng)52.61%（圖2），達(dá)到顯著差異水平。其中在18 ℃和21 ℃處理之間、24 ℃和27 ℃處理之間及27 ℃和30 ℃處理之間，各蟲(chóng)態(tài)及總發(fā)育歷期的長(zhǎng)度之間無(wú)顯著差異。

圖1 溫度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂各蟲(chóng)態(tài)發(fā)育歷期影響Fig.1 Effect of temperature on the different stage duration of B.adoxophyesi

圖2 溫度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂總發(fā)育歷期影響Fig.2 Effect of temperature on total developmental duration of B.adoxophyesi

2.2 濕度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂繁殖影響

濕度變化對(duì)褐帶卷蛾繭蜂產(chǎn)卵量、孵化率、化蛹率均無(wú)顯著影響，但可干擾成蟲(chóng)羽化（表2）。在置紅脈穗螟預(yù)蛹10頭。將產(chǎn)卵盒置于培養(yǎng)箱中，設(shè)置55%、65%、75%、85%、95%共5個(gè)相對(duì)濕度（relative humidity，RH）處理，溫度為27 ℃。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)同1.2.1。每個(gè)處理重復(fù)3次。

表2 相對(duì)濕度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂繁殖效果影響Table2 Efftcts of realative humidity（RH） on reproductive effect of B. adoxophyesi

1.2.3 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)褐帶卷蛾繭蜂繁殖影響

將初羽化并已交尾的褐帶卷蛾繭蜂雌蜂5頭，置于產(chǎn)卵盒（9 cm×6 cm×3 cm）中，每盒放置紅脈穗螟預(yù)蛹10頭。設(shè)飼喂10%蜂蜜水和飼喂清水（對(duì)照）處理。將產(chǎn)卵盒置27 ℃，75% RH下培養(yǎng)。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)同1.2.1。每個(gè)處理重復(fù)3次。

1.2.4 接種密度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂繁殖影響

挑選初羽化褐帶卷蛾繭蜂成蟲(chóng)，分別以1、2、4、6、8對(duì)蜂處理放入養(yǎng)蟲(chóng)盒中（15 cm×20 cm×10 cm）。將浸有10%蜂蜜水的脫脂棉球掛在蜂箱側(cè)面作為成蜂食源，27 ℃，75% RH下令寄生蜂交配。挑選紅脈穗螟預(yù)蛹20頭分別放入養(yǎng)蟲(chóng)盒中。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)同1.2.1。每個(gè)處理重復(fù)3次。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用Excel和SPSS V21.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，多重比較采用Duncan氏新復(fù)極差法（DMRT法）；將全部初始數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，消除綱量的影響，然后進(jìn)行主成分分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 溫度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂繁殖影響

溫度變化會(huì)影響褐帶卷蛾繭蜂產(chǎn)卵量（表1）。在供試5個(gè)溫度處理中，以18 ℃處理單雌產(chǎn)卵量最少，比30 ℃處理減少35.49%，而在21~30 ℃褐帶卷蛾繭蜂的單雌產(chǎn)卵量之間差異不顯著。同時(shí)研究結(jié)果表明，供試范圍內(nèi)各溫度處理的卵孵化率、化蛹率及成蟲(chóng)羽化率均無(wú)顯著差異。供試濕度處理范圍內(nèi)，95%RH和55%RH處理組羽化率均最小，且差異不顯著，分別為68.35%和66.73%，而75%RH處理羽化率最高（81.99%），比95%RH和55%RH處理分別提高13.64%和15.26%。

表1 溫度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂繁殖效果影響Table 1 Efftcts of temperature on reproductive effect of B. adoxophyesi

濕度變化對(duì)褐帶卷蛾繭蜂卵期和幼蟲(chóng)期均無(wú)顯著影響，但會(huì)影響蛹期、成蟲(chóng)期和整個(gè)發(fā)育歷期長(zhǎng)度（圖3，圖4）。隨濕度增加，蛹期、成蟲(chóng)期和整個(gè)發(fā)育歷期均顯著增加，以整個(gè)發(fā)育歷期為例，55%、65%、75%、85%和95%濕度下，總發(fā)育歷期分 別 為19.50、20.83、22.67、24.00和25.33 d，95%濕度處理比55%和65%處理的總發(fā)育歷期分別延長(zhǎng)29.90%和21.60%。

圖3 相對(duì)濕度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂各蟲(chóng)態(tài)發(fā)育歷期影響Fig.3 Effect of realative humidity on the different stage duration of B. adoxophyesi

圖4 相對(duì)濕度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂總發(fā)育歷期影響Fig.4 Effect of realative humidity on total developmental duration of B. adoxophyesi

2.3 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)褐帶卷蛾繭蜂繁殖影響

對(duì)褐帶卷蛾繭蜂補(bǔ)充10%蜂蜜水后，產(chǎn)卵量比飼喂清水處理提高約61.04%（表3），此結(jié)果表明通過(guò)補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)后，雌蟲(chóng)體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)增加導(dǎo)致產(chǎn)卵量提高。通過(guò)補(bǔ)充蜂蜜水后，成蟲(chóng)期約延長(zhǎng)71.70%（圖5），整個(gè)發(fā)育歷期約延長(zhǎng)21.45%（圖6）。

表3 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)褐帶卷蛾繭蜂繁殖效果影響Table3 Efftcts of supplementary nutrients on reproductive effect of B. adoxophyesi

圖5 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)褐帶卷蛾繭蜂各蟲(chóng)態(tài)發(fā)育歷期影響Fig.5 Effect of supplementary nutrients on the different stage dura?tion of B. adoxophyesi

圖6 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)對(duì)褐帶卷蛾繭蜂總發(fā)育歷期影響Fig.6 Effect of supplementary nutrients on total developmental du?ration of B. adoxophyesi

2.4 接種密度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂寄生效能和后代影響

接種密度變化會(huì)顯著影響褐帶卷蛾繭蜂的單雌產(chǎn)卵量，在各處理中以接種4對(duì)和6對(duì)寄生蜂處理組的單雌產(chǎn)卵量最高，分別為44.67粒和44.33粒，但對(duì)卵孵化率、化蛹率和成蟲(chóng)羽化率無(wú)影響（表4）。供試接種密度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂不同蟲(chóng)態(tài)和整個(gè)世代的發(fā)育歷期均無(wú)顯著影響（圖7、圖8）。

圖7 接種密度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂各蟲(chóng)態(tài)發(fā)育歷期影響Fig.7 Effect of inoculation density on the different stage duration of B. adoxophyesi

圖8 接種密度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂總發(fā)育歷期影響Fig.8 Effect of inoculation density on total developmental duration of B. adoxophyesi

表4 接種密度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂繁殖效果影響Table 4 Efftcts of inoculation density on reproductive effect of B. adoxophyesi

2.5 褐帶卷蛾繭蜂繁育的影響因子主成分分析

利用SPSS V21.0軟件先對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，使其服從正態(tài)分布，并消除綱量影響之后進(jìn)行主成分分析。對(duì)褐帶卷蛾繭蜂的產(chǎn)卵量、孵化率、化蛹率、羽化率以及發(fā)育歷期的指標(biāo)進(jìn)行主成分分析，共提取到特征根大于1的主成分3個(gè)（表5）。其中第1主成分的特征值為3.15，方差貢獻(xiàn)率為35.03%，主要表現(xiàn)為褐帯卷蛾繭蜂卵期、幼蟲(chóng)期、蛹期、成蟲(chóng)期和總體發(fā)育歷期占有較大的系數(shù)；第2主成分的特征值為2.37，方差貢獻(xiàn)率為26.28%，在第2主成分中化蛹率、羽化率、孵化率和單雌產(chǎn)卵量有較大的正系數(shù)值，即第2主成分和褐帯卷蛾繭蜂的化蛹率、羽化率、孵化率和單雌產(chǎn)卵量呈正相關(guān)；第3主成分的特征值為1.38，方差貢獻(xiàn)率為15.36%，主要和蛹期、單雌產(chǎn)卵量、孵化率呈正相關(guān)，前3個(gè)主成分的累積貢獻(xiàn)率達(dá)到76.67%。

表5 主成分的相關(guān)系數(shù)、特征值、貢獻(xiàn)率和累計(jì)貢獻(xiàn)率Table 5 Coefficient， characteristic value， variance contribution rate and accumulated contribution rate of principal components

根據(jù)主成分因子得分系數(shù)矩陣得到各成分因子得分模型為：

以各成分對(duì)應(yīng)方差貢獻(xiàn)率為權(quán)重，根據(jù)主成分得分和對(duì)應(yīng)的權(quán)重線(xiàn)性加權(quán)求和得到各主成分得分、綜合得分和排名結(jié)果見(jiàn)表6，得到綜合評(píng)分模 型 函 數(shù) 為：F=0.350 3×F1+0.262 8×F2+0.153 6×F3，結(jié)果顯示接蜂密度為4對(duì)寄生蜂的綜合評(píng)分最高為1.41，即在本試驗(yàn)條件下，當(dāng)接蜂密度為4對(duì)，褐帯卷蛾繭蜂可以獲得較高的單雌產(chǎn)卵量、孵化率、化蛹率和羽化率，對(duì)寄生蜂繁殖有利。

表6 主成分得分和綜合得分Table 6 Principal component score and comprehensive score

3 討論

溫度變化對(duì)昆蟲(chóng)卵的孵化、幼蟲(chóng)發(fā)育、化蛹和羽化功能等均會(huì)造成影響，并因昆蟲(chóng)種類(lèi)不同而有差異［8-9］。林玉英等［5］研究發(fā)現(xiàn)隨溫度降低，褐帶卷蛾繭蜂世代歷期顯著延長(zhǎng)。本研究結(jié)果表明，隨溫度降低，褐帶卷蛾繭蜂的產(chǎn)卵量減少，同時(shí)各蟲(chóng)態(tài)發(fā)育時(shí)間均延長(zhǎng)，進(jìn)一步說(shuō)明可通過(guò)適當(dāng)提高繁育溫度來(lái)增加褐帶卷蛾繭蜂的產(chǎn)卵量，并縮短發(fā)育歷期。相對(duì)濕度對(duì)昆蟲(chóng)體內(nèi)代謝起作用，進(jìn)一步影響與此有關(guān)的繁殖、生長(zhǎng)發(fā)育、存活率等［10］，如切割潛蠅繭蜂在35%RH條件下不能正常交配并繁殖后代。本研究中濕度對(duì)褐帶卷蛾繭蜂產(chǎn)卵量、孵化率、化蛹率等無(wú)影響，但會(huì)干擾成蟲(chóng)羽化率并影響整個(gè)發(fā)育歷期，各供試濕度中以75%RH的羽化率最高，可作為該蟲(chóng)大量繁育的參考濕度。

適當(dāng)?shù)难a(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)可提高蟲(chóng)體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)水平，進(jìn)而對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育和產(chǎn)卵等行為造成影響，此現(xiàn)象已在昆士蘭果蠅（Bactrocera tryoniFroggatt）和南亞實(shí)蠅（Bactrocera tauWalker）上的研究上得到證實(shí)［11-12］。在寄生蜂繁育方面，以10%蜂蜜水+粉蚧蜜露為營(yíng)養(yǎng)時(shí)可延長(zhǎng)亞金跳小蜂（Aenasius bambawaleiGi-rault）壽命并提高其種群適合度［13］，同時(shí)補(bǔ)充蜂蜜、葡萄糖、蔗糖、果糖等糖類(lèi)營(yíng)養(yǎng)均能顯著延長(zhǎng)豌豆?jié)撓壖》洌―iglyphus isaeaWalker）的壽命［14］。在本研究中，對(duì)褐帶卷蛾繭蜂補(bǔ)充10%蜂蜜水后，成蟲(chóng)期比對(duì)照約延長(zhǎng)71.70%，整個(gè)發(fā)育歷期延長(zhǎng)21.45%，同時(shí)產(chǎn)卵量也顯著增加，說(shuō)明在褐帶卷蛾繭蜂繁育過(guò)程中，增加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可提高擴(kuò)繁效率。

適宜的寄生蜂接種密度，對(duì)于提高繁育效果具有重要意義。前人研究表明煙蚜繭蜂（Aphid?ius gifuensisAshmead）在低寄主密度下傾向于過(guò)寄生，在高寄主密度下有避免過(guò)寄生的趨勢(shì)［15］。本文研究顯示，在接種4對(duì)和6對(duì)寄生蜂的單雌產(chǎn)卵量最高，且兩者間無(wú)顯著異，同時(shí)在本試驗(yàn)過(guò)程中，觀察到在寄生蜂密度達(dá)到一定程度后，寄生蜂自身之間會(huì)干擾相互之間的產(chǎn)卵行為，因此在褐帶卷蛾繭蜂繁育過(guò)程中保持適度的寄生蜂密度可提高繁育效率。通過(guò)主成分分析，本研究得出3個(gè)特征值大于1的主成分，且累計(jì)方差貢獻(xiàn)率達(dá)到76.67%，同時(shí)通過(guò)對(duì)主成分得分和綜合得分進(jìn)行統(tǒng)計(jì)排序，結(jié)果顯示接蜂密度為4對(duì)處理組的綜合評(píng)分最高為1.41，對(duì)褐帯卷蛾繭蜂的繁育更有利。

眾所周知，現(xiàn)階段害蟲(chóng)防控技術(shù)中化學(xué)防治仍占主導(dǎo)地位［16-17］，但隨著消費(fèi)者對(duì)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量要求的提高及化學(xué)防治中藥劑的殘留危害問(wèn)題［18］，無(wú)藥化防治逐步提上日程，生物防治技術(shù)也開(kāi)始受到重視［19］。寄生蜂作為重要的生物防治因子，已在美國(guó)白蛾（Hyphantria cuneaDrury）、松墨天牛（Monochamus alternatusHope）等［20-21］的防治上廣泛應(yīng)用，以后也必將在其它害蟲(chóng)的防治上逐漸推廣，這其中就需要解決寄生蜂規(guī)?；庇年P(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題。在本研究中我們發(fā)現(xiàn)繁育溫度、濕度、接種密度等均會(huì)對(duì)褐帶卷蛾繭蜂的發(fā)育造成影響，相關(guān)研究結(jié)果對(duì)于其它種類(lèi)寄生蜂規(guī)?；庇哂幸欢ǖ慕梃b意義，同時(shí)本研究中溫濕度、營(yíng)養(yǎng)添加和密度效應(yīng)之間的交互效應(yīng)關(guān)系、溫濕度、密度和營(yíng)養(yǎng)的雙因素和三因素關(guān)系等均有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

本文研究了不同溫度、濕度、補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)及寄生蜂接種密度下，褐帶卷蛾繭蜂的繁育效果，以期為該寄生蜂的規(guī)?；庇峁┘夹g(shù)支撐。結(jié)果表明，從產(chǎn)卵量、孵化率、化蛹率、羽化率及發(fā)育歷期等方面綜合考慮，在本研究供試條件下，褐帶卷蛾繭蜂的最佳繁育溫度為21~30 ℃之間；各相對(duì)濕度對(duì)單雌產(chǎn)卵量、卵孵化率、化蛹率、卵期和幼蟲(chóng)期長(zhǎng)度均無(wú)影響，但在75%RH下成蟲(chóng)羽化率最高，可作為該寄生蜂繁育的參考濕度；在褐帶卷蛾繭蜂接種過(guò)程中適當(dāng)添加補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)并控制接種密度均可提升繁育效果。