羅曉斌，黃定鵬

（1.廣州市黃埔區(qū)云埔社區(qū)醫(yī)院門診部，廣東廣州 510760；2.中國人民解放軍南部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院消化科，廣東廣州 510030）

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月至2020年12月中國人民解放軍南部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院收治的100例結(jié)直腸癌患者納入研究，按隨機(jī)數(shù)字表法將患者分為觀察組和對(duì)照組，各50例。觀察組患者中男性30例，女性20例；年齡46~77歲，平均年齡（67.16±8.11）歲；Dukes腫瘤分期：B期32例，C期18例。對(duì)照組患者中男性29例，女性21例；年齡47~78歲，平均年齡（67.23±8.04）歲；Dukes腫瘤分期：B期34例，C期16例。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），組間具有可比性。本研究經(jīng)中國人民解放軍南部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過，所有患者及家屬均對(duì)研究知情并簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《中國結(jié)直腸癌診療規(guī)范（2017年版）》[4]中結(jié)直腸癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)過病理學(xué)診斷證實(shí)；②治療前1個(gè)月內(nèi)未使用微生態(tài)活菌制劑。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在胃腸道手術(shù)史；②合并胃腸道炎癥或腸梗阻；③對(duì)益生菌過敏；④同時(shí)患有其他癌癥。

1.2 治療方法 兩組患者均行氟尿嘧啶注射液（華仁藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H20030565，規(guī)格：100 mL：氟尿嘧啶0.25 g與氯化鈉0.9 g）+奧沙利鉑甘露醇注射液（辰欣藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H20052531，規(guī)格：100 mL:奧沙利鉑50 mg與甘露醇5.1 g）化療方案治療，氟尿嘧啶注射液靜脈滴注350 mg/m2，連續(xù)靜脈滴注5 d，奧沙利鉑甘露醇注射液靜脈滴注130 mg/m2，靜脈滴注1 d，同時(shí)行常規(guī)盆腔放射治療，照射劑量50 Gy，5次/周，2 Gy/次，放療開始第1、5周均予以同步化療。兩組患者在放化療治療后5 d左右給予營養(yǎng)支持，以短肽型腸內(nèi)營養(yǎng)劑（Milupa GmbH，國藥準(zhǔn)字H20100287，規(guī)格：125 g/袋）為主要腸胃營養(yǎng)能源，前3 d按照125 g/d，以120 mL/h速度滴注，后2 d按照250 g/d，以120 mL/h速度滴注。放化療當(dāng)天對(duì)照組患者口服：奧美拉唑腸溶膠囊（海南普利制藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H20113282，規(guī)格：20 mg/粒），40 mg/d；頭孢呋辛酯片（蘇州中化藥品工業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H19990342，規(guī)格：0.25 g/片）4.5 g/d，進(jìn)行治療。觀察組患者在對(duì)照組基礎(chǔ)上加用雙歧桿菌四聯(lián)活菌（杭州遠(yuǎn)大生物制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字S20060010，規(guī)格：0.5 g/片），1.5 g/次，3次/d，連續(xù)服用7 d。

1.3 觀察指標(biāo) ①療效評(píng)價(jià)：按照WHO實(shí)體瘤療效評(píng)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)[5]，分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、疾病穩(wěn)定（SD）、疾病進(jìn)展（PD），疾病控制率=（CR+PR+SD）/總例數(shù)×100%。②腸道菌群檢測(cè)：放化療結(jié)束后第7天取患者5 g新鮮糞便，取0.5 g糞便加入5 mL生理鹽水稀釋10倍，連續(xù)稀釋法稀釋，并將其滴注于不同培養(yǎng)基上，選擇雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌、糞腸球菌進(jìn)行培養(yǎng)與計(jì)數(shù)。③腸道屏障功能檢測(cè)：放化療前及放化療結(jié)束后第7天抽取患者5 mL靜脈血，3 000 r/min轉(zhuǎn)速離心處理10 min，通過酶聯(lián)免疫吸附法利用二胺氧化酶/乳酸/細(xì)菌內(nèi)毒素聯(lián)檢試劑盒（北京中生金域診斷技術(shù)股份有限公司）測(cè)定D-乳酸（D-LAC）、二胺氧化酶（DAO）；尿乳果糖/甘露醇比值（L/M）測(cè)定：放化療前1晚禁食，放化療開始前清晨使患者排空膀胱并口服含乳果糖5 g、甘露醇2.5 g的測(cè)試液25 mL，2 h后正常飲食，服用6 h后收集尿液，取20 mL尿液并加入0.2 mg硫柳汞，-20 ℃冷藏，3 000 r/min轉(zhuǎn)速離心處理10 min，利用高效液相色譜儀[沃特世科技（上海）有限公司，型號(hào)：E2695]測(cè)定L/M，放化療結(jié)束后第6天晚上禁食，放化療結(jié)束后第7天早晨服用測(cè)試液并收集尿液，3 000 r/min離心處理后測(cè)定L/M。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以（）表示，組間對(duì)比采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)對(duì)比采取配對(duì)樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者臨床療效比較 兩組患者疾病控制率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組患者臨床療效比較 [例(%)]

2.2 兩組患者治療后腸道菌群比較 觀察組患者治療后腸道雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)顯著高于對(duì)照組，大腸桿菌、糞腸球菌數(shù)顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組患者治療后腸道菌群比較 [log(CFU/g)， ]

表2 兩組患者治療后腸道菌群比較 [log(CFU/g)， ]

組別 例數(shù) 雙歧桿菌 乳酸桿菌 大腸桿菌 糞腸球菌觀察組 50 9.55±0.69 9.49±0.67 7.92±0.59 8.61±0.61對(duì)照組 50 7.85±0.62 8.47±0.66 8.93±0.61 9.07±0.63 t值 12.959 7.669 8.415 3.709 P值 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 兩組患者治療后腸道屏障功能比較 兩組患者治療前D-LAC、DAO、L/M比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；兩組治療后D-LAC、DAO、L/M水平較治療前顯著降低，且觀察組顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 兩組患者治療后腸道屏障功能比較（ ）

表3 兩組患者治療后腸道屏障功能比較（ ）

注：與同組治療前比較，*P＜0.05。D-LAC：D-乳酸；DAO：二胺氧化酶；L/M：乳果糖/甘露醇比值。

組別 例數(shù)D-LAC（ng/mL） DAO（ng/mL） L/M治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后觀察組 50 12.37±1.88 9.76±1.52* 109.37±17.88 88.92±13.18* 2.14±0.27 1.17±0.18*對(duì)照組 50 12.41±1.89 10.83±1.53* 110.48±17.76 98.77±14.36* 2.15±0.36 1.33±0.27*t值 0.007 3.808 0.311 3.573 0.157 3.487 P值 0.994 0.001 0.756 0.000 0.876 0.001

3 討論

正常生理環(huán)境下的腸道菌群有著黏膜免疫功能，腸道菌群中的厭氧菌占比較多，且可以與腸道黏膜受體結(jié)合，形成生物屏障，減少病菌對(duì)機(jī)體的侵襲[6]。相當(dāng)一部分結(jié)直腸癌患者在治療前就已存在腸道菌群失衡與腸屏障功能減弱情況[7]，另外，結(jié)直腸癌患者在進(jìn)行放化療時(shí)所使用的藥物除了具有殺死腫瘤細(xì)胞的功效外，藥物本身的毒性也會(huì)對(duì)患者體內(nèi)正常細(xì)胞造成不良影響[8]，如破壞患者腸道細(xì)胞，致腸道菌群紊亂，侵襲諸如粒細(xì)胞等免疫細(xì)胞[9]，降低患者免疫力[10]，使革蘭陽性球菌、陰性桿菌等病原菌增殖，腸道菌群易位。同時(shí)，出于抗感染考慮，部分結(jié)直腸癌患者會(huì)服用慶大霉素等腸道抗菌藥物，對(duì)腸道厭氧菌的生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制，損害腸功能，厭氧菌的大量減少與需氧菌的大幅增多也使腸道菌群平衡受到打擊。另外，因放化療而產(chǎn)生的應(yīng)激狀態(tài)也可引起腸道缺氧，引起內(nèi)臟血管痙攣，炎性介質(zhì)增多，對(duì)腸黏膜造成損傷。

本次研究顯示，兩組患者的疾病控制率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示放化療期間加用雙歧桿菌四聯(lián)活菌并不會(huì)影響結(jié)直腸癌的治療效果。觀察組患者治療后腸道內(nèi)雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)顯著高于對(duì)照組，大腸桿菌、糞腸球菌數(shù)顯著低于對(duì)照組，這主要是雙歧桿菌四聯(lián)活菌中含有雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌，可有效與腸道上皮細(xì)胞結(jié)合，使腸道內(nèi)雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)量增多。同時(shí)，雙歧桿菌產(chǎn)生的脂肪酸也對(duì)大腸桿菌與糞腸球菌與大腸桿菌的過度繁殖加以抑制，使腸道感染得以緩解。史新龍等[11]選取60例直腸癌患者，對(duì)其行益生菌酪酸梭菌膠囊干預(yù)，比較治療前后的腸道菌群變化，發(fā)現(xiàn)干預(yù)后患者腸道菌群構(gòu)成得到明顯改善，且腸黏膜細(xì)胞間緊密性得以加強(qiáng)，腸道黏膜通透性降低，腸道免疫功能增強(qiáng)，與本次研究結(jié)果一致。

由于炎性介質(zhì)的釋放與內(nèi)臟血管的痙攣，導(dǎo)致結(jié)直腸癌患者的腸黏膜缺血和再灌注損傷，進(jìn)而使腸道通透性增強(qiáng)，腸屏障功能降低。相關(guān)研究表明，益生菌可通過免疫屏障對(duì)腫瘤進(jìn)行抑制，加速腫瘤組織的凋亡[12]。D-LAC、DAO、L/M均為評(píng)價(jià)腸屏障功能的重要指標(biāo)，DAO是一種活性細(xì)胞內(nèi)酶，D-LAC則是菌群代謝產(chǎn)物，DAO與D-LAC水平越高，腸黏膜損傷度越高，L/M比值越高，患者腸道通透性越高，腸黏膜連接部位遭到破壞越多。本次研究中觀察組患者治療后D-LAC、DAO、L/M顯著低于對(duì)照組，主要是由于益生菌的代謝產(chǎn)物可以形成機(jī)體抗原，機(jī)體抗原在進(jìn)入體內(nèi)淋巴細(xì)胞后，促進(jìn)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，減少體內(nèi)炎性介質(zhì)的釋放，增強(qiáng)抗炎細(xì)胞因子表達(dá)，從而達(dá)到減少患者腸黏膜損傷，提升腸屏障功能的目的。

綜上所述，益生菌可對(duì)結(jié)直腸癌患者腸道菌群的紊亂起到糾正作用，對(duì)腸屏障功能起到修復(fù)作用，有一定推廣價(jià)值。