水中的總氮含量是衡量水質(zhì)的重要指標(biāo)之一?？偟撬懈鞣N形態(tài)無機(jī)和有機(jī)氮的總量，包括NO3-、NO2-和NH4+等無機(jī)氮和蛋白質(zhì)、氨基酸、有機(jī)胺等有機(jī)氮，以每升水含氮毫克數(shù)計(jì)算，常被用來表示水體受營養(yǎng)物質(zhì)污染的程度。由于某批水樣總氮的測定結(jié)果為1.77mg/L，外檢結(jié)果為1.30mg/L，兩者存在較大差值，且在總氮測定過程中試劑空白的吸光度為0.168Abs，不符合國家標(biāo)準(zhǔn)方法中規(guī)定的“試劑空白吸光度不超過0.030Abs”的要求。因此，本文對總氮測定結(jié)果異常進(jìn)行試驗(yàn)研究。

一、儀器與試劑

1.儀器。紫外分光光度計(jì)、高壓蒸汽滅菌器、具塞玻璃磨口比色管。

2.試劑。（1）過硫酸鉀溶液（50g/L）：稱取25.0g的K2S2O8溶于200mL蒸餾水中，加入濃度為1mol/L的鹽酸2mL，用水稀釋至500mL。（2）NaOH溶液（50g/L）：稱取12.5g的NaOH溶于200mL蒸餾水中，用水稀釋至250mL，裝于聚乙烯瓶中。（3）鹽酸（1mol/L）：量取40.0mL濃鹽酸，溶于440mL蒸餾水中。（4）亞砷酸鈉溶液（100mg/L）：稱取100.0mL亞砷酸鈉，溶于適量蒸餾水中，稀釋至1000mL容量瓶中，使用前臨時(shí)配制。（5）硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液：①硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液。稱取0.7218g經(jīng)烘干的優(yōu)級純硝酸鉀放入250mL燒杯中，用無氨水溶解，移入1000mL容量瓶中，用無氨水定容。此溶液每毫升含100μg硝酸鹽氮。②硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)使用液。將硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液用無氨水稀釋10倍而得，每毫升含10μg硝酸鹽氮。

二、實(shí)驗(yàn)與方法

1.工作曲線的繪制。（1）分別吸取濃度為10.0μg/mL的總氮標(biāo)準(zhǔn)使用溶液0、1.0、2.0、4.0、7.0mL于比色管中，用蒸餾水稀釋至10mL。（2）加入濃度為5%的K2S2O8溶液2.0mL、濃度為5%的NaOH溶液1.5mL，塞緊磨口塞，以防蹦出。（3）將比色管放置于高壓蒸汽滅菌器中，使比色管在過熱水蒸氣中加熱1.5h。（4）自然冷卻，開閥放氣，移去外蓋，取出比色管，在水浴中趁熱加10滴亞砷酸鈉溶液（100mg/L），并恒溫放置5min。（5）加入濃度為1mol/L的鹽酸2.0mL，冷卻后用蒸餾水稀釋至25.0mL標(biāo)線。（6）在紫外可見分光光度計(jì)上，以蒸餾水作參比，用lcm石英比色皿分別在220nm及275nm波長處測定吸光度，用校準(zhǔn)的吸光度繪制工作曲線。

零濃度（空白）溶液和其他硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)使用溶液制得的標(biāo)準(zhǔn)系列完成全部分析步驟，于波長220nm和275nm處測定吸光度后，分別按下式求出除零濃度外其他標(biāo)準(zhǔn)系列的校正吸光度AS和零濃度的校正吸光度Ab及其差值A(chǔ)r。

AS=AS220-2AS275

Ab= Ab220-2Ab275

Ar=As-Ab

在上式中，AS220為標(biāo)準(zhǔn)溶液在220nm波長的吸光度，AS275為標(biāo)準(zhǔn)溶液在275nm波長的吸光度，Ab220為零濃度（空白）溶液在220nm波長的吸光度，Ab275為零濃度（空白）溶液在275nm波長的吸光度。按Ar值與相應(yīng)的NO3-N含量（μg）繪制校準(zhǔn)曲線。

2.水樣的測定步驟。用移液管移取10.00mL水樣（或取適量水樣），按上述校準(zhǔn)曲線步驟操作，然后按校正吸光度在校準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的總氮量，再用下列公式計(jì)算總氮量：

總氮（mg/L）=m/v

在上式中，m為從校準(zhǔn)曲線上查得的含氮量（μg），v為所取水樣體積（mL）。

三、結(jié)果與討論

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線可行性。配制一組總氮的標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液，分別在220nm及275nm波長處測定吸光度，計(jì)算吸光度A（A220-2A275）結(jié)果詳見表1，試劑空白的校正吸光度為0.168Abs。根據(jù)表1繪制的工作曲線，得出的計(jì)算公式為：y=0.0108x+0.0109，R2=0.00097。

從表1可以看出，雖然試驗(yàn)中試劑空白的校正吸光度為0.168Abs，高于國標(biāo)方法中規(guī)定的“試劑空白的吸光度不高于0.030Abs”，但若將標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度扣除試劑空白的吸光度后，建立的工作標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好，這說明實(shí)驗(yàn)中使用扣除空白所作的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線可行。

2.過硫酸鉀中含氮量檢查。針對從不同廠家購買的過硫酸鉀進(jìn)行氮含量的檢測，檢測結(jié)果詳見表2。從表2可以看出，一些品牌的過硫酸鉀中氮含量偏高，是造成試劑空白偏高的重要影響因素。

3.水樣實(shí)際測定。選擇某一品牌的過硫酸鉀，對試驗(yàn)水樣進(jìn)行總氮測定，測定過程中試劑空白的吸光度為0.028Abs，符合國標(biāo)方法要求。

四、結(jié)論及建議

HJ 636-2012《水質(zhì) 總氮的測定 堿性過硫酸鉀紫外分光光度法》在長期的使用過程中存在試劑空白吸光度偏高的問題，本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，總氮測定的空白偏高問題主要是由于試劑中氮含量偏高而造成的。要使得總氮測定的試劑空白吸光度滿足“不超過0.030Abs”的要求，必須對使用的過硫酸鉀試劑進(jìn)行空白檢測，檢測達(dá)標(biāo)后再投入使用。

作者簡介：溫春英（1990-），女，漢族，福建龍巖人，大學(xué)專科，助理工程師，研究方向?yàn)榄h(huán)境檢測。