蔣曉勤 袁荷芳 程 妍

(常州市食品藥品纖維質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心，常州 213000)

農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)的生產(chǎn)過程中有重要的作用，農(nóng)藥可以殺滅害蟲、真菌和其他威脅農(nóng)作物生長的生物，有效提高農(nóng)作物的產(chǎn)量。但是由于人們對農(nóng)藥的長期過量使用和濫用，農(nóng)藥殘留對食品的安全性及人類健康產(chǎn)生嚴重的不良影響[1]。因此，我國對多種農(nóng)藥都制定了限量標準[2]。近年來，果蔬中的農(nóng)藥殘留的檢測方法日漸增多，主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜法、液相色譜質(zhì)譜法等[3-7]。目前常用的前處理方法有液-液萃取法[8]、凝膠滲透色譜法[9]、固相萃取法[10]以及QuEchERS法等[11-13]。其中QuEchERS法具有快速、簡單、低廉、有效、穩(wěn)定和安全的特點，在2003年提出后[14]，該方法被廣泛應(yīng)用在瓜果蔬菜的多農(nóng)殘的檢驗。本實驗采用QuEchERS法處理樣品，前處理過程更簡潔、快速，結(jié)合氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜對果蔬中58種農(nóng)藥進行測定，可以用于農(nóng)殘的日常檢驗中。

1 實驗部分

1.1 實驗儀器

Agilent 7890A/7000B型三重四級桿氣質(zhì)聯(lián)用儀；7683型自動進樣器；Thermo Multif X3R型高速離心機；Talboys數(shù)顯型渦旋震蕩儀；Reeko型氮吹儀。

1.2 實驗耗材與標準品

QuEchERS萃取鹽包：4 g MgSO4，1 g NaCl，1 g 檸檬酸鈉，0.5 g 檸檬酸氫二鈉；

QuEchERS凈化鹽管：900mg硫酸鎂，150 mg PSA；

農(nóng)藥混合儲備液：某公司制備的多農(nóng)殘混合標準溶液，濃度為50 μg/mL；

乙腈(色譜純)；乙酸乙酯(色譜純)。

1.3 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀儀器條件

氣相色譜條件：

色譜柱：HP-5MS毛細管色譜柱(30m×0.25mm×0.25mm)；進樣口溫度為250℃，進樣方式為不分流進樣，進樣量為1μL。

質(zhì)譜條件：

電離方式：電化學電離；GC-MS-MS接口溫度：280 °C；離子源溫度：280 °C；掃描方式：MRM。

2 樣品前處理

稱取10 g試樣(精確至0.01 g)于50 mL塑料離心管中，加入10 mL乙腈、QuEchERS萃取鹽包及1顆陶瓷均質(zhì)子，蓋上離心管蓋，劇烈震蕩1 min后4200 r/min離心5 min。吸取6 mL上清液加到QuEchERS凈化鹽管內(nèi)，劇烈震蕩1 min后4200 r/min離心5 min，準確吸取2 mL上清液于10 mL試管中，40℃水浴中氮氣吹至近干。加入20μL的內(nèi)標溶液，加入1mL乙酸乙酯復溶，過微孔濾膜后測定。

3 結(jié)果與討論

3.1 標準曲線與檢出限

對多種農(nóng)藥混合標準溶液系列進行測定，并繪制標準曲線。將農(nóng)藥儲備液用乙酸乙酯為溶劑配成濃度為5、10、20、50、100、200ng/mL的標準溶液。以梨子作為空白基質(zhì)，吹到近干后加入20μL內(nèi)標溶液，取1mL標準溶液復溶基質(zhì)后進樣測定。結(jié)果表明：各農(nóng)藥的質(zhì)量分數(shù)均在0.01mg/kg～1mg/kg范圍內(nèi)與其對應(yīng)的峰面積呈線性關(guān)系，線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)見表1。以3倍信噪比和10倍信噪比確定各農(nóng)藥的檢出限(3S/N)和定量限(10S/N)，結(jié)果同樣見表1。

表1 各農(nóng)藥線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限和定量限

續(xù)表1

3.2 前處理方法的選擇

蔬菜水果中農(nóng)藥檢測的前處理主要是將目標化合物進行提取和凈化。在處理過程中，實驗用不同的試劑對其進行浸泡提取，常用的試劑有乙腈、丙酮、甲苯、正己烷、乙酸乙酯等。乙腈的極性較強，對絕大部分農(nóng)藥都有較好的溶解性，因此本方法采用的是乙腈作為提取試劑。

3.3 精密度與回收試驗

以梨子作為空白基質(zhì)，按照實驗中的實驗方法進行基質(zhì)加標回收率實驗，分別進行低、中、高(0.01、0.025、0.1mg/kg)3個濃度的加標回收實驗，回收率和相對標準偏差見表2。從結(jié)果可知，農(nóng)藥的的平均回收率在62%～138%之間，RSD為1.97%～17.26%，，部分農(nóng)藥在低水平的加標回收率大于120%，RSD大于15%，原因是當添加濃度比較低時，農(nóng)藥易受基質(zhì)中本底的干擾。

表2 回收率實驗

續(xù)表2

3.4 內(nèi)標法消除干擾

用三重四級桿方法監(jiān)測目標物的離子對，雖然專屬性較高，但由于食品基質(zhì)復雜，食品基質(zhì)具有增強或抑制效應(yīng)，會導致信號變強或變?nèi)?。實驗使用?nèi)標法消除干擾，提高實驗的準確度。在線性標準溶液和樣品目標液中同時加入環(huán)氧七氯作為內(nèi)標，通過內(nèi)標進行目標農(nóng)藥的校正，提高檢驗結(jié)果的準確度。同時使用內(nèi)標法和外標法進行3.3中的回收率實驗，結(jié)果表明內(nèi)標法的準確度更高，因此最終選取內(nèi)標法作為本實驗的定量方法。

3.5 樣品分析

按實驗方法對市場中的青菜、茄子、青椒、芹菜、梨、蘋果、芒果等蔬菜水果進行測定。檢出農(nóng)藥品種5種，檢出批次6批次，圖1為一小芹菜中檢出農(nóng)藥的MRM圖。

圖1 小芹菜中檢出農(nóng)藥殘留的MRM圖

4 結(jié)論

以QuEchERS法為前處理方法，采用氣相色譜串聯(lián)三重四級桿質(zhì)譜檢測技術(shù)，建立了蔬菜水果中58種農(nóng)殘的快速測定方法。這58種農(nóng)藥的質(zhì)量分數(shù)均在0.01mg/kg～1mg/kg 內(nèi)與其對應(yīng)的峰面積呈線性關(guān)系。在3個水平的加標回收率在62～138%，相對標準偏差為1.97～17.26%。本方法簡便、快速、有機溶劑消耗較少，靈敏度高，經(jīng)方法學驗證，能夠滿足農(nóng)藥殘留的日常檢驗。