李向新，蔣 丹，劉建朝，蘇文清，張 潔，張 玨

(1.唐山市水產(chǎn)技術(shù)推廣站，河北 唐山 063000；2.唐山市曹妃甸區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河北 唐山 063000；3.唐山市豐南區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河北 唐山 063000)

2001 年唐山市引入南美白對(duì)蝦進(jìn)行小規(guī)模池塘養(yǎng)殖試驗(yàn)，2003 年開始在全市范圍內(nèi)進(jìn)行全面推廣，目前已成為唐山市對(duì)蝦養(yǎng)殖主要品種之一，養(yǎng)殖面積達(dá)10 萬余畝，年產(chǎn)量1.5 萬噸以上。養(yǎng)殖模式由單一的池塘養(yǎng)殖發(fā)展為池塘養(yǎng)殖、鹽田晾水池養(yǎng)殖、小棚養(yǎng)殖、工廠化養(yǎng)殖等多種模式。隨著南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖的迅猛發(fā)展，苗種產(chǎn)業(yè)也快速發(fā)展起來。經(jīng)調(diào)研，唐山現(xiàn)擁有南美白對(duì)蝦苗種場(chǎng)近百家，育苗水體約18萬米3，年產(chǎn)蝦苗200多億尾，除滿足唐山的苗種需求外，還銷往天津及河北省周邊地市。由于唐山地處溫帶，南美白對(duì)蝦繁育的成本較高，因此唐山的南美白對(duì)蝦苗種場(chǎng)主要從海南、廣東、福建等地引進(jìn)P5仔蝦進(jìn)行標(biāo)粗，苗種品質(zhì)無法把控。

為了解和掌握南美白對(duì)蝦苗種主要疫病的基本狀況，對(duì)唐山市水生動(dòng)物疫病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、疫病預(yù)警、疫病防控及水產(chǎn)苗種產(chǎn)地檢疫提供科學(xué)依據(jù)，2018－2020 年唐山市水產(chǎn)技術(shù)推廣站針對(duì)目前常見及影響最大的白斑綜合征(White spot disease，WSD)、傳染性皮下及造血器官壞死病(Infectious hypodermal and haematopoietic necrosis，IHHN)、急性肝胰腺壞死病(Acute hepatopancreatic necrosis disease，AHPND)、蝦肝腸胞蟲病(Enterocytozoon hepatopenaei disease，EHPD)、蝦虹彩病毒病(Shrimp hemocyte iridescent virus disease，SHIVD)共 5 種疫病及新發(fā)重大疾病，開展了唐山市南美白對(duì)蝦苗種專項(xiàng)疫病監(jiān)測(cè)工作，從每年的4月下旬開始至5月下旬結(jié)束，3 年累計(jì)監(jiān)測(cè)苗種場(chǎng)294 批次，檢測(cè)苗種樣品1 400份。

一、材料和方法

1.樣品來源

樣品來自唐山市南美白對(duì)蝦苗種主產(chǎn)區(qū)，主要集中在豐南區(qū)和曹妃甸區(qū)。按照《水生動(dòng)物產(chǎn)地檢疫采樣技術(shù)規(guī)范》(SC/T 7103－2008)的規(guī)定進(jìn)行隨機(jī)抽樣，每份樣品的數(shù)量不少于150尾，將采集的南美白對(duì)蝦苗裝入一次性無菌采樣袋中，密封編號(hào)后低溫保存，運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室。

2.樣品前處理

將采集的蝦苗樣品研磨后裝入無DNase 和RNase 的離心管中，直接檢驗(yàn)或-20℃下冷凍保存?zhèn)錂z。

3.主要試劑和儀器設(shè)備

(1)主要試劑：DNA 提取試劑盒(TOYOBO，日本)、一步法熒光定量PCR 試劑盒(QIAGEN，德國)、2×Taq Master Mix(Generay，上海)、引物及探針(Generay，上海)、陽性標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所)。

(2)主要儀器設(shè)備：實(shí)時(shí)熒光定量PCR 儀(ABI Q3)、 梯 度 PCR 儀 (ABI Veriti 96、 BIO- RAD T100)、臺(tái)式冷凍離心機(jī)(eofuge 13R)、水平電泳儀(BG-subMIDI)、凝膠成像系統(tǒng)(Azure C200)等。

4.檢測(cè)方法

蝦類疫病檢測(cè)方法詳見表1。

表1 蝦類疫病檢測(cè)方法

二、結(jié)果與分析

1.苗種場(chǎng)監(jiān)測(cè)情況

2018－2020 年累計(jì)監(jiān)測(cè)南美白對(duì)蝦苗種場(chǎng)294 批次，檢出陽性場(chǎng)86 批次。2018 年監(jiān)測(cè)苗種場(chǎng)70批次，檢出陽性場(chǎng)10批次，陽性場(chǎng)檢出率為14.29%；2019 年監(jiān)測(cè)苗種場(chǎng)99 批次，檢出陽性場(chǎng)24 批次，陽性場(chǎng)檢出率為24.24%，比上年增長(zhǎng)9.95 個(gè)百分點(diǎn)；2020 年監(jiān)測(cè)苗種場(chǎng)125 批次，檢出陽性場(chǎng)52 批次，陽性場(chǎng)檢出率為41.60%，比上年增加17.36個(gè)百分點(diǎn)。

2.苗種檢測(cè)情況

2018－2020 年累計(jì)檢測(cè)南美白對(duì)蝦苗種1 400 份，檢出陽性樣品103 份。2018 年檢測(cè)樣品280 份，檢出陽性樣品14 份，陽性樣品檢出率為5.00%；2019 年檢測(cè)樣品495 份，檢出陽性樣品27 份，陽性樣品檢出率為5.45%，比上年增長(zhǎng)0.45 個(gè)百分點(diǎn)；2020 年檢測(cè)樣品625 份，檢出陽性樣品62份，陽性樣品檢出率為9.92%，比上年增長(zhǎng)了4.47個(gè)百分點(diǎn)。

(1)白斑綜合征病毒(WSSV)檢測(cè)。3 年累計(jì)檢測(cè)樣品294份，檢出陽性樣品2份。2018年檢測(cè)樣品70 份，檢出陽性樣品2 份，陽性樣品檢出率為2.86%；2019 檢測(cè)樣品99 份，檢出陽性樣品0 份，陽性樣品檢出率為0，同比下降2.86 個(gè)百分點(diǎn)；2020年檢測(cè)樣品125份，檢出陽性樣品0份，陽性樣品檢出率為0，同比持平。

(2)傳染性皮下和造血器官壞死病毒(IHHNV)檢測(cè)。3 年累計(jì)檢測(cè)樣品294 份，檢出陽性樣品26 份。2018 年檢測(cè)樣品70 份，檢出陽性樣品6 份，陽性樣品檢出率為8.57%；2019 年檢測(cè)樣品99 份，檢出陽性樣品8 份，陽性樣品檢出率8.08%，同比下降0.49個(gè)百分點(diǎn)；2020年檢測(cè)樣品125 份，檢出陽性樣品12 份，陽性樣品檢出率為9.60%，同比上升1.52個(gè)百分點(diǎn)。

(3)急性肝胰腺壞死性弧菌(VpAHPND)檢測(cè)。3 年累計(jì)檢測(cè)樣品294 份，檢出陽性樣品4 份。2018 年檢測(cè)樣品70 份，檢出陽性樣品1 份，陽性樣品檢出率為1.43%；2019 年檢測(cè)樣品99 份，檢出陽性樣品1 份，陽性樣品檢出率為1.01%，同比下降0.42 個(gè)百分點(diǎn)；2020 年檢測(cè)樣品125 份，檢出陽性樣品2 份，陽性樣品檢出率為1.60%，同比上升0.59個(gè)百分點(diǎn)。

(4)蝦肝腸胞蟲(EHP)檢測(cè)。3年累計(jì)監(jiān)測(cè)樣品294 份，檢出陽性樣品56 份。2018 年檢測(cè)樣品70 份，檢出陽性樣品5 份，陽性樣品檢出率為7.14%；2019 年檢測(cè)樣品99 份，檢出陽性樣品14 份，陽性樣品檢出率為14.14%，同比上升7.00 個(gè)百分點(diǎn)；2020 年檢測(cè)樣品125 份，檢出陽性樣品37 份，陽性樣品檢出率為29.60%，同比上升15.46個(gè)百分點(diǎn)。

(5)蝦虹彩病毒(SHIV)檢測(cè)。兩年累計(jì)檢測(cè)樣品224 份，檢出陽性樣品15 份。2019 年檢測(cè)樣品99 份，檢出陽性樣品4 份，陽性樣品檢出率為4.04%；2020 年檢測(cè)樣品125 份，檢出陽性樣品11 份，陽性樣品檢出率為8.80%，同比上升4.76個(gè)百分點(diǎn)。

三、結(jié)論

從南美白對(duì)蝦苗種專項(xiàng)疫病監(jiān)測(cè)結(jié)果看，陽性場(chǎng)檢出率和陽性樣品檢出率均呈逐年上升趨勢(shì)。從南美白對(duì)蝦苗種專項(xiàng)疫病病原檢測(cè)結(jié)果看，WSSV 和VpAHPND 陽性樣品檢出率相對(duì)較低，IHHN、EHP和SHIV陽性樣品檢出率相對(duì)較高。WSSV陽性樣品檢出率呈下降趨勢(shì)，IHHN 和VpAHPND 陽性樣品檢出率均呈小幅波動(dòng)趨勢(shì)，EHP和SHIV陽性樣品檢出率均呈大幅上升趨勢(shì)(圖1)。

圖1 疫病變化趨勢(shì)

四、建議

從3年的監(jiān)測(cè)情況看，常見疫病仍然存在，新發(fā)重大疾病不斷出現(xiàn)，且發(fā)現(xiàn)同一份樣品檢出兩種以上疫病病原的現(xiàn)象，嚴(yán)重影響南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展，應(yīng)引起養(yǎng)殖者的高度重視。建議養(yǎng)殖者從以下幾個(gè)方面做好疫病防控工作。

一是引進(jìn)或選育SPF種蝦、蝦苗，從源頭切斷疫病的傳播途徑。二是重視南美白對(duì)蝦苗種的產(chǎn)地檢疫，力爭(zhēng)做到“引苗必采、采樣必檢”。三是做好養(yǎng)殖環(huán)境和投入品的消殺工作，防止因環(huán)境消毒不徹底或投入品攜帶病原感染蝦苗。四是對(duì)陽性場(chǎng)和陽性樣品采取“隔離、撲殺、消毒、無害化處理”等措施，以控制病原擴(kuò)散及避免疫情擴(kuò)大，最大程度降低經(jīng)濟(jì)損失和養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)。