王晶晶, 時金殿, 李晨萱, 王人杰, 史光密, 李 軍*
(1.青島農(nóng)業(yè)大學 農(nóng)學院, 山東 青島 266109; 2.北京中醫(yī)藥大學 中醫(yī)學院, 北京 100029; 3.山東利丹農(nóng)業(yè)科技有限公司, 山東 濰坊 262200)
【研究意義】黃精為百合科黃精屬多年生藥用植物,在《中國藥典》(2015)版中明確規(guī)定黃精正品是黃精(PolygonatumsibiricumRed)、多花黃精(PolygonatumcyrtonemaHua)和滇黃精(PolygonatumkigianumColl. et Hemsl)的干燥根莖[1]。黃精性甘、味平,在中醫(yī)上歸脾、肺、腎經(jīng),具有補脾益氣,滋腎潤肺之功效[2]。此外,在抗菌、解壓、抗衰老和心血管疾病治療等方面也有很好的療效[3]。探究多花黃精和滇黃精種子的營養(yǎng)成分及抗氧化物酶活性對其相關研究與應用具有重要意義?!厩叭搜芯窟M展】當前,對黃精的研究主要集中在藥效成分、藥理活性、真?zhèn)舞b別和產(chǎn)品開發(fā)等方面。張嬌等[4]研究發(fā)現(xiàn),黃精的主要化學成分包括甾體皂苷、多糖、黃酮和一些生物堿等。FAN等[5]利用高效液相色譜-質譜復合技術,建立了黃精蒸餾加工過程中多糖成分變化的指紋圖譜,并對黃精多糖的提取工藝進行了優(yōu)化。陶愛恩等[6]研究發(fā)現(xiàn),黃精制劑在治療腎虧虛方面具有明顯療效。王慶[7]認為,黃精市場的規(guī)范應從形態(tài)學、顯微學、化學和分子生物學等方面對黃精真、偽品進行鑒別。張月琴等[8]認為,作為藥食同源的黃精已具備開發(fā)成功能性產(chǎn)品的條件,可加工成適合大眾口味的食品。MU等[9]通過分析GenCLiP3(http://http://ci.smu.edu.cn)、NCBI(https://www.ncbi.nlm.nih.gov)和GeneCard(http://www.genecards.org)數(shù)據(jù)庫中關于新冠肺炎的靶標發(fā)現(xiàn),在黃精中存在著與病毒相關的靶點,預示著黃精在新冠肺炎的治療中具有潛在的應用價值。李勇剛等[10]研究發(fā)現(xiàn),黃精種子具有較高的營養(yǎng)價值,如人體必需的亞油酸含量高達49.77%,且人體必需氨基酸如蛋氨酸和賴氨酸等含量也較高。【研究切入點】已有研究大多集中在黃精根狀莖上,鮮見關于黃精種子營養(yǎng)成分及抗氧化物酶活性的研究報道?!緮M解決的關鍵問題】探明多花黃精和滇黃精種子的營養(yǎng)成分及抗氧化物酶活性,以期為深入挖掘黃精種子的研究與應用提供理論支撐。
1.1.1 黃精種子 多花黃精(P.cyrtonemaHua)和滇黃精(P.kigianumColl. et Hemsl)種子,來源于2020年秋季在山東省潤竹山農(nóng)業(yè)科技有限公司試驗基地收獲的黃精果實,試驗時挑選籽粒飽滿的種子。
1.1.2 試劑盒 試劑盒購自北京索萊寶科技有限公司。
1.2.1 淀粉、直鏈淀粉和支鏈淀粉含量的測定 按照試劑盒操作說明,分別提取種子的淀粉、直鏈淀粉和支鏈淀粉,然后用分光光度計法[11]在波長620 nm下測定淀粉含量;用等吸收點作圖法在波長790 nm和參比波長820 nm下測定直鏈淀粉含量,在波長553 nm和參比波長740 nm下測定支鏈淀粉含量。
1.2.2 粗脂肪含量的測定 參照GB2906-82規(guī)定,采用索氏提取法[12]測定粗脂肪含量。
1.2.3 蛋白質、可溶性糖、游離氨基酸和植物甾醇含量的測定 采用考馬斯亮藍法[13]測定種子的蛋白質含量,采用蒽酮-硫酸比色法[14]測定種子的可溶性糖含量,用茚三酮比色法[15]測定種子中游離氨基酸含量;以豆甾醇為標準品繪制標準曲線,用分光光度法[16]測定種子中甾醇含量。
1.2.4 抗氧化物酶活性測定 按照試劑盒操作說明,分別提取種子的超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)和過氧化氫酶(CAT),然后參照文獻[17-18]的方法,用分光光度法測定SOD、POD和CAT活性。
采用Excel 2010對數(shù)據(jù)進行處理與分析。
從表1可知,多花黃精和滇黃精種子的淀粉、直鏈淀粉和支鏈淀粉等營養(yǎng)成分及化合物含量的變化。多花黃精的淀粉、直鏈淀粉、支鏈淀粉、粗蛋白、粗脂肪、可溶性糖、游離氨基酸和甾醇含量為0.11%~60.94%,滇黃精為0.20%~65.20%;其中,滇黃精的淀粉、直鏈淀粉、支鏈淀粉、粗蛋白、粗脂肪和甾醇含量均高于多花黃精,分別提高6.99%、14.15%、11.78%、145.46%、60.07%和66.67%,多花黃精的可溶性糖和游離氨基酸含量均高于滇黃精,分別是滇黃精的11.98倍和28.92倍。多花黃精和滇黃精種子的淀粉含量與水稻、小麥和玉米相比相對較低,分別降低9.0%~14.0%和4.0%~10.0%;黃精種子的粗脂肪含量則是水稻、小麥和玉米的6.3~10.0倍。
表1 多花黃精及滇黃精種子的主要營養(yǎng)成分及化合物含量
從表2看出,多花黃精和滇黃精的SOD、CAT和POD活性分別為29.37 U/g、148.24 U/g,61.25 U/g、297.10 U/g,6 804.00 U/g、80.80 U/g,其中,滇黃精的SOD和CAT活性是多花黃精的5.05倍和4.85倍,多花黃精的POD活性是滇黃精的84.21倍。滇黃精種子的CAT活性是小麥的13倍,而與水稻的CAT活性相差不大;多花黃精的POD活性極顯著高于滇黃精及小麥、水稻和玉米三大作物,是小麥、水稻和玉米的126.00~220.00倍。可見,多花黃精和滇黃精種子具有較強的抗氧化能力。
表2 黃精種子的抗氧化物酶活性
世界重要糧食作物的營養(yǎng)成分主要由淀粉組成,其中小麥、稻米、小米和馬鈴薯分別為60.0%~70.0%、80.0%、59.4%~70.2%和70.0%~85.0%[22-23]。淀粉作為一種重要的儲能物質,在種子的組成成分中含量較高。黃精種子的淀粉含量高達60%~70%,屬于淀粉性種子。研究結果表明,滇黃精和多花黃精種子中淀粉含量相差不大,但滇黃精含量略高于多花黃精,可能與黃精品種的基因型和產(chǎn)地不同有一定的聯(lián)系。黃精種子中的粗脂肪含量遠高于小麥、玉米和水稻等作物,如滇黃精種子粗脂肪含量達14.30%,多花黃精種子粗脂肪含量達8.90%?,F(xiàn)代藥理研究表明,黃精具有抗阿爾茲海默癥、保護心臟和抗脂肪肝等多種藥理活性,其藥理活性與黃精中存在大量的信號轉導通路,如氧化應激、細胞凋亡和脂質代謝等有關[24]。黃精種子中較高的粗脂肪含量可能參與脂質代謝信號通路,進而發(fā)揮藥理作用。
蛋白質作為三大營養(yǎng)物質之一,對人體的氮營養(yǎng)平衡具有重要的作用。研究結果表明,多花黃精和滇黃精種子的蛋白質含量均不高,但多花黃精中的游離氨基酸含量較高,達34.70%,與李勇剛等[10]的研究結果基本一致。黃精多糖是黃精中的有效成分,其含量高低是藥典中評價黃精質量的重要指標。黃趙剛等[25]研究表明,黃精多糖的含量受生長環(huán)境和品種基因型的影響較大。研究結果表明,多花黃精種子的可溶性糖含量高達28.40%,是滇黃精可溶性糖含量的11.98倍,進一步證實了多糖含量受黃精基因型的影響較大。
植物甾醇是一類以環(huán)戊烷多氫菲為骨架的三萜類化合物,結構類似于膽固醇,是一種重要的天然化合物[26]。植物甾醇具有降膽固醇、抗癌、抗炎、抗氧化、抗腫瘤、退熱、降低心腦血管疾病和免疫調(diào)節(jié)等作用[27]。目前,甾醇被批準使用“有益健康標簽”,可作為未來十大功能性營養(yǎng)成分[28]。研究結果表明,多花黃精和滇黃精種子的甾醇含量均不高,分別為0.12%和0.20%。李曉光等[29]研究發(fā)現(xiàn),含有0.1%~10.0%植物甾醇酯的蛋白飲料,具有顯著降低膽固醇的功能。可見,多花黃精和滇黃精在食品工業(yè)研發(fā)領域具有較強的發(fā)展?jié)摿Α?/p>
超氧化物歧化酶(SOD)是植物抗氧化系統(tǒng)的第一道防線,在清除存在于胞質、葉綠體和過氧化物酶體中的超氧自由基方面起主要作用[30]。過氧化物酶(POD)參與木質素生物合成最后一步,可催化木質素單體的聚合反應,通過催化 H2O2分解而發(fā)揮作用[31]。過氧化氫酶(CAT)是植物細胞的活性氧清除劑,逆境條件下有機體H2O2含量增加,CAT可將H2O2水解成O2和H2O,以減輕活性氧對機體造成的損傷[32]。因此,SOD、POD和CAT在植物體內(nèi)具有防御和保護作用。研究結果表明,多花黃精的POD活性是滇黃精的84.21倍,滇黃精的SOD和CAT活性是多花黃精的5.05倍和4.85倍;滇黃精種子的CAT活性與水稻的CAT活性相差不大,卻是小麥的13倍;多花黃精的POD活性極顯著高于滇黃精及小麥、水稻和玉米三大作物,是小麥、水稻和玉米的126.00~220.00倍??梢姡嗷S精和滇黃精在抗氧化、清除細胞內(nèi)活性氧等方面都具有重要作用,在抗氧化或具防護功用的化妝品開發(fā)方面有很大的開發(fā)潛力。
多花黃精和滇黃精與小麥、水稻和玉米三大作物相類似,其種子的淀粉含量較高,屬于淀粉性種子;蛋白質含量較低,粗脂肪和游離氨基酸含量較高;種子的可溶性糖、游離氨基酸和植物甾醇含量較高,具有較高的營養(yǎng)價值和抗氧化酶活性,可在食療和康養(yǎng)等新興領域開發(fā)利用。