王志遠(yuǎn)，盧立全，牛繼華

1.上海市養(yǎng)志康復(fù)醫(yī)院(上海市陽光康復(fù)中心)檢驗(yàn)科，上海 201600；2.上海市浦東新區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 201200；3.上海市松江區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 201620

原發(fā)性肝癌屬于消化系統(tǒng)惡性腫瘤，在世界上屬于極為常見的腫瘤之一，其具有惡化程度高、侵略性強(qiáng)、病死率高等特征。全世界范圍內(nèi)該病病死率位居惡性腫瘤死亡率第三，在國內(nèi)僅次于肺癌位居第二，且每年均呈上升趨勢[1-2]。因肝癌具有較強(qiáng)的隱匿性，在早期沒有明顯的征兆，因此易被忽略，導(dǎo)致發(fā)現(xiàn)時患者已發(fā)展為中晚期，錯失治療良機(jī)。肝硬化主要由多種病因引起，相關(guān)研究顯示肝硬化與慢性乙型肝炎有關(guān)[3-4]。目前，臨床上常用血清AFP指標(biāo)水平作為診斷肝癌的重要依據(jù)，但其效果不佳，常發(fā)生假陽性和假陰性情況，從而影響其檢測的準(zhǔn)確度、靈敏度、特異性。因此臨床上急需尋求一種高效的檢測方案。本研究旨在研究檢測患者血清甲胎蛋白(alpha fetoprotein，AFP)、甲胎蛋白異質(zhì)體(alpha fetoprotein heterogeneity，AFP-L3)、α-L-巖 藻 糖 苷 酶(A-L-Fucosidase，AFU)、高爾基體糖蛋白73(golgi glycoprotein 73，GP73)水平對原發(fā)性肝癌的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇上海市養(yǎng)志康復(fù)醫(yī)院(上海市陽光康復(fù)中心)2018年2月至2020年10月期間收治的66例原發(fā)性肝癌患者作為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)臨床診斷均確診為肝癌；②無合并其他心肝腎疾病及其他惡性腫瘤者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有嚴(yán)重心肝腎疾病者；②患有合并其他惡性腫瘤者。選擇同期在上述醫(yī)院體檢的66例健康志愿者作為對照組。觀察組中男性32例，女性34例；年齡45~70歲，平均(58.2±10.3)歲。對照組中男性35例，女性31例；年齡48~75歲，平均(59.6±12.3)歲。兩組受檢者的性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，所有受檢者均對本研究知情并簽署同意書。

1.2 檢測方法 所有受檢者均于清晨空腹抽取靜脈血3 mL，采用離心機(jī)以3 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心30 min，提取上層清液，將提取的上層清液血清進(jìn)行標(biāo)記，然后將其存放于-70℃環(huán)境中備用。采用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(儀器購自上海寰熙醫(yī)療科技有限公司)測定血清AFP及AFP-L3水平；血清AFU水平采用生化定量法進(jìn)行檢測，試劑盒由上海信帆生物有限公司提供；血清GP73水平采用酶聯(lián)免疫法進(jìn)行檢測，試劑盒由上海酶聯(lián)生物科技有限公司提供。以上檢測工作均由同一名工作人員嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。以AFP>20μg/L、AFP-L3>10%、AFU>35 U/L、GP73>150μg/L為陽性，計(jì)算陽性率。

1.3 觀察指標(biāo) (1)比較兩組受檢者血清中AFP、AFP-L3、AFU及GP73水平；(2)比較兩組受檢者血清中AFP、AFP-L3、AFU及GP73檢測陽性率；(3)比較兩組受檢者血清中各指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測的特異性、靈敏度、準(zhǔn)確度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料符合正態(tài)分布，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。均以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受檢者的血清AFP、AFP-L3、AFU及GP73水平比較 觀察組患者的血清AFP、AFP-L3、AFU及GP73水平明顯高于對照組，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

表1 兩組受檢者的血清AFP、AFP-L3、AFU及GP73水平比較(±s)

表1 兩組受檢者的血清AFP、AFP-L3、AFU及GP73水平比較(±s)

組別觀察組對照組t值P值A(chǔ)FP(μg/L)219.56±17.94 17.19±3.15 90.261 0.001 AFP-L3(%)15.78±4.56 3.89±0.78 20.880 0.001 AFU(U/L)68.56±11.78 24.78±6.56 25.410 0.002例數(shù)66 66 GP73(μg/L)208.89±48.76 67.46±15.78 21.678 0.001

2.2 兩組受檢者血清中AFP、AFP-L3、AFU及GP73檢測陽性率比較 觀察組患者血清中AFP、AFP-L3、AFU及GP73檢測陽性率明顯高于對照組，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表2。

表2 兩組血清中AFP、AFP-L3、AFU及GP73檢測陽性率比較[例(%)]

2.3 血清中各指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌的特異性、靈敏度、準(zhǔn)確度比較 各項(xiàng)指標(biāo)對原發(fā)性肝癌均有一定的診斷價值，聯(lián)合診斷準(zhǔn)確度高達(dá)96.5%，四項(xiàng)指標(biāo)中對原發(fā)性肝癌患者特異性最高的AFP-L3為90.2%，靈敏度最高的AFU為74.6%，AFP-L3單獨(dú)診斷準(zhǔn)確度最高，為80.9%，見表3。

表3 血清中各指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌的特異性、靈敏度、準(zhǔn)確度比較(%)

3 討論

肝癌屬于惡性腫瘤之一，其病死率在我國居高不下，嚴(yán)重威脅著患者的生命安全，其具有反復(fù)發(fā)作及轉(zhuǎn)移等特點(diǎn)。醫(yī)學(xué)上根據(jù)其病理分為膽管細(xì)胞型肝癌、肝細(xì)胞型肝癌及混合型肝癌[5-6]。我國主要以肝細(xì)胞型肝癌為主，其約占肝癌總患者的90%以上。臨床上主要采用檢測血清AFP指標(biāo)來診斷患者病情，但單一檢測指標(biāo)在臨床上易出現(xiàn)誤差，造成診斷錯誤[7]。

AFP是一種糖原蛋白，它是由卵黃囊細(xì)胞及肝臟細(xì)胞合成分泌的，其主要發(fā)生在胚胎時期，在其他時期合成量較少或不合成量，但機(jī)體肝臟受到損害時會大量分泌。因此，臨床上常將AFP作為肝癌診斷的標(biāo)志物之一，但其檢測靈敏度較低，僅為40%~65%，且還存在30%左右的假陰性、假陽性問題。因此，臨床上需進(jìn)一步尋求更為準(zhǔn)確的標(biāo)志物[8-9]。AFP主要有三種壓型，分別為AFP-L1、AFP-L2、AFP-L3，是根據(jù)其與小扁豆結(jié)合程度的不同進(jìn)行劃分的，其中AFP-L3作為一項(xiàng)特殊的指標(biāo)，在肝癌細(xì)胞中具有特殊性，并隨著病情的惡化其所占比例也隨之升高，因此在臨床上也采用AFP-L3作為肝癌的標(biāo)志物之一[10]。AFP-L3屬于AFP中的一種壓型，它只能產(chǎn)生于腫瘤細(xì)胞中。已有相關(guān)學(xué)者將AFP-L3用于診斷早期肝癌檢測，且取得良好效果。主要通過低濃度AFP結(jié)合影像學(xué)對患者進(jìn)行AFP-L3動態(tài)觀察，從而達(dá)到早期診斷的目的[11-12]。GP73是一種跨膜蛋白，近幾年發(fā)現(xiàn)其與肝癌有關(guān)，一般情況下，?；钴S于肝癌組織中，且會分泌至細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞表面，從而使得血清中GP73水平顯著提升，且特異性表達(dá)明顯升高。據(jù)相關(guān)研究表明，采用GP73診斷早期肝癌患者優(yōu)于AFP[13-14]。AFU是一種水解酶，它主要存在哺乳動物中，能參與分解多種活性分子如糖脂、蛋白等，且在肝癌患者血清中AFU水平較高，雖此現(xiàn)象的機(jī)理至今尚不明確，但多數(shù)醫(yī)學(xué)研究結(jié)果表明基本一致，故常被作為臨床診斷肺癌的指標(biāo)[15-16]。本研究結(jié)果表明，肝癌患者血清中的AFP、AFP-L3、AFU及GP73水平及其檢測陽性率明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各項(xiàng)指標(biāo)對原發(fā)性肝癌均有一定的診斷價值，聯(lián)合診斷準(zhǔn)確度高達(dá)96.5%，四項(xiàng)指標(biāo)中AFP-L3的特異性最高為90.2%，AFU的靈敏度最高為74.6%，AFP-L3單獨(dú)診斷準(zhǔn)確度最高，為80.9%。

綜上所述，通過單獨(dú)檢測血清AFP、AFP-L3、AFU、GP73水平，對原發(fā)性肝癌患者的診斷有一定的價值，但聯(lián)合檢測能顯著提升其靈敏度、特異性和準(zhǔn)確度，具有臨床應(yīng)用價值。