胡文香，黃藝璇

（贛州市婦幼保健院產(chǎn)前診斷科，贛州 341000）

胎兒染色體異常在出生缺陷中占比較大，一旦胎兒發(fā)生染色體異常影響巨大，會(huì)導(dǎo)致孩子智力低下，生長(zhǎng)發(fā)育遲緩，先天性畸形等，并且大多數(shù)異常都不可逆，缺乏有效的治療措施[1]?；诖?，為了減少染色體異常導(dǎo)致的缺陷兒出生率，羊水穿刺應(yīng)用于產(chǎn)前篩查無(wú)創(chuàng)高風(fēng)險(xiǎn)病例之中尤為重要。染色體異常的產(chǎn)前檢查是為了準(zhǔn)確評(píng)估患者攜帶染色體異常胎兒的風(fēng)險(xiǎn)，而在產(chǎn)前診斷當(dāng)中最常見的就是染色體異常，有染色體數(shù)目異常、染色體結(jié)構(gòu)異常和微結(jié)構(gòu)異常等，數(shù)目異常中13號(hào)、21號(hào)、18號(hào)以及X、Y染色體異常最為常見[2]。本文研究羊水穿刺在產(chǎn)前篩查無(wú)創(chuàng)高風(fēng)險(xiǎn)病例中染色體異常的產(chǎn)前診斷價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年03月至2021年03月我院收治68例產(chǎn)前篩查無(wú)創(chuàng)高風(fēng)險(xiǎn)病例。病例的年齡在21~44歲之間，平均年齡（36.78±5.76）歲；病例孕周13~21周，平均孕周為（17.99±4.97）周；初產(chǎn)婦38例，經(jīng)產(chǎn)婦30例。本次研究經(jīng)過(guò)我院倫理委員會(huì)審核與批準(zhǔn)，孕婦已明確知曉羊水穿刺的流程，目的與風(fēng)險(xiǎn)，簽署了知情同意書。

納入標(biāo)準(zhǔn)[2]：按照正常規(guī)律自愿接受產(chǎn)前孕檢的病例；唐氏篩查結(jié)果提示為高風(fēng)險(xiǎn)的病例；自愿接受羊水穿刺的病例；符合隨訪的病例。單胎妊娠。排除標(biāo)準(zhǔn)：明確拒絕行羊水穿刺的病例；無(wú)法獲得臨床隨訪的病例；精神異常存在認(rèn)知功能障礙的病例；嚴(yán)重凝血功能障礙的病例；存在先兆流產(chǎn)癥狀的病例；合并婦科炎癥或腫瘤的病例。

1.2 方法 常規(guī)NIPT檢測(cè)：抽取所有患者早晨空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈血5毫升，以一萬(wàn)rpm離心10分鐘處理后提取其中游離DNA，建庫(kù)、測(cè)序，經(jīng)PCR擴(kuò)增，利用新一代高通量測(cè)序技術(shù)實(shí)現(xiàn)覆蓋度測(cè)序，分析遺傳信息可得到每種染色體的Z值。正常來(lái)說(shuō)，13、18、21號(hào)染色體Z值置于-3.0~3.0區(qū)間內(nèi)為低風(fēng)險(xiǎn)，高于該區(qū)間為高風(fēng)險(xiǎn)[3]。

羊水穿刺—核型分析：NIPT檢測(cè)高風(fēng)險(xiǎn)者知情同意和咨詢后，在其孕18~30周實(shí)施羊膜腔穿刺術(shù)。取出羊水約20毫升，裝入兩個(gè)無(wú)菌離心管中，常溫下2000 rpm離心處理7分鐘，保留1毫升左右的羊水細(xì)胞層放置于無(wú)菌T形培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)接種，把培養(yǎng)基與細(xì)胞液均勻混合后，放置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，環(huán)境保持37℃、5%CO2，每9天更換一次新培養(yǎng)基，在細(xì)胞繁殖旺盛期提取羊水細(xì)胞，經(jīng)消化、低滲、預(yù)固定、固定處理后滴片，G顯帶，鏡下觀察，記下二十個(gè)分散較好的中期分裂相，隨機(jī)挑選其中4個(gè)進(jìn)行研究，以人 類 細(xì) 胞 遺 傳學(xué)國(guó)際命名體制標(biāo)準(zhǔn)實(shí)現(xiàn)核型分析。入組孕婦穿刺前均核查血型，若為Rh陰性，而其配偶為Rh陽(yáng)性，介入性產(chǎn)前診斷穿刺后應(yīng)立即注射抗RhD免疫球蛋白[4]。

1.3 觀察指標(biāo) 采取電話隨訪或查閱產(chǎn)科病例資料的方法，對(duì)全部患者在預(yù)產(chǎn)期后進(jìn)行信息確認(rèn)，記錄并統(tǒng)計(jì)所有染色體異常的胎兒。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采取SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件來(lái)計(jì)算與分析本文的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。計(jì)量資料格式為（±s），不同組別的數(shù)據(jù)對(duì)比利用樣本t驗(yàn)證；計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)采用[n（%）]代替，與之實(shí)現(xiàn)χ2校驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 隨訪結(jié)果確認(rèn)情況 68例產(chǎn)前篩查無(wú)創(chuàng)高風(fēng)險(xiǎn)病例，臨床隨訪染色體異常有46例（67.65%），其中13-三體綜合征1例（2.17%），18-三體綜合征4例（8.69%），21-三體綜合征25例（54.35%），性染色體異常16例（34.79%）。見表1。

2.2 羊水穿刺分析檢出各種三體綜合征狀況與靈敏度、準(zhǔn)確度、特異度 68例隨訪確認(rèn)與羊水穿刺-核型分析檢出各類型染色體異常情況對(duì)比，詳見表1；以確認(rèn)的臨床結(jié)果為準(zhǔn)，羊水穿刺-核型分析判定各種染色體綜合征的靈敏度、準(zhǔn)確度、特異度對(duì)比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表1 羊水穿刺-核型分析檢出各種三體綜合征狀況（n=68）

表2 羊水穿刺-核型分析診斷不同染色體異常的效能

2.3 羊水穿刺 核型分析判定總?cè)旧w異常狀況隨訪確認(rèn)的總?cè)旧w異常46例，無(wú)染色體異常22例；羊水穿刺分析判定總?cè)旧w異常43例，無(wú)染色體異常17例。見表3。

表3 羊水穿刺-核型分析判定總?cè)旧w異常狀況

3 討論

人類具有23對(duì)（46條）染色體，其中22對(duì)常染色體，1對(duì)性染色體，男為XY，女為XX。當(dāng)染色體數(shù)量增加、減少，或染色體結(jié)構(gòu)出現(xiàn)異常，那么極有可能就會(huì)出現(xiàn)染色體異常疾病，嚴(yán)重程度與異常程度有關(guān)，染色體異常越嚴(yán)重，疾病的表現(xiàn)也就會(huì)越重[5]。而染色體異常檢查應(yīng)該基于充分和準(zhǔn)確的信息提供之后，由患者自主選擇，每個(gè)病例都有權(quán)進(jìn)行或拒絕產(chǎn)前遺傳篩查和診斷性檢查，這一點(diǎn)是毋庸置疑的，本次研究在合法合規(guī)的背景下進(jìn)行，在產(chǎn)前篩查無(wú)創(chuàng)高風(fēng)險(xiǎn)病例中染色體異常的產(chǎn)前診斷中行羊水穿刺[6]。無(wú)創(chuàng)性胎兒染色體非整倍體檢測(cè)（NIPT），也稱無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前DNA檢測(cè)，采集孕婦外周血，提取DNA，采用新一代高通量測(cè)序技術(shù)，再結(jié)合生物信息學(xué)分析得出胎兒患染色體疾病風(fēng)險(xiǎn)。但是但由于NIPT篩查結(jié)果受到孕多因素影響，準(zhǔn)確率降低，因此對(duì)于NIPT高風(fēng)險(xiǎn)人群，最好是再次行羊膜腔穿刺術(shù)做進(jìn)一步診斷[7]。“羊膜腔穿刺術(shù)”俗稱羊水穿刺，是有創(chuàng)介入性產(chǎn)前診斷技術(shù)，應(yīng)用廣泛，在超聲介導(dǎo)下，用一根細(xì)長(zhǎng)針穿過(guò)孕婦肚皮、子宮壁之后進(jìn)入羊膜腔，按照規(guī)范抽取羊水獲得胎兒細(xì)胞或DNA，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室處理發(fā)送報(bào)告，從而進(jìn)行遺傳學(xué)檢查，以此來(lái)判斷胎兒是否存在染色體異?；蛘呤侨旧w相關(guān)疾病[8]。

13三體綜合征（Patau綜合征），體細(xì)胞基因組額外多出一條13號(hào)染色體所引起。18-三體綜合征（愛德華茲綜合癥），是患者多了1條18號(hào)染色單體。 21-三體綜合征（唐氏綜合征），是常規(guī)染色體中增加了一條21號(hào)染色體。性染色體異常綜合征指的是性染色體x或y發(fā)生數(shù)目異?；蚪Y(jié)構(gòu)畸變[9]。

劉慧等[10]認(rèn)為，對(duì)NIPT高風(fēng)險(xiǎn)人群，行羊水穿刺對(duì)于染色體異常具有較高診斷價(jià)值，可以為優(yōu)生優(yōu)育、遺傳咨詢提供可靠的理論依據(jù)參考。于艷[11]等研究，將患者分為羊水穿刺組和NIPT組，羊水穿刺是具備產(chǎn)前診斷指征孕婦首選的診斷方法，能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)染色體異常，慎用NIPT。卜秀芬[12]等認(rèn)為，染色體微陣列分析對(duì)于無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)具有診斷價(jià)值，也可作為產(chǎn)前診斷方案。周月云[13]等探討產(chǎn)前不同診斷指征與孕婦羊水穿刺胎兒核型的關(guān)系，研究認(rèn)為可以為產(chǎn)前診斷提供遺傳咨詢。在本次結(jié)果中，對(duì)孕婦實(shí)施產(chǎn)前篩查羊水穿刺，總?cè)旧w異常的靈敏度93.47%，特異度77.27%，準(zhǔn)確度88.24%。故本可看出，用羊水穿刺-核型分析可以有效檢出異常核型，能夠幫助孕婦選擇性分娩健康的胎兒。

綜上所述，羊水穿刺對(duì)NIPT高風(fēng)險(xiǎn)人群染色體異常診斷價(jià)值高，是產(chǎn)前診斷起著重要作用的一種技術(shù)，值得臨床推廣。