張燕青，宋 朋，劉鳳嬌，梅俊紅，曹 磊，段麗芳

(1.山東威瑞信試驗檢測有限公司，山東 濟南 250119；2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)藥檢定所，北京 100125)

1 前言

氟吡酰草胺英文名稱：picolinafen，CAS號：83164-33-4，分子式：C19H11F5N2O2，其化學(xué)名稱：N-(4-氟苯基)-6-(A，A，A-三氟間甲基苯氧基)吡啶酰苯胺；N-(4-氟苯基)-6-；3-(三氟甲基)苯氧基]-2-吡啶甲酰胺。氟吡酰草胺屬于吡啶酰胺結(jié)構(gòu)化合物的除草劑，可以抑制類胡蘿卜素的合成，通過雜草體內(nèi)八氫番茄紅素去飽和酶的活性，致使雜草植物細胞葉綠素被破壞及細胞破裂，最終導(dǎo)致目標(biāo)雜草白化死亡。

目前國內(nèi)有關(guān)氟吡酰草胺懸浮劑的分析方法未見公開報道。本文采用高效液相色譜法對20%氟吡酰草胺懸浮劑進行定量分析，該方法操作簡便快捷，分離效果好，精密度和準確度均能達到定量分析的要求。

2 試驗部分

2.1 試劑和溶液 乙腈(色譜純)；超純水(電阻率18.2MΩ·cm，25℃)；氟吡酰草胺標(biāo)樣，已知質(zhì)量分數(shù)99.8%(由Dr.Ehrenstorfer提供)；20%氟吡酰草胺懸浮劑(由某企業(yè)提供)。

2.2 儀器 高效液相色譜儀：日立Primaide，具有二極管陣列檢測器和自動進樣器；日立色譜工作站；色譜柱：250mm×4.6mm(i.d.)不銹鋼柱，內(nèi)裝ZORBAX SB-C185μm填充物。

2.3 液相色譜操作條件 流動相：Ψ(乙腈：水)=80：20(V/V)；流速：1.0mL/min；柱溫：25±2℃；檢測波長：290nm；進樣體積：10μL；保留時間：氟吡酰草胺約6.8min。典型的氟吡酰草胺標(biāo)樣和20%氟吡酰草胺懸浮劑的高效液相色譜圖(圖1、2)

圖1 氟吡酰草胺標(biāo)樣高效液相色譜圖

圖2 20%氟吡酰草胺懸浮劑高效液相色譜圖

2.4 測定步驟

2.4.1 標(biāo)樣溶液的配制 稱取0.05g(精確至0.000 1g)氟吡酰草胺標(biāo)樣，置于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。

2.4.2 試樣溶液的配制 稱取含0.05g(精確至0.000 1g)氟吡酰草胺的試樣，置于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，過濾。

2.4.3 測定 在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣溶液的響應(yīng)值相對變化<1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進行測定。

2.4.4 計算 將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中氟吡酰草胺峰面積分別進行平均。試樣中氟吡酰草胺的質(zhì)量分數(shù)ω(%)，按式(1)計算：

(1)

式中：

A1──標(biāo)樣溶液中氟吡酰草胺峰面積的平均值；

A2──試樣溶液中氟吡酰草胺峰面積的平均值；

m1──標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

m2──試樣的質(zhì)量，g；

P──標(biāo)樣中氟吡酰草胺的質(zhì)量分數(shù)，%。

3 結(jié)果與討論

3.1 色譜條件的選擇 通過日立Primaide高效液相色譜儀的光譜數(shù)據(jù)采集功能，獲得氟吡酰草胺的紫外波長掃描圖(圖3)。從圖中可以看到氟吡酰草胺在波長290nm處有較大吸收，在該波長處靈敏度較高，干擾較少，能夠滿足分析的要求，故將檢測波長確定為290nm。

圖3 氟吡酰草胺的紫外光譜圖

色譜柱選擇常用的ZORBAX SB-C18反相柱。根據(jù)氟吡酰草胺物化性質(zhì)和溶劑的紫外吸收波長，選擇乙腈作為溶劑溶解樣品，并以乙腈和水作為流動相。將流動相按不同比例在色譜柱上進行試驗，隨著乙腈比例的增加，保留時間減小，當(dāng)乙腈與水比例達到85 ： 15時，有雜質(zhì)峰干擾氟吡酰草胺，峰純度達不到試驗要求，最終選擇Ψ(乙腈：水)=80：20作為流動相，流速1.0mL/min。該條件下，氟吡酰草胺色譜峰峰形較好，與雜質(zhì)能完全分離，具有良好的精密度和準確度，并且分析時間較短，提高了工作效率。

3.2 分析方法的特異性鑒定 按照2.4.1和2.4.2中方法分別配制標(biāo)準溶液和樣品溶液，按標(biāo)準中方法對氟吡酰草胺進行全波段掃描、峰純度分析。結(jié)果表明標(biāo)樣溶液和試樣溶液中氟吡酰草胺純度均>99.0%，有效成分出峰處無其他物質(zhì)干擾，符合定量分析要求。

3.3 分析方法的線性相關(guān)性試驗 稱取0.052 1g氟吡酰草胺標(biāo)樣于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取3、4、5、6、7mL體積上述溶液分別置于50mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，配制5個不同濃度的標(biāo)樣溶液。在上述色譜操作條件下進行分析，以吡氟酰草胺質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)作標(biāo)準曲線(圖4)，得到氟吡酰草胺線性回歸方程為y = 73 438x + 152 135，線性相關(guān)系數(shù)為0.999 9。

圖4 氟吡酰草胺線性關(guān)系圖

3.4 分析方法的精密度試驗 從同一產(chǎn)品中準確稱取5個試樣，在上述色譜操作條件下進行分析，測得氟吡酰草胺的標(biāo)準偏差分別為0.151，變異系數(shù)分別為0.752%(表1)。

表1 分析方法的精密度試驗結(jié)果

3.5 分析方法的準確度試驗 從已知質(zhì)量分數(shù)的氟吡酰草胺懸浮劑(20.09%)中稱取5個試樣，分別加入一定量的氟吡酰草胺標(biāo)樣(99.8%)，在上述色譜操作條件下進行分析，測得氟吡酰草胺的平均回收率為99.8%(表2)。

表2 分析方法的準確度試驗結(jié)果

4 結(jié)論

本文建立了氟吡酰草胺懸浮劑有效成分含量測定的高效液相色譜分析方法，試驗結(jié)果表明，本方法分離效果好、線性關(guān)系良好，具有較高的精密度和準確度，分析操作簡便快捷，是氟吡酰草胺懸浮劑產(chǎn)品質(zhì)量控制較為理想的分析方法。