于佳瀚 高立明 孔夢悅 王昭慧 王超群

據(jù)2015 年報道，中國主要惡性消化系統(tǒng)腫瘤（胃癌、食管癌、結直腸癌、胰腺癌、肝癌）占全部新發(fā)惡性腫瘤病例的48.69%，其中胃癌占全部惡性腫瘤發(fā)病的第2 位［1-2］。目前手術切除是治療胃癌的有效方法，但進展期胃癌的預后仍因診斷晚而預后較差［3］。近年來腫瘤標志物對腫瘤預后的臨床應用價值正在逐步提高。血清腫瘤標志物是與腫瘤相關的抗原，在一定程度上能夠反映癌癥的發(fā)展，對腫瘤療效評價、預后判斷等具有重要意義［4］。甲胎蛋白（Alpha-fetoprotein，AFP）是臨床常見的腫瘤標志物，對惡性腫瘤的評估具有重要作用［5］。血管生成素樣蛋白5（angiopoietin like protein 5，ANGPTL5）作為ANGPTLs 家族成員之一，主要起調節(jié)甘油三酯代謝，對糖尿病及肥胖具有潛在作用，但在癌癥中作用研究較少［6］。本研究將重點分析胃癌患者ANGPTL5、AFP 表達水平與臨床病理特征及預后的關系，以期為臨床診治胃癌患者提供新的生物學依據(jù)?，F(xiàn)將結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2014 年5 月至2017 年5 月在承德醫(yī)學院附屬秦皇島市第一醫(yī)院接受治療的的胃癌患者52例為胃癌組，所有患者癌組織均經(jīng)2 位有經(jīng)驗的醫(yī)生進行病理診斷，術后經(jīng)組織病理學確診為胃癌［7］。男29 例，女23 例；年齡平均（63.74±8.56）歲。納入標準：①患者未進行化療、放療及其他藥物治療；②患者臨床資料完整、能夠配合完成隨訪。排除標準：①患者并發(fā)其它惡性腫瘤；②肝、腎功能嚴重異常；③合并自身免疫性疾病者；④血液系統(tǒng)疾病。選取同時期在本院體檢的健康者52 名為對照組，男27 名，女25 名；年齡平均（64.11±8.64）歲。胃癌組、對照組年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。本研究符合《世界醫(yī)學協(xié)會赫爾辛基宣言》相關要求，受試者或家屬已簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 樣品采集

胃癌組所有患者在入院24 h 內(nèi)、體檢者于體檢當天采取靜脈血4～6 mL 裝于普通采血管中，4℃，3 500 r/min（離心半徑為8 cm），離心15 min，留上清，凍存于-80 度冰箱中，待測。

1.2.2 檢測血清中ANGPTL5、AFP 水平

采用化學發(fā)光微粒子免疫分析法檢測血清中AFP 水平，應用Roche Elecsys2010 電化學發(fā)光免疫分析儀。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測ANGPTL5水平，試劑盒由武漢華美生物工程有限公司提供并按照說明書步驟嚴格操作。

1.3 隨訪

所有患者均由2 名以上主治醫(yī)生討論治療方案，并經(jīng)患者同意后使用相應的化療方案。所有胃癌患者術后均同意接受隨訪，無失訪患者。隨訪計劃為術后隨訪3 年，術后第1、2 年內(nèi)每隔4 個月讓患者入院復查一次（條件不允許的半年復查1次），第3 年讓患者入院復查一次，并每3 個月對患者進行電話隨訪，記錄胃癌患者復發(fā)，腫瘤轉移及生存死亡情況。本次隨訪截止日期2020 年5 月。

1.4 統(tǒng)計學分析

采用SPSS 25.0 統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料用n（%）表示，采用χ2檢驗。計量資料以（±s）表示，兩組間行獨立樣本t檢驗。采用Kaplan-Meier法分析血清ANGPTL5、AFP水平與胃癌患者3年的生存情況的關系。采用COX 法分析影響胃癌患者不良預后的危險因素。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清ANGPTL5、AFP 表達水平

與對照組相比，胃癌組血清ANGPTL5、AFP 表達水平較高，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組血清ANGPTL5、AFP 表達水平（±s）Table 1 Expression levels of serum ANGPTL5 and AFP in 2 groups（±s）

表1 兩組血清ANGPTL5、AFP 表達水平（±s）Table 1 Expression levels of serum ANGPTL5 and AFP in 2 groups（±s）

組別胃癌組對照組t 值P 值n 52 52 ANGPTL5（ng/mL）35.64±5.71 7.07±1.05 35.486 0.000 AFP（IU/mL）5.33±2.04 0.94±0.32 15.331 0.000

2.2 血清ANGPTL5、AFP 水平與胃癌患者臨床病理特征關系

根據(jù)ANGPTL5、AFP 平均值將胃癌患者分為高表達組與低表達組。結果顯示ANGPTL5 高表達組、AFP 高表達組臨床Ⅲ～Ⅳ期的比例、中、高分化程度的比例、淋巴結轉移的比例、浸潤至漿膜的比例明顯高于ANGPTL5 低表達組、AFP 低表達組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 血清ANGPTL5、AFP 水平與胃癌患者臨床病理特征關系［n（%）］Table 2 Relationship between serum ANGPTL5 and AFP levels and clinicopathological characteristics of gastric cancer patients［n（%）］

2.3 ANGPTL5、AFP 表達與胃癌患者術后3 年預后

52 例胃癌患者3 年內(nèi)生存24 例（46.15%），死亡28 例（53.82%）。Kaplan-Meier 法顯示ANGPTL5低表達胃癌患者平均生存時間為（30.14±1.79）個月，顯著長于高表達胃癌患者的（19.69±2.12）個月，差異有統(tǒng)計學意義，經(jīng)Log Rank 檢驗顯示，χ2=8.002，P=0.005。AFP 低表達胃癌患者平均生存時間為（27.81±1.76）個月，顯著長于AFP 高表達胃癌患者的（17.44±2.32）個月，差異有統(tǒng)計學意義，經(jīng)Log Rank 檢驗顯示，χ2=8.074，P=0.004。見圖1。

圖1 ANGPTL5、AFP 表達水平與胃癌患者預后的關系Figure 1 The relationship between the expression level of ANGPTL5，AFP and the prognosis of gastric cancer patients

2.4 影響胃癌患者不良預后的危險因素分析

應用COX 回歸份分析影響胃癌患者預后的危險因素顯示，浸潤深度、ANGPTL5 及AFP 高表達是影響胃癌患者不良預后的獨立危險因素（P均＜0.05）。見表3。

表3 影響胃癌患者預后的危險因素分析Table 3 Analysis of risk factors affecting the prognosis of patients with gastric cancer

3 討論

胃癌是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤。調查顯示，我國每年新發(fā)胃癌病例為67.9 萬，死亡病例為49.8 萬，胃癌是危害中國人類健康的惡性腫瘤之一［8］。早期胃癌患者大部分臨床表現(xiàn)無特異性，少數(shù)會有嘔吐、腹疼痛、惡心等，因此，大多數(shù)患者在醫(yī)院確診時已處于中晚期。

近年來，胃癌患者血清腫瘤標志物逐漸應用于檢測患者預后，為臨床治療提供合理有效的方案［9］。AFP 是胚胎發(fā)育過程中由卵黃囊和肝細胞合成的一種糖蛋白，是原發(fā)性肝癌的腫瘤標志物，同時還可參與細胞增殖和代謝的調控，在免疫應答過程中可抑制腫瘤患者多腫瘤細胞的免疫應答［10-11］。近年來越來越多的學者認識到胃癌、胰腺癌、膽囊癌等惡性腫瘤均可不同程度產(chǎn)生AFP，其中胃癌產(chǎn)生率最高［12］。成人在正常生理情況下，AFP 濃度較低，在胃癌患者血清中存在顯著高表達［13］。調查顯示，AFP 高表達胃癌患者具有癌細胞增殖強、細胞凋亡低、新生血管增多、惡性程度更高、易轉移、預后差的特點，臨床上更需要關注患者預后情況［14］。Feng 等［15］研究認為AFP 與胃癌腫瘤大小、腫瘤浸潤深度、淋巴結轉移等有關系，此外，術前AFP 水平的升高被證明與胃癌不良預后相關。本研究顯示，胃癌組血清AFP 表達水平明顯高于對照組，進一步分析顯示，AFP 與患者的臨床分期、分化程度、淋巴結轉移、浸潤深度相關，提示AFP 可能與胃癌發(fā)生、發(fā)展有關。本研究結果顯示AFP與胃癌分化程度相關，與Feng 等［15］研究有差異，可能原因是本研究僅納入52 例患者，樣本量不足夠豐富，可能引起結果與以往研究結果存在一定差異。

ANGPTL5 多表達于脂肪組織，可參與糖脂代謝、血細胞生成及癌癥發(fā)生。有研究顯示，肥胖兒童ANGPTL5 水平異常升高，ANGPTL5 可能參與心血管疾病，在預測肥胖癥及代謝類疾病預后中具有重要作用［16］。另有研究對非小細胞肺癌患者組織中ANGPTL5 表達進行檢測顯示，癌組織ANGPTL5 高表達率達55.3%，且陽性表達患者的總體生存率明顯低于陰性表達者，推測阻斷ANGPTL5 或可作為治療非小細胞肺癌有效途徑之一［17］。本研結果提示ANGPTL5 可能與胃癌發(fā)生有關。對ANGPTL5 與臨床特征進一步分析顯示，本研究發(fā)現(xiàn)ANGPTL5 與患者的臨床分期、分化程度、淋巴結轉移、浸潤深度相關，與聶思月等［18］結果相似，提示ANGPTL5 可能與胃癌的病情進展有關，猜測ANGPTL5 可能通過調控胃癌腫瘤的細胞增殖與凋亡而參與胃癌進展。對患者術后進行為期3 年隨訪，結果顯示ANGPTL5、AFP 高表達胃癌患者生存時間顯著低于低表達者，提示高水平ANGPTL5、AFP 對胃癌患者預后造成不良影響。另進行COX 多因素分析顯示，浸潤深度、ANGPTL5 及AFP 高表達是影響胃癌患者不良預后的危險因素，提示浸潤深度越深，ANGPTL5 及AFP 表達水平越高，則患者預后越差，可能為臨床預測患者預后提供一定參考依據(jù)。臨床應關注有高危因素患者，及時檢測血清指標，便于及時發(fā)現(xiàn)異常，采取相應治療措施，以盡可能改善患者預后，延長生存期。

綜上所述，胃癌患者血清ANGPTL5、AFP 表達水平均明顯上升，可能參與不良預后的發(fā)生，可能為臨床評估患者預后提供理論參考。