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        火麻仁蛋白及多肽提取工藝研究進(jìn)展

        2022-02-02 03:38:16齊麗穎郭倩趙明張樹(shù)軍時(shí)志春王偉明王麗艷
        高師理科學(xué)刊 2022年12期
        關(guān)鍵詞:火麻仁多肽蛋白酶

        齊麗穎,郭倩,趙明,張樹(shù)軍,時(shí)志春,王偉明,王麗艷

        (1.齊齊哈爾大學(xué) 化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院,黑龍江 齊齊哈爾 161006;2.國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)管技術(shù)創(chuàng)新中心(工業(yè)大麻),黑龍江 齊齊哈爾 161006)

        火麻(Cannabis sativaL.)是桑科大麻屬植物,也稱為工業(yè)大麻,是一種無(wú)毒大麻.在我國(guó)東北、華北、華南等多地有種植,作為纖維或油料作物使用.火麻莖皮可用來(lái)織布、造紙或編制繩索;葉可用來(lái)入藥,《普濟(jì)方》中就有記載其用來(lái)治療瘧疾;種子可榨油,油渣可以用作動(dòng)物飼料.火麻成熟干燥果實(shí)稱為火麻籽,呈扁卵圓形,頂端略尖,長(zhǎng)約4~5 mm,直徑2.5~4 mm,常見(jiàn)為灰色、灰褐色,表面有類似西瓜的條紋,兩邊有棱,別名大麻子、麻子仁等.火麻籽去殼得火麻仁,火麻仁含有大量蛋白質(zhì)、不飽和脂肪酸、卵磷酸、多種人體必需的氨基酸以及微量元素.據(jù)古籍記載,火麻仁具有醫(yī)療活性,可以入藥.麻仁潤(rùn)腸丸就是以火麻仁為主要成分的中成藥[1],關(guān)于其藥用特性始見(jiàn)于《神農(nóng)本草經(jīng)》,后在《千金方》《肘后方》《近效方》等多本醫(yī)學(xué)古籍中也有記載,其具有滋陰補(bǔ)虛、潤(rùn)腸通便、助消化、治療血虛津虧等藥效,對(duì)高血壓、膽固醇等疾病也有療效.此外,火麻仁由于類似堅(jiān)果口感,還可作為食物食用,2002 年,火麻仁正式被公布作為藥食同源物質(zhì).

        據(jù)報(bào)導(dǎo),火麻仁中的蛋白質(zhì)主要為麻仁球蛋白和麻仁白蛋白,其蛋白含量在20%~25%,去除油脂后的火麻仁籽粕中蛋白含量可達(dá)68.66%[2].而且火麻仁蛋白中氨基酸種類豐富,含有多種人體必需的氨基酸且其含量較高,以谷氨酸和精氨酸為主[3],因此,可以認(rèn)為火麻仁蛋白是一種相對(duì)優(yōu)質(zhì)的植物蛋白資源.將火麻仁蛋白水解,得到火麻仁多肽.由于生物活性肽具有抗氧化、降血壓、降血糖、調(diào)節(jié)免疫等特性[4-8],受到研究者的廣泛關(guān)注.目前,對(duì)火麻仁的研究利用大多止于油脂提取,在榨取了火麻仁油后,剩余的火麻仁粕中還含有火麻仁蛋白,往往被用作動(dòng)物飼料或者直接丟棄,造成環(huán)境污染及資源浪費(fèi),對(duì)火麻仁中蛋白及多肽的研究還相對(duì)較少.因此,本文主要闡述了火麻仁蛋白及多肽的提取工藝,以期在未來(lái)可以將此作為重點(diǎn)研究?jī)?nèi)容,從而拓寬火麻仁的應(yīng)用范圍.

        1 火麻仁蛋白提取工藝

        1.1 堿溶酸沉法

        大多數(shù)蛋白在堿性環(huán)境下易溶解,故可以利用其在堿性溶液中生成易溶物、在酸性溶液中生成沉淀的性質(zhì)使用堿溶酸沉法獲取蛋白,堿溶酸沉法是目前應(yīng)用較多的提取方法.伍圣文[9]等從脫殼處理的火麻仁粕中提取的火麻仁蛋白回收率為(83.90±0.69)%,具有較好的持水性、持油性、起泡性和乳化性,而且經(jīng)過(guò)體外模擬消化后,火麻仁蛋白消化率達(dá)到(92.66±0.23)%.徐鵬偉[10]等以機(jī)械壓榨(脫殼)脫脂火麻仁粉為原料,采用堿溶酸沉法制備的火麻仁蛋白含量為85.9%,蛋白回收率高.劉淑霞[11]等采用堿溶酸沉法并利用響應(yīng)面法優(yōu)化得到火麻仁蛋白質(zhì)最大實(shí)際提取率為24.47%.

        1.2 酶解法

        酶解法即使用酶將蛋白質(zhì)水解,進(jìn)而提取的方法.李曉君[12]等利用酶解法,采用正交實(shí)驗(yàn)得到最佳條件為:中性蛋白酶添加量1.0%,液料比6∶1,提取溫度50℃,提取時(shí)間1.5 h,此時(shí)蛋白提取率為(41.6±0.8)%.

        1.3 其它方法

        除采用常規(guī)方法提取蛋白外,學(xué)者還嘗試采用新技術(shù)手段提取蛋白,以提高蛋白提取率.徐鵬偉[10]等以脫脂火麻仁粉為原料,采用鹽溶鹽析法制備的火麻仁蛋白含量94.8%,較堿溶酸沉法提取的蛋白含量(85.9%)高,外觀色澤亮白,其蛋白主要為火麻仁球蛋白,且含有高達(dá)15.09%的精氨酸,有利于心血管健康.程艷波[13]等采用水酶法制備火麻仁蛋白,比較了酸性蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、果膠酶、纖維素酶對(duì)火麻仁蛋白的提取率,在10%~75%之間.通過(guò)單因素與正交實(shí)驗(yàn)法最終確定火麻仁蛋白的最佳提取工藝條件:固液比為1∶15,pH=7.5,酶添加量為1.5%,反應(yīng)時(shí)間為90 min.此條件下火麻仁蛋白提取率為74.12%.Hadnadev[14]等采用膠束化法,使用氯化鈉溶液溶解火麻仁蛋白,通過(guò)透析袋脫鹽,最終使蛋白質(zhì)沉淀析出.吳俊鋒[15]等利用噴射蒸煮技術(shù)從火麻仁榨油后的下腳料(含蛋白質(zhì)83.21%)中提取火麻仁蛋白質(zhì),確定了最佳工藝條件:料液比1∶10,pH=9.0,攪拌時(shí)間30 min,膠體磨6 000 r/min研磨10 min,調(diào)pH=9.0,攪拌20 min,所得蛋白質(zhì)含量為45.37%.黎科亮[16]等采用亞臨界萃取工藝得到脫脂火麻粕,粉碎后制成火麻粗蛋白粉,最佳工藝條件為:料液比1∶10,萃取時(shí)間35 min,萃取溫度32℃,所得火麻粗蛋白粉蛋白質(zhì)含量為75.31%.沈慧[17]等采用超聲輔助有機(jī)溶劑法提取火麻蛋白,通過(guò)單因素與正交實(shí)驗(yàn)結(jié)合的方法確定最佳條件:料液比為1∶40,超聲時(shí)間30 min,超聲溫度30℃,超聲頻率25 kHz,所得火麻仁蛋白粉純度為74.41%,提取率為69.25%.

        火麻仁蛋白常用提取方法的優(yōu)點(diǎn)、不足及提取率見(jiàn)表1.

        表1 火麻仁蛋白常用提取方法

        2 火麻仁多肽提取工藝

        植物多肽近些年受到廣泛關(guān)注,但是目前對(duì)火麻仁多肽的研究報(bào)導(dǎo)相對(duì)較少,且對(duì)于火麻仁多肽的提取主要使用酶解法,其它方法還鮮有甚至不曾有過(guò)報(bào)導(dǎo).

        2.1 酶解法

        酶解法是指用生物酶催化蛋白質(zhì)獲得多肽的方法.該方法制備的多肽分子量較小且具有較強(qiáng)的活性和多樣性,被廣泛應(yīng)用于多肽制備.陳霞[20]等采用堿溶酸沉法提取火麻仁粕中的蛋白質(zhì),然后使用堿性蛋白酶酶解蛋白12 h,得到火麻仁粕蛋白肽,其水解度為16.62%.魏連會(huì)[21]等選擇木瓜蛋白酶和堿性蛋白酶進(jìn)行雙酶水解漢麻粕蛋白研究,最佳水解度可達(dá)26.42%.衛(wèi)萍[22]等以堿性蛋白酶、中性蛋白酶、風(fēng)味酶和木瓜蛋白酶單酶酶解以及雙酶復(fù)合酶解火麻蛋白,以ACE 抑制率為指標(biāo),確定了火麻蛋白最佳分步酶解組合與最佳工藝條件,為開(kāi)發(fā)具有市場(chǎng)潛力的火麻多肽類降血壓藥物和營(yíng)養(yǎng)素提供基礎(chǔ).

        2.2 微生物發(fā)酵法

        微生物發(fā)酵法屬于生物工程范疇的新技術(shù),是指通過(guò)控制微生物的代謝和發(fā)酵使球蛋白轉(zhuǎn)化為多肽的方法.該方法具有成本低廉、無(wú)污染、所得產(chǎn)物產(chǎn)量高、生物成分營(yíng)養(yǎng)損失少等優(yōu)點(diǎn).林金鶯[23-24]等對(duì)火麻仁粕進(jìn)行液體發(fā)酵研究,確定了制備多肽最佳條件:火麻仁粕含量7%,pH 為7.5,發(fā)酵溫度30℃,發(fā)酵48 h,所得多肽含量最高,有希望應(yīng)用于調(diào)味品領(lǐng)域;利用枯草芽孢桿菌對(duì)火麻仁粕進(jìn)行發(fā)酵,確定最佳發(fā)酵條件:底物濃度為5%,枯草芽孢桿菌添加量為15%,發(fā)酵溫度37℃,發(fā)酵時(shí)間30 h,此參數(shù)下多肽得率可達(dá)50.5%.目前,發(fā)酵法研究較少,如何通過(guò)控制發(fā)酵條件達(dá)到所需效果是需要關(guān)注的難點(diǎn).

        3 結(jié)語(yǔ)

        本文結(jié)合火麻仁產(chǎn)業(yè)的現(xiàn)狀及蛋白、多肽的提取工藝,剖析目前火麻仁蛋白、多肽提取存在的問(wèn)題,以期對(duì)火麻仁蛋白、多肽的提取研究提供思路.為火麻仁多肽的高效制備和抗氧化肽等高附加值產(chǎn)品的研發(fā)提供理論依據(jù),有望應(yīng)用于醫(yī)藥、保健品、食品和水基化妝品等領(lǐng)域.以火麻仁多肽為基礎(chǔ),研發(fā)降壓藥、降糖藥、降脂藥、面膜、乳液等產(chǎn)品配方,進(jìn)一步推動(dòng)我國(guó)火麻產(chǎn)業(yè)的發(fā)展建設(shè).

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