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        雪峰山區(qū)域不同產(chǎn)地天麻化學(xué)成分含量比較研究

        2022-02-01 05:37:24薛華麗田玉橋邱小燕謝美鳳林承雄陳三春楊珊
        中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志 2022年12期

        薛華麗 田玉橋 邱小燕 謝美鳳 林承雄 陳三春 楊珊

        天麻(Gastrodia elata Blume)是我國四大名貴藥材之一,藥用歷史久遠(yuǎn),具有祛風(fēng)止痛,化瘀通絡(luò),平肝潛陽,平息肝風(fēng),制止痙攣的功效[1~3]。目前我國天麻主要有五種變型[4],即松天麻(Gastrodia elata Bl.f.alba S.Chow)、紅天麻(Gastrodia elata Bl.f.elata)、綠天麻(Gastrodia elata Bl.f.viridis)、烏天麻(Gastrodia elata Bl.f.glauca S.Chow)和黃天麻(Gastrodia elata Bl.f.flavida S.Chow)。天麻素和天麻多糖是天麻的重要化學(xué)成分,天麻素具有保護(hù)人體神經(jīng)元細(xì)胞、緩解疼痛、提高免疫力、抗氧化、鎮(zhèn)靜安定、促進(jìn)睡眠和抗炎等作用,天麻多糖具有增強(qiáng)免疫力、抑制細(xì)菌生長、清除自由基、降低血壓的功效[5,6]。

        本研究以雪峰山區(qū)域的紅天麻、烏天麻、烏紅雜交天麻和綠天麻四種不同變型天麻為研究對象,比較紅天麻、烏天麻、綠天麻、烏紅雜交天麻中的浸出物、天麻多糖、天麻素及對羥基苯甲醇總含量,為本區(qū)域的天麻含量評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)材料從湖南、貴州、湖北等地采集了12份不同變型天麻的新鮮塊莖,洗凈,蒸制15min,置于55℃烘箱中烘干,粉碎后過100 目藥典篩,備用。所采樣品由同一名專家鑒定,樣品信息見表1。

        表1 樣品信息表

        1.2 儀器與試劑DGG-9123A 型電熱鼓風(fēng)干燥箱(森信儀器有限公司);AL204 型電子天平(梅特勒-托利多有限公司);UV-1800 型紫外-可見分光光度計(jì)(島津儀器有限公司);Agilent 液相色譜儀(俊奇儀器設(shè)備有限公司)。蒽酮、無水乙醇、過氧化氫、氫氧化鈉、稀乙醇、鹽酸、濃硫酸(懷化科之源儀器有限公司);天麻素標(biāo)準(zhǔn)品、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品、對羥基苯甲醇標(biāo)準(zhǔn)品(上海詩丹德標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)有限公司);乙腈、磷酸(北京索萊寶科技有限公司)。

        1.3 指標(biāo)測定方法

        1.3.1 浸出物含量測定 取天麻樣品2~4g,并記錄數(shù)據(jù),加入到錐形瓶里,并加入75ml 稀乙醇,蓋好瓶塞并稱定其總重量,靜置1h,連接冷凝管后,打開電熱爐加熱錐形瓶,直到溶液沸騰,并保持微沸的狀態(tài)1h。等溶液冷卻后,將錐形瓶拿下并塞好瓶塞,再次稱定并記錄其總重量,加入稀乙醇,并使其總重量與第一次稱的總重量相等,混合均勻,過濾,將蒸發(fā)皿烘干,并使之達(dá)到恒重的狀態(tài),蒸發(fā)皿中再加入25ml 濾液,轉(zhuǎn)移到水浴鍋上進(jìn)行蒸干,調(diào)節(jié)干燥箱溫度為105℃,并將蒸發(fā)皿放入干燥箱中烘干3h,再放到干燥器中冷卻30min,然后快速地進(jìn)行稱重。再計(jì)算出天麻樣品中浸出物的含量(%)。進(jìn)行平行試驗(yàn)。

        1.3.2 天麻多糖含量測定 采用蒽酮-硫酸法測定天麻多糖[7],在檢測波長為620nm 的情況下,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=0.6848X+0.0132,R2=0.9987,測定天麻樣品溶液的吸光度,再計(jì)算天麻多糖的含量。

        1.3.3 天麻素及對羥基苯甲醇總含量測定 采用液相色譜法測定天麻素及對羥基苯甲醇總含量[8],系統(tǒng)條件:固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠;流動(dòng)相為乙腈-0.05%磷酸溶液(3:97);檢測條件的波長為220nm。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010 整理分析。運(yùn)用單因素方差分析比較不同產(chǎn)地天麻的浸出物、多糖、天麻素及對羥基苯甲醇總含量的差異;采用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行顯著性分析;采用OriginPro 2021 進(jìn)行相關(guān)性分析。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 不同產(chǎn)地天麻浸出物含量比較12 個(gè)不同產(chǎn)地的天麻浸出物平均含量為21.497%,變異系數(shù)為0.175%,變幅在15.673%~28.975%,極差為13.302%,標(biāo)準(zhǔn)差為3.770%。表明浸出物含量相對穩(wěn)定。根據(jù)《中國藥典》規(guī)定[9],天麻浸出物含量不得少于15.0%,本研究中不同變型天麻均符合要求,其中貴州畢節(jié)和大方的烏天麻浸出物含量顯著高于其他產(chǎn)地的天麻(P<0.05)。湖南綏寧的烏紅雜交天麻和湖北英山的綠天麻浸出物含量較低,顯著低于其他變型天麻的浸出物含量(P<0.05)。見表2。

        2.2 不同產(chǎn)地天麻多糖含量比較12 個(gè)不同產(chǎn)地的天麻多糖平均含量為19.371%,變異系數(shù)為0.249%,變幅在12.926%~27.681%,極差為14.755%,標(biāo)準(zhǔn)差為4.825%。湖南洪江的紅天麻和湖北羅田的紅天麻多糖含量顯著高于其他產(chǎn)地的天麻(P<0.05)。湖南會(huì)同的綠天麻多糖含量較低,且顯著低于其他變型天麻的多糖含量(P<0.05)。見表2。

        2.3 不同產(chǎn)地天麻的天麻素及對羥基苯甲醇總含量比較12 個(gè)不同產(chǎn)地的天麻素及對羥基苯甲醇的平均含量為0.389%,變異系數(shù)為0.293%,變幅在0.235%~0.603%,極差為0.368%,標(biāo)準(zhǔn)差為0.114%,表明天麻素及對羥基苯甲醇總含量在產(chǎn)地之間差異較大。貴州畢節(jié)和德江烏天麻的天麻素及對羥基苯甲醇總含量最高,顯著高于其他產(chǎn)地天麻(P<0.05)。湖北羅田的紅天麻、湖北宜昌的烏紅雜交天麻和湖南會(huì)同的綠天麻的天麻素及對羥基苯甲醇總含量較低,顯著低于其他產(chǎn)地天麻(P<0.05)。見表2。

        表2 不同產(chǎn)地天麻的浸出物、天麻多糖、天麻素及對羥基苯甲醇總含量比較()

        表2 不同產(chǎn)地天麻的浸出物、天麻多糖、天麻素及對羥基苯甲醇總含量比較()

        2.4 相關(guān)性分析采用OriginPro 2021 軟件對12 個(gè)不同產(chǎn)地天麻的浸出物、多糖、天麻素及對羥基苯甲醇總含量進(jìn)行相關(guān)性分析,浸出物含量與天麻素及對羥基苯甲醇總含量呈極顯著正相關(guān)(r=0.652,P<0.01);浸出物含量與多糖、多糖與天麻素及對羥基苯甲醇總含量無顯著相關(guān)性(r=0.023、r=-0.061,P>0.05)。

        2.5 聚類分析采用SPSS 27.0 軟件以“組件聯(lián)接”和“平方歐式距離”聚類方法對不同產(chǎn)地的天麻進(jìn)行聚類分析,當(dāng)歐式距離約為10.0 時(shí),12 個(gè)天麻產(chǎn)地可分為三類。第一類包括湖南洪江、湖南溆浦、湖北羅田的紅天麻和湖北恩施的烏紅雜交天麻,該類產(chǎn)地的天麻多糖含量較高;第二類包括貴州大方和貴州畢節(jié)的烏天麻,該類產(chǎn)地天麻的浸出物含量較高;第三類包括貴州德江、畢節(jié)的烏天麻,湖南綏寧、湖北宜昌的烏紅雜交天麻,湖南新寧、湖南會(huì)同、湖北英山的綠天麻,該類產(chǎn)地天麻多糖含量相對較低。見圖1。

        圖1 聚類分析

        3 討論

        不同產(chǎn)地及變型的天麻隨栽培土壤、氣候環(huán)境變化,其有效成分含量均有較大差異,隨著種植技術(shù)的突破和大健康產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,天麻種植區(qū)域不斷擴(kuò)大,本研究對雪峰山區(qū)域12 個(gè)不同產(chǎn)地的天麻浸出物、天麻多糖、天麻素及對羥基苯甲醇成分含量進(jìn)行了比較分析?!吨袊幍洹?020 版規(guī)定天麻浸出物含量不得少于15.0%,本研究中的12 個(gè)不同產(chǎn)地、不同變型天麻浸出物含量均高于15.0%,其中貴州畢節(jié)的烏天麻的浸出物含量最高(28.975%),其次是貴州大方的烏天麻(26.754%)和湖南新寧的綠天麻(24.327%)。天麻多糖是天麻中重要的有效成分,也是一種衡量天麻品質(zhì)質(zhì)量的指標(biāo),不同變型和不同的環(huán)境因素造成天麻中多糖含量有所差異,本試驗(yàn)中湖南洪江的紅天麻多糖含量最高(27.681%),其次是湖北羅田的紅天麻(26.337%)和湖南溆浦的紅天麻(24.983%),紅天麻的多糖含量高于烏天麻、綠天麻和烏紅雜交天麻,這與王銳等[10]的研究結(jié)果一致,產(chǎn)地相同時(shí),紅天麻中天麻多糖含量與其他三個(gè)品種天麻中天麻多糖含量存在較大差異(P<0.05),而變型相同時(shí),生長產(chǎn)地為云南的紅天麻中天麻多糖含量超過了生長產(chǎn)地為湖北和陜西的紅天麻。本研究中湖南洪江的紅天麻多糖含量最高,可能與其特殊的氣候環(huán)境因素有關(guān),高海拔、晝夜溫差大使當(dāng)?shù)刂参镏刑欠值暮肯鄬τ谄渌貐^(qū)高。天麻素及對羥基苯甲醇總含量是評(píng)價(jià)天麻質(zhì)量的重要指標(biāo),本研究中,烏天麻的天麻素其對羥基苯甲醇總含量相對較高,其中最高的是貴州畢節(jié)的烏天麻(0.603%),其次是貴州德江的烏天麻(0.575%)和貴州大方的烏天麻(0.489%)。王彩云等[11]研究表明,不同產(chǎn)地的天麻中天然活性成分對羥基苯甲醇和天麻素的含量有差異,可能是生長條件等因素導(dǎo)致。

        通過對不同產(chǎn)地的天麻進(jìn)行聚類分析,第一類包括湖南洪江、湖南溆浦、湖北羅田的紅天麻和湖北恩施的烏紅雜交天麻,該類產(chǎn)地的天麻多糖含量較高,第二類包括貴州大方和貴州畢節(jié)的烏天麻,該類產(chǎn)地天麻的浸出物含量較高,第三類包括貴州德江、畢節(jié)的烏天麻,湖南綏寧、湖北宜昌的烏紅雜交天麻,湖南新寧、湖南會(huì)同、湖北英山的綠天麻,該類產(chǎn)地天麻多糖含量相對較低。本研究為雪峰山區(qū)域不同變型天麻開發(fā)利用和產(chǎn)業(yè)化推廣提供數(shù)據(jù)參考。

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