胡彥偉，焦智民，郭君蘭，楊 柳，張春珍

食管癌是我國常見的惡性腫瘤，由于飲食多樣化和社會平均年齡的增長，食管癌的患病率逐漸增多[1]。早期食管癌的預(yù)后較中晚期明顯較好，但食管癌患者早期多無癥狀，確診時常為中晚期，導(dǎo)致預(yù)后較差[1]。隨著醫(yī)學(xué)不斷發(fā)展，越來越多腫瘤相關(guān)分子檢測應(yīng)用于臨床，這些檢測可為惡性腫瘤的診治提供參考。因此，研究腫瘤相關(guān)分子與食管癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)聯(lián)，可能為食管癌的診治，尤其是早期診斷提供一定的幫助[2]。

FK506結(jié)合蛋白(FK506 binding proteins,FKBPs)，是高度保守的伴侶分子蛋白家族，通過激活組蛋白分子伴侶，調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子及改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)影響基因表達(dá)、修復(fù)及復(fù)制等[3]。目前已發(fā)現(xiàn)至少15種該家族成員，其中FK506結(jié)合蛋白5(FK506 binding protein 5,FKBP5)，又稱FKBP51(FK506 binding protein 51)是其成員之一[4]。有研究顯示FKBP5與某些實體瘤的發(fā)生有關(guān)，其高表達(dá)可誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化為腫瘤干細(xì)胞[5-6]。在人類腫瘤研究中，F(xiàn)KBP5表達(dá)升高或降低均有發(fā)現(xiàn)。目前越來越多研究顯示FKBP5可能是腫瘤的一個新治療靶點[7-9]。國內(nèi)外最新的研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)KBP5與食管腺癌患者的生存呈負(fù)相關(guān)，可作為影響預(yù)后的獨立指標(biāo)[10-11]。在國內(nèi)，食管鱗癌、食管胃交界癌中FKBP5的表達(dá)等研究尚未見報道。因此作者設(shè)計了該課題，采用免疫組化檢測食管鱗癌組織中FKBP5的表達(dá)，旨在研究FKBP5與食管癌的發(fā)生、預(yù)后的相關(guān)性?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取河南省安陽腫瘤醫(yī)院2016年10月至2017年9月手術(shù)并確診的食管癌患者49例(手術(shù)前均未行新輔助放化療)，年齡48～76歲，中位年齡65歲，疾病病理分期采用國際TNM分期：Ⅰ+Ⅱ期33例(67.35%)，Ⅲ期16例(32.65%)；腫瘤直徑<4 cm者35例(71.43%)，≥4 cm者14例(28.57%)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性者20例(40.82%)，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者29例(49.18%)。

1.2 免疫組化本課題所應(yīng)用組織均為10%甲醛固定常溫約24 h，由我院病理科醫(yī)師石蠟包埋；將所有標(biāo)本切成4 μm厚切片；在室溫下用抗FKBP5 (Bio-Rad， USA)一抗孵育2 h。FKBP5免疫組化染色(食管癌及癌旁組織)均使用本院全自動免疫組化機(jī)(LEICA，Germany)。免疫組化結(jié)果由我院2名病理科醫(yī)師進(jìn)行閱片，判分標(biāo)準(zhǔn)：1+，1%～25%的陽性細(xì)胞；2+,25%～50%的陽性細(xì)胞；3+,50%～75%的陽性細(xì)胞；4+,≥75%陽性細(xì)胞。細(xì)胞著色：0分,陰性；1分,淺棕色；2分,棕色；3分,棕褐色。最終按總積分，即陽性率積分?jǐn)?shù)和著色程度積分?jǐn)?shù)相乘，分為高表達(dá)和低表達(dá)：低表達(dá)<5分，高表達(dá)≥5分[12]。見圖1。

圖1 免疫組化檢測FKBP5在食管癌(A)和癌旁組織(B)中的表達(dá)(SP法，×200)

2 結(jié)果

2.1 食管癌組織及癌旁組織中FKBP5蛋白的表達(dá)FKBP5定位于細(xì)胞的胞核。49例食管癌組織中，高表達(dá)39例(79.59%)，低表達(dá)10例(20.41%)，而在食管癌癌旁組織中FKBP5高表達(dá)僅2例(4.08%) ，而FKBP5低表達(dá)47例( 95.92%)。FKBP5在食管癌組織、癌旁組織中的表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=57.4，P<0.05) 。

2.2 FKBP5表達(dá)與食管癌臨床病理特征FKBP5蛋白在食管癌中的表達(dá)與食管癌患者的性別、年齡、食管鱗癌不同病理分類、腫瘤發(fā)生部位、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及神經(jīng)浸潤、pTNM分期等均未見明顯相關(guān)性(P>0.005)，見表1。

1 食管癌中FKBP5水平與臨床病理特征的關(guān)系 例(%)

2.3 FKBP5的表達(dá)與食管癌患者預(yù)后食管癌患者中FKBP5高表達(dá)組的平均生存期為30.4個月，低表達(dá)組為35.5個月，顯示FKBP5高表達(dá)患者的3 a生存率低于低表達(dá)者，即FKBP5低表達(dá)組預(yù)后更好(χ2=16.62，P<0.05)。見圖2。

圖2 FKBP5不同表達(dá)水平食管癌患者3 a生存期的生存圖

3 討論

食管癌是我國常見的消化系統(tǒng)腫瘤之一，尤其是食管鱗癌在全球多見，我國高發(fā)地區(qū)為太行山周邊的河南、山西及廣東的部分地區(qū)等[13]。食管癌早期常無癥狀，診斷困難，確診通常為中晚期。因此，食管癌患者的總體預(yù)后較差[14]。目前關(guān)于食管癌分子學(xué)和形態(tài)學(xué)的研究已開展很多，但是仍未找到可應(yīng)用于臨床的預(yù)測因子。如能發(fā)現(xiàn)明確的因子可預(yù)測及判斷預(yù)后，對全民篩選，尤其是高危地區(qū)人群篩選，以及更好的個體化精準(zhǔn)治療將大為有益。FKBP5的羧基末端有3個肽重復(fù)(TPR)，其功能與熱休克蛋白HSP90、HSP70及其他蛋白質(zhì)，如類固醇激素受體之間的相互作用有關(guān)。孕激素受體和雄激素受體(AR)均屬于類固醇激素受體[6]，在 FKBP5的作用下類固醇激素受體的轉(zhuǎn)錄活性降低，但不會降低雄激素受體的轉(zhuǎn)錄活性。FKBP5的異常表達(dá)在多種腫瘤中都有發(fā)現(xiàn)，高表達(dá)于黑色素瘤、腎癌、顱內(nèi)腫瘤、淋巴瘤、頭頸部鱗狀細(xì)胞癌及前列腺癌等，但其在結(jié)腸癌和胰腺癌中的表達(dá)下調(diào)或不表達(dá)[7]。研究發(fā)現(xiàn)，在黑色素瘤中FKBP5與腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移灶大小相關(guān)[8]，在膠質(zhì)瘤中FKBP5與膠質(zhì)瘤的分級、總生存、預(yù)后存在一定相關(guān)性[13]。這些研究顯示，F(xiàn)KBP5蛋白或成為新的腫瘤分子標(biāo)記之一，它可能通過不同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑調(diào)控轉(zhuǎn)錄、DNA修復(fù)等，從而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。目前很多研究顯示，F(xiàn)KBP5可能是一個新的腫瘤診斷、治療靶點[9]。FKBP5的表達(dá)通?？烧{(diào)控AR信號功能，在前列腺癌研究中發(fā)現(xiàn)它優(yōu)于其他AR目的基因[10]。國內(nèi)外最新研究發(fā)現(xiàn)，AR和FKBP5與食管腺癌的生存呈負(fù)相關(guān)，可作為影響預(yù)后的獨立指標(biāo)[11]。但食管鱗癌、食管胃交界癌中FKBP5的表達(dá)情況國內(nèi)外未見報道。

本研究采用免疫組織化學(xué)方法檢測FKBP5蛋白在49例食管癌組織和癌旁組織中的表達(dá)，F(xiàn)KBP5蛋白在食管癌組織中的表達(dá)為79.59%，而在癌旁組織中為4%，兩組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。揭示FKBP5表達(dá)或與食管癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。該結(jié)果與FKBP5在前列腺癌等的表達(dá)情況一致[7]。本研究中FKBP5表達(dá)與食管癌患者的性別、年齡大小、食管鱗癌不同類型、腫瘤發(fā)生部位、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、神經(jīng)浸潤及pTNM分期無顯著相關(guān)性(P>0.05)，提示FKBP5可能在食管癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及疾病預(yù)后中存在一定作用。且本研究相關(guān)結(jié)果提示，F(xiàn)KBP5低表達(dá)組食管癌患者的3 a生存率高于FKBP5高表達(dá)組，提示其或成為食管癌患者預(yù)后的新分子指標(biāo)。因此，F(xiàn)KBP5的表達(dá)可能是食管癌診治、預(yù)后檢測的新的生物學(xué)指標(biāo)之一。

本研究顯示，在食管癌組織中FKBP5表達(dá)較高，提示FKBP5可能是食管癌發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后檢測的新指標(biāo)。進(jìn)一步研究FKBP5在食管癌基礎(chǔ)及臨床中的具體分子機(jī)制，將為食管癌的早期診治(篩選)、預(yù)防及個體化精準(zhǔn)治療提供理論支持。