文│趙智香 趙玉娥（河套學(xué)院）

呼正祥（內(nèi)蒙古自治區(qū)巴彥淖爾市林業(yè)和草業(yè)局）

拓軍（內(nèi)蒙古自治區(qū)巴彥淖爾市科學(xué)技術(shù)研究所）

雞蛋的營養(yǎng)成分較為均衡，含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪、微量元素和維生素等，是我國城鎮(zhèn)居民消費(fèi)量最大的動物性食品之一。隨著我國經(jīng)濟(jì)的日益發(fā)展，人民生活水平不斷提高，消費(fèi)者對雞蛋的品質(zhì)也越來越關(guān)注。近年來，在我國政府相關(guān)政策和扶持措施的推動下，規(guī)?；B(yǎng)雞場的數(shù)量迅速增加。養(yǎng)殖高度集約化后，養(yǎng)殖密度越來越大，導(dǎo)致畜禽抵抗力下降，各種疾病的發(fā)生率居高不下。使用抗生素在畜禽養(yǎng)殖過程中可發(fā)揮重要作用，但是隨著研究的深入，抗生素過度使用導(dǎo)致的藥物殘留、耐藥性等問題日益凸顯。隨著國家禁抗令的出臺，抗生素的使用受到了限制，甚至部分抗生素被禁用，各種替代抗生素的飼料添加劑應(yīng)運(yùn)而生，如飼用酸化劑、寡糖、抗菌肽、酶制劑、中草藥添加劑以及微生物制劑等，尋找抗生素的替代品已成為養(yǎng)殖行業(yè)研究的熱點(diǎn)。在諸多的抗生素替代品中，微生物制劑在疾病的預(yù)防治療方面展現(xiàn)出較大的優(yōu)勢，有著廣闊的應(yīng)用前景。在家禽養(yǎng)殖過程中使用微生物制劑能在一定程度上替代抗生素，保持蛋雞、肉雞腸道健康，從而提高飼料轉(zhuǎn)化率和產(chǎn)蛋性能，增強(qiáng)雞體免疫力和對疾病的抵抗力，減少或降低應(yīng)激反應(yīng)的發(fā)生。較為常用的飼用微生物制劑菌株有酵母菌、乳桿菌、芽孢桿菌等。經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究，單方或復(fù)合的微生物制劑，可以耐受高酸性環(huán)境，粘附在消化道的上皮細(xì)胞上，起到抑制病原微生物對消化道的粘附以及增殖的作用。Abdelqader等人通過研究發(fā)現(xiàn)，在產(chǎn)蛋后期的蛋雞飼料中添加微生物制劑，可刺激小腸絨毛上皮細(xì)胞的再生，促進(jìn)其生長，從而增強(qiáng)雞體對營養(yǎng)的吸收，同時(shí)改善免疫功能。本試驗(yàn)將復(fù)合微生物制劑以一定的比例添加到蛋雞飼料中，研究其對海蘭褐蛋雞血清中免疫球蛋白含量的影響，為蛋雞養(yǎng)殖過程中復(fù)合微生物制劑的合理應(yīng)用提供參考依據(jù)。

一、材料與方法

1.主要試劑及儀器。市售的某品牌復(fù)合微生物制劑，主要含有酵母菌、植物乳酸菌、枯草芽孢桿菌等；禽用免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）的ELISA試劑盒，購于南京建成生物科技有限公司；吸光度檢測使用賽默飛世爾儀器有限公司生產(chǎn)的MK3型酶標(biāo)儀。

2.日糧選用。參照NRC（1998）和《NY/T33—2004雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》配制海蘭褐蛋雞飼喂過程中的基礎(chǔ)日糧，日糧配制的過程中不添加任何微生物制劑。

3.試驗(yàn)動物及管理。試驗(yàn)選用某蛋雞養(yǎng)殖場30周齡產(chǎn)蛋中期的海蘭褐蛋雞270只，將其分為3組，A組為對照組，試驗(yàn)過程中只飼喂基礎(chǔ)日糧，B、C組為試驗(yàn)組，試驗(yàn)過程中飼喂在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上添加1%或2%的復(fù)合微生物制劑，試驗(yàn)期共42天。每個(gè)試驗(yàn)組單獨(dú)給料，自由飲水。試驗(yàn)過程中保持三組飼養(yǎng)條件一致，飼養(yǎng)管理和免疫程序均按照養(yǎng)殖場的管理手冊進(jìn)行。

4.測定指標(biāo)。在試驗(yàn)的0天、21天、42天，翅靜脈采血2毫升，分離血清后于-20℃保存。血清中IgA、IgG、IgM的含量測定按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

表1 復(fù)合微生物制劑對海蘭褐蛋雞血清中IgA、IgG、IgM含量的影響 微克/毫升

5.數(shù)據(jù)分析。試驗(yàn)結(jié)果的表示用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”，試驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS23.0。

二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析

由表1可知，在試驗(yàn)的0天，B組血清中IgA含量高于其他兩組，但無顯著性差異（P＞0.05），在試驗(yàn)的21天和42天，B、C兩個(gè)試驗(yàn)組血清中IgA含量均高于對照A組，比A組分別提高了38.77%、40.59%和52.29%、52.33%（P＜0.05），但B組和C組之間差異性不顯著（P＞0.05）；在試驗(yàn)的0天，A組血清中IgG含量高于其他兩組，但無顯著性差異（P＞0.05），在試驗(yàn)的21天和42天，B、C兩個(gè)試驗(yàn)組血清中IgG含量均高于A組，與A組相比分別提高28.5%、28.3%和50.57%、48.77%（P＜0.05），但B組和C組之間差異性不顯著（P＞0.05）；在試驗(yàn)的0天，C組血清中IgM含量均高于其他兩組，但無顯著性差異（P＞0.05），在試驗(yàn)的21天和42天，B、C兩個(gè)試驗(yàn)組血清中的IgM含量均高于A組，但差異性不顯著（P＞0.05）。

三、討論

血液中的免疫球蛋白是機(jī)體在抗原物質(zhì)的刺激下由B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞產(chǎn)生的，主要包括IgA、IgG、IgM等，其中血清IgG約占機(jī)體血清免疫球蛋白總量的70%～80%，它是介導(dǎo)體液免疫的主要抗體，有抗菌、抗病毒、抗毒素的活性，是抗感染免疫的主力軍；血清型IgA可介導(dǎo)調(diào)理吞噬細(xì)胞的ADCC作用，而分泌型的IgA在局部的黏膜免疫中起著重要作用；IgM是機(jī)體接觸抗原后機(jī)體最早產(chǎn)生的抗體，可以在抗感染免疫的早期發(fā)揮作用，但是持續(xù)時(shí)間較短。

2013年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第2045號公告公布了可以直接飼喂的微生態(tài)制劑名單，根據(jù)成分可分為益生菌、益生元、合成元三大類，主要包括乳酸桿菌類、雙歧桿菌類、芽孢桿菌類、酵母類、寡糖類等。乳酸桿菌的特點(diǎn)是對腸黏膜的粘附性強(qiáng)，易形成腸道保護(hù)性屏障，促進(jìn)腸道有益菌生長，抑制和排斥有害菌的生長和定植；酵母菌的特點(diǎn)是耐酸能力強(qiáng)，可促進(jìn)乳酸桿菌的繁殖，增加血清中特異性免疫球蛋白的含量，從而增強(qiáng)特異性免疫應(yīng)答能力。復(fù)合微生物制劑是由多種益生菌通過發(fā)酵工藝制備而成，在常用的微生物制劑菌株中，乳酸桿菌類和芽孢桿菌類在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用較多。復(fù)合微生物制劑應(yīng)用后，能夠在各種宿主中迅速適應(yīng)、快速繁殖而形成優(yōu)勢，從而起到提高畜禽飼料轉(zhuǎn)化率、生產(chǎn)性能，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，減少抗生素使用，降低養(yǎng)殖污染等功能。針對產(chǎn)蛋雞，復(fù)合微生物制劑對蛋的品質(zhì)能產(chǎn)生積極的影響，能通過促進(jìn)鈣、磷吸收，有利于蛋殼的形成并提高蛋殼強(qiáng)度。根據(jù)胡仲良的報(bào)道，在蛋雞日糧中添加比例為500克/噸的復(fù)合微生物制劑（嗜酸乳桿菌、酵母菌、植物多糖、低聚殼聚糖）可提高蛋雞的產(chǎn)蛋率1%～2%，降低不合格蛋率5%，若繼續(xù)提高微生物制劑的添加量，不再顯著改善蛋雞的生產(chǎn)性能。

本次研究顯示，在海蘭褐蛋雞基礎(chǔ)日糧中添加比例為1%或2%的復(fù)合微生物制劑，42天后血清中IgA的含量比對照組分別提高52.29%、52.33%（P＜0.05），血清中IgG含量分別較對照組提高50.57%、48.77%（P＜0.05），證明復(fù)合微生物制劑可以提高血清中IgA和IgG含量，從而影響機(jī)體的免疫機(jī)能。據(jù)李錦、胡會玲報(bào)道，乳酸菌發(fā)酵飼料和發(fā)酵型黃芩莖葉飼料，均可以顯著提高雛雞體內(nèi)IgA、IgM、IgG的含量；曾佳佳用中草藥—益生菌—膽汁酸復(fù)合制劑做研究，以及李偉用微生物復(fù)合制劑做研究，均得出微生物制劑能使血清中IgA和IgG含量顯著升高的結(jié)論；楊玉榮報(bào)道，雛雞服用自制復(fù)合微生物制劑（嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、纖維二糖乳桿菌、蠟樣芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌）后，在4～7天，IgA、IgM、IgG高于未服用的對照組。然而，陳丹蝶研究酶菌復(fù)合制劑對肉雞免疫功能的影響，顯示酶菌復(fù)合制劑對肉雞血清IgA、IgG、IgM含量的影響無顯著差異（P＞0.05），與本次研究結(jié)果不一致，這可能是因?yàn)槲⑸镏苿┐龠M(jìn)了機(jī)體免疫球蛋白的產(chǎn)生，而酶制劑通過消除飼料抗原物質(zhì)，減少了機(jī)體免疫球蛋白的產(chǎn)生。

胡興義等研究發(fā)現(xiàn)，在仔豬飼糧中添加枯草芽孢桿菌、干酪乳酸菌、釀酒酵母菌組成的復(fù)合微生物制劑可顯著增加仔豬空腸黏膜分泌型IgA含量；李云峰等發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌可顯著提高仔豬腸道黏膜分泌型IgA含量。石寶明報(bào)道，添加復(fù)合微生物制劑（釀酒酵母菌、枯草芽孢桿菌）后，仔豬腸黏膜中分泌型IgA和IgG顯著高于抗生素組，表明復(fù)合微生物制劑可提高仔豬免疫能力。這些研究與復(fù)合微生物制劑在各種品種的蛋雞、肉雞上的研究結(jié)果基本一致。

四、結(jié)論

綜上所述，在基礎(chǔ)日糧中適當(dāng)添加復(fù)合微生物制劑，可以顯著提高血清中IgA、IgG的含量，但添加比例為1%與2%兩個(gè)試驗(yàn)組之間的差異不顯著（P＞0.05），故添加比例以1%較經(jīng)濟(jì)適用。