楊勝男 梁建波 馬清霞

（山東省青島市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 266000）

布魯氏菌病（以下簡(jiǎn)稱布?。┦怯刹剪斒暇鸬囊环N人獸共患傳染病，可導(dǎo)致嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題和巨大的經(jīng)濟(jì)損失。奶業(yè)是青島市傳統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)畜牧產(chǎn)業(yè)，《青島市中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2013-2020 年）》 將布病列為本地區(qū)防控重點(diǎn)[1]，要求采取穩(wěn)步推進(jìn)、持續(xù)監(jiān)測(cè)、嚴(yán)格撲殺、無(wú)害化處理、控制流通、強(qiáng)化監(jiān)督等綜合防控措施[2]，最終達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)國(guó)家布病防治計(jì)劃（2016-2020 年），山東省屬于一類地區(qū)，需采取以免疫接種為主的防控策略。按照山東省布病防控推進(jìn)工作方案的相關(guān)要求，到2025 年，青島市力爭(zhēng)達(dá)到牛羊布病的凈化標(biāo)準(zhǔn)。近幾年，青島市持續(xù)開展牛羊布病監(jiān)測(cè)凈化工作。本調(diào)查為青島市牛羊布病凈化工作提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，從而為全市布病防控決策制定提供支持。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查對(duì)象

按照《2017 年青島市動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)方案》 中《人畜共患病的監(jiān)測(cè)方案》 要求，全市種畜場(chǎng)、奶牛場(chǎng)、奶山羊場(chǎng)、肉牛場(chǎng)和商品羊場(chǎng)必檢，不采集懷孕母畜或母畜產(chǎn)后不足半個(gè)月或8月齡以下的犢牛樣品，本實(shí)驗(yàn)基于非免疫畜群采樣，具體時(shí)間為2017 年5 月和10 月。

1.2 抽樣策略

采用發(fā)現(xiàn)疫病的抽樣策略進(jìn)行個(gè)體抽樣，參數(shù)設(shè)定為95%的置信水平（CL）、5%的預(yù)期流行率（P）、垂直試驗(yàn)敏感性（虎紅平板凝集試驗(yàn)初篩、試管凝集試驗(yàn)復(fù)核）89%[3]。

1.3 診斷試劑

布病虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBT）和布病試管凝集試驗(yàn)（SAT）抗原以及標(biāo)準(zhǔn)陰性血清、標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清，均購(gòu)自美國(guó)愛德士生物科技有限公司。

1.4 檢測(cè)方法

按照《動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)》（GB/T18646—2018）[4]中的虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)方法進(jìn)行操作與判定。對(duì)血清樣本，先用虎紅平板凝集試驗(yàn)進(jìn)行篩選，對(duì)試驗(yàn)陽(yáng)性的樣品再用試管凝集試驗(yàn)進(jìn)行復(fù)核，虎紅平板凝集試驗(yàn)敏感性為95%，特異性為80%；試管凝集試驗(yàn)敏感性為85%，特異性為90%；垂直試驗(yàn)敏感性為89%，特異性為98%[5]。

1.5 陽(yáng)性場(chǎng)戶問(wèn)卷調(diào)查

對(duì)經(jīng)虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)檢測(cè)均為陽(yáng)性的場(chǎng)戶進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查。調(diào)查內(nèi)容包括牛羊養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）對(duì)布病的認(rèn)知程度、養(yǎng)殖場(chǎng)生物安全措施落實(shí)情況、獸醫(yī)和衛(wèi)生部門宣傳情況、移動(dòng)控制情況等。

2 結(jié)果

2.1 不同畜種檢測(cè)

全市肉牛場(chǎng)和商品羊的布病檢測(cè)個(gè)體檢測(cè)率分別為50%和34%；全市種畜場(chǎng)、奶牛場(chǎng)、奶山羊場(chǎng)的布病檢測(cè)個(gè)體檢測(cè)率分別為33%、86%、67%，A 市奶牛場(chǎng)場(chǎng)群檢測(cè)率最高達(dá)到95%，詳見表1；C 市奶山羊場(chǎng)群檢測(cè)率達(dá)到99%，基本達(dá)到全覆蓋，詳見表2；商品羊場(chǎng)雖然場(chǎng)群檢測(cè)率達(dá)到100%，但場(chǎng)群內(nèi)的個(gè)體檢測(cè)率整體不高，詳見表3；全市肉牛場(chǎng)主要集中在C 市，其場(chǎng)群檢測(cè)率達(dá)到50%，詳見表4；種畜場(chǎng)主要集中在E 市，場(chǎng)群檢測(cè)率達(dá)到33%，詳見表5；本次檢測(cè)覆蓋全市所有種畜禽場(chǎng)、奶牛場(chǎng)、奶山羊場(chǎng)、肉牛場(chǎng)和商品羊場(chǎng)，檢出的陽(yáng)性樣品多來(lái)自奶牛和商品羊。

表3 青島市不同地區(qū)商品羊場(chǎng)布病檢測(cè)結(jié)果

表4 青島市肉牛場(chǎng)布病檢測(cè)結(jié)果

表5 青島市種畜場(chǎng)布病檢測(cè)結(jié)果

2.1.1 奶牛場(chǎng)

對(duì)全市奶牛場(chǎng)場(chǎng)群進(jìn)行了抽樣檢測(cè)，檢測(cè)率達(dá)86%，其中A 市奶牛場(chǎng)檢測(cè)率高達(dá)95%，G 區(qū)的檢測(cè)率較低，僅為10%，不同地區(qū)檢測(cè)率差異較大，主要原因是懷孕母畜或母畜產(chǎn)后不足半個(gè)月或8 月齡以下的犢牛和部分地區(qū)免疫場(chǎng)不能檢測(cè)；全市奶牛場(chǎng)布病檢測(cè)場(chǎng)群陽(yáng)性率為0.62%。按公式（1）計(jì)算場(chǎng)內(nèi)的個(gè)體抽樣數(shù)量[6]，場(chǎng)群內(nèi)最低檢測(cè)數(shù)量為47 份，表1 檢測(cè)數(shù)量符合要求。

2.1.2 奶山羊場(chǎng)

對(duì)全市奶山羊場(chǎng)場(chǎng)群進(jìn)行抽樣檢測(cè)，檢測(cè)率達(dá)到67%，其中C 市檢測(cè)率最高達(dá)99%，基本達(dá)到全覆蓋，除A 市、D 市沒有奶山羊場(chǎng)以外，其他區(qū)市檢測(cè)率各有不同，在43%～66%之間。按公式（1）計(jì)算場(chǎng)內(nèi)的個(gè)體抽樣數(shù)量，場(chǎng)群內(nèi)最低檢測(cè)數(shù)量為11 份，表2 檢測(cè)數(shù)量符合要求。

2.1.3 商品羊場(chǎng)

對(duì)全市商品羊場(chǎng)進(jìn)行抽樣檢測(cè)，檢測(cè)率為27.3%；商品羊檢出陽(yáng)性127 只，C 市；全市商品羊場(chǎng)群陽(yáng)性率為0.42%，其中G 區(qū)商品羊場(chǎng)群陽(yáng)性率為100%，C 市商品羊個(gè)體陽(yáng)性率0.7%。按公式（1）計(jì)算場(chǎng)內(nèi)的個(gè)體抽樣數(shù)量，場(chǎng)群內(nèi)最低檢測(cè)數(shù)量為63 份，表3 檢測(cè)數(shù)量符合要求。

2.1.4 肉牛場(chǎng)和種畜場(chǎng)

全市肉牛場(chǎng)主要集中在C 市，檢測(cè)率為50%，種畜場(chǎng)（牛）主要集中在E 市，檢測(cè)率為33%。肉牛場(chǎng)和種畜場(chǎng)均未檢出陽(yáng)性家畜。按公式（1）計(jì)算場(chǎng)內(nèi)的個(gè)體抽樣數(shù)量，場(chǎng)群內(nèi)最低檢測(cè)數(shù)量為63 份，表4、5 檢測(cè)數(shù)量符合要求。

2.2 調(diào)查結(jié)果

根據(jù)抽樣策略，共采集5578 個(gè)場(chǎng)（戶）的92610 份血清樣品進(jìn)行檢測(cè)，檢出陽(yáng)性場(chǎng)群22 個(gè)、陽(yáng)性樣品176 份。全市牛羊布病陽(yáng)性場(chǎng)群主要分布在C 市、G 區(qū)，其中C 市陽(yáng)性場(chǎng)群分布相對(duì)密集。

布病陽(yáng)性場(chǎng)調(diào)查結(jié)果顯示，全市22 個(gè)陽(yáng)性場(chǎng)群中73%是存欄量100 只的散養(yǎng)戶；5 個(gè)陽(yáng)性場(chǎng)群為存欄200 只以下的小規(guī)模場(chǎng)，詳見表6；經(jīng)過(guò)區(qū)市動(dòng)物疫控中心的現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查結(jié)果匯總分析，感染布病羊只全為外地調(diào)入，所有羊布病陽(yáng)性場(chǎng)群均有從外地購(gòu)入羔羊的情況，且調(diào)入后也沒有進(jìn)行落地報(bào)檢和隔離觀察，對(duì)購(gòu)入羊只的背景不夠了解，買到感染的羊不了解情況，直接混群飼養(yǎng)，買有采取相應(yīng)的生物安全措施，感染同群其他羊只；以上牛羊養(yǎng)殖場(chǎng)戶68%的養(yǎng)殖戶未曾聽說(shuō)過(guò)或不了解布??；養(yǎng)殖場(chǎng)戶對(duì)布病防控相關(guān)知識(shí)的知曉率普遍不高。

表6 陽(yáng)性養(yǎng)殖場(chǎng)存欄量

3 分析與討論

本調(diào)查采用流行病學(xué)方法，完成了青島市牛羊布病監(jiān)測(cè)凈化工作的本地調(diào)查。采用發(fā)現(xiàn)疫病的抽樣策略，結(jié)果顯示，牛場(chǎng)場(chǎng)群陽(yáng)性率為0.05%，個(gè)體陽(yáng)性率為0.006%，羊場(chǎng)場(chǎng)群陽(yáng)性率為0.34%，個(gè)體陽(yáng)性率為0.17%，此次檢測(cè)的陽(yáng)性家畜主要集中在C 市、G 區(qū)，以商品羊?yàn)橹?，C 市商品羊存欄量占全青島市的近一半，同時(shí)本地有較大的羊群交易市場(chǎng)，羊群交易比較頻繁，羊群流動(dòng)性大，這也是陽(yáng)性數(shù)量較高的主要原因；G 區(qū)由于近幾年一直開展退養(yǎng)劃區(qū)，本地基本沒有自繁自養(yǎng)的養(yǎng)羊場(chǎng)，全部都是交易市場(chǎng)收購(gòu)進(jìn)行短期育肥的商品羊，陽(yáng)性數(shù)較高，因此，應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)羊的監(jiān)測(cè)及調(diào)運(yùn)監(jiān)管。

全市種畜場(chǎng)、奶牛場(chǎng)、奶山羊場(chǎng)、肉牛場(chǎng)和商品羊場(chǎng)的布病場(chǎng)群檢測(cè)率均為100%，但個(gè)體檢測(cè)率數(shù)值差異較大，主要原因是對(duì)懷孕母畜或母畜產(chǎn)后不足半個(gè)月或8 月齡以下的犢牛及部分地區(qū)存在免疫畜只不能檢測(cè)。對(duì)非免疫群的檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，直接淘汰陽(yáng)性病畜，為后續(xù)凈化工作打好基礎(chǔ)；接下來(lái)重點(diǎn)做好青島市種用、乳用等大型規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的布病凈化工作，選取生物安全級(jí)別高，布局合理且防控措施到位的養(yǎng)殖場(chǎng)或布病檢出率較低的區(qū)市定期開展檢測(cè)并淘汰陽(yáng)性病畜，積極創(chuàng)建“布病凈化創(chuàng)建場(chǎng)”“布病凈化示范場(chǎng)”和“布病凈化示范區(qū)市”工作，從源頭上對(duì)布病逐步進(jìn)行凈化。

全市22 個(gè)陽(yáng)性場(chǎng)群中73%是存欄量不足100 只的散養(yǎng)戶；5 個(gè)陽(yáng)性場(chǎng)群為存欄200 只以下的小規(guī)模場(chǎng)。本調(diào)查表明，散養(yǎng)戶和小規(guī)模場(chǎng)是布病較易發(fā)生的主體場(chǎng)戶，大部分布病陽(yáng)性場(chǎng)有過(guò)從外地引進(jìn)動(dòng)物的經(jīng)歷，調(diào)運(yùn)可能是造成布病傳播的重要因素，因此，加強(qiáng)流通環(huán)節(jié)監(jiān)管，嚴(yán)格按照相關(guān)法律法規(guī)的要求落實(shí)出欄報(bào)檢，引進(jìn)動(dòng)物等制度。

4 結(jié)論

本研究初步掌握了青島市牛羊群布病的流行率和陽(yáng)性區(qū)市的分布情況，牛羊布魯氏菌病畜間流行率均較低，側(cè)面說(shuō)明青島市自2014 年起開展動(dòng)物布病流行病學(xué)調(diào)查和凈化以來(lái)，取得了一定的成效，但針對(duì)布病凈化過(guò)程中存在的調(diào)運(yùn)問(wèn)題，建議在本區(qū)域內(nèi)減少移動(dòng)，或者區(qū)域內(nèi)移動(dòng)時(shí)必須憑布病檢測(cè)陰性報(bào)告。對(duì)外地購(gòu)入的牛羊除了索要布病檢測(cè)報(bào)告外，到達(dá)養(yǎng)殖場(chǎng)后要立即隔離，并采血檢測(cè)布病，陰性后再混群飼養(yǎng)。