方丹，徐雙嬌，田新權(quán)，雷博，馬磊，彭軍

(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部棉花產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險評估實驗室/棉花生物學(xué)國家重點實驗室/中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所，河南 安陽 455000)

能力驗證(Proficiency Testing)是指利用實驗室間比對來判定實驗室檢測能力的一項活動，是實驗室內(nèi)部質(zhì)量控制、檢測能力提升和確認新的檢測項目行之有效的手段之一[1]。根據(jù)《農(nóng)業(yè)部產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試機構(gòu)管理辦法》和《農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測機構(gòu)考核方法》等規(guī)定，每年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部對具備能力驗證相關(guān)項目(參數(shù))檢測資質(zhì)的農(nóng)業(yè)農(nóng)村部產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試機構(gòu)(以下簡稱“部級質(zhì)檢機構(gòu)”)和承擔(dān)2020年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險監(jiān)測任務(wù)的檢測機構(gòu)開展農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測能力驗證。

通過能力驗證活動，農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測機構(gòu)能夠及時發(fā)現(xiàn)實驗室存在的系統(tǒng)誤差，實時監(jiān)控實驗室運行狀態(tài)，有效保障檢測工作的科學(xué)性、公正性和合理性，同時推動了農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測機構(gòu)的質(zhì)量管理和技術(shù)水平的不斷提升，規(guī)范檢測業(yè)務(wù)工作流程，確保為正確評價農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全水平提供客觀、公正、科學(xué)、有效的檢測數(shù)據(jù)?，F(xiàn)以2020年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部組織開展的農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留檢測能力驗證活動為例，將測定方法和結(jié)果分析描述如下。

1 材料與方法

1.1 考核樣品 本次能力驗證考核共發(fā)放A、B兩組樣品，每組樣品均包括1份考核樣和1份空白樣，每份樣品的質(zhì)量約為150g。A組樣品的基質(zhì)為結(jié)球甘藍，B組樣品的基質(zhì)為桃，樣品寄出時為冷凍勻漿狀態(tài)。

1.2 檢測方法 采用《食品安全國家標準 植物源性食品中208種農(nóng)藥及代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》(GB23200.113-2018)[2]中的方法進行檢測。

1.3 檢測儀器 安捷倫8890A-7000D氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀，渦旋振蕩器、氮吹儀(可控溫)、分析天平(感量0.01g)、離心機。

1.4 試劑 乙腈、丙酮、乙酸乙酯均為色譜純試劑、陶瓷均質(zhì)子(P/N： 5982-9313)、0.22μm微孔濾膜(有機相)、QuEChERS前處理提取包(P/N： 5982-5650 CH)和凈化包(P/N： 5982-5056)。

1.5 色譜條件 色譜柱VF-1701ms(14%腈丙基苯基-86%二甲基聚硅氧烷石英毛細管柱，30m×0.25mm×0.25μm)；色譜柱溫度：70℃保持1min，然后以40℃/min程序升溫至150℃，再以15℃/min升溫至240℃，再以8℃/min升溫至290℃，保持9.5min；純度≥99.999%氦氣為載氣，流速1.0mL/min；進樣口溫度：280℃；1μL進樣量；不分流進樣方式；離子源溫度280℃；傳輸線溫度280℃；多重反應(yīng)監(jiān)測MRM掃描方式(每種農(nóng)藥分別選擇一對定量離子、一對定性離子)[2]。

1.6 檢測項目 敵敵畏、甲胺磷、異丙威、乙酰甲胺磷、滅線磷、治螟磷、甲拌磷、六六六、五氯硝基苯、二嗪磷、氧樂果、嘧霉胺、樂果、百菌清、莠滅凈、乙烯菌核利、甲霜靈、毒死蜱、甲基對硫磷、異丙甲草胺、馬拉硫磷、倍硫磷、三氯殺螨醇、殺螟硫磷、三唑酮、二甲戊靈、甲基異硫磷、對硫磷、水胺硫磷、甲拌磷、甲拌磷亞砜、滴滴涕、腐霉利、丙溴磷、殺撲磷、多效唑、蟲螨腈、聯(lián)苯菊酯、三唑磷、甲氰菊酯、異菌脲、亞胺硫磷、氯氟氰菊酯、伏殺硫磷、氯菊酯、氯苯醚啶醇、噠螨靈、醚菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、蠅毒磷、氟氰戊菊酯、氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、苯醚甲環(huán)唑、溴氰菊酯共56種農(nóng)藥。

2 檢測過程及結(jié)果

2.1 農(nóng)藥殘留初步定性定量實驗 10g A-CK、B-CK、A和B樣品中分別加入10mL乙腈，充分渦旋混勻，加入QuEChERS提取試劑包和一個均質(zhì)子，立即手搖震蕩1min，5 000rpm離心5min，取6mL上層清液加入凈化包，渦旋1min，5 000rmp離心5min，取上清液1mL，40℃氮吹至近干，加入1mL乙酸乙酯復(fù)溶，經(jīng)0.22μm濾膜過濾后裝入進樣瓶，上機測定。

2.2 加標回收實驗 分別稱取3個10g相同蔬菜空白樣品A、B，各平行稱取3份，加入2.1篩選出的農(nóng)藥單標，使農(nóng)藥含量盡量與初篩定量含量接近。分別按2.1進行前處理及上機檢測。計算3個空白樣品加標回收率，如果數(shù)值在70%～120%之間，可上報結(jié)果。

2.3 檢測結(jié)果 (表1～2)可以看出，A組結(jié)球甘藍質(zhì)量控制樣品的回收率為80.9%～103.8%，B組桃質(zhì)量控制樣品的回收率為81.1%～102.1%，結(jié)果表明，樣品的檢測結(jié)果是可信任的，并一次性順利通過此次能力驗證。

表1 A組中農(nóng)藥殘留檢測數(shù)據(jù)

表2 B組中農(nóng)藥殘留檢測數(shù)據(jù)

3 農(nóng)藥殘留檢測能力驗證的探討

3.1 儀器設(shè)備 實驗儀器在能力驗證時很重要，及時落實設(shè)備儀器的維護，保證其性能符合檢測要求[3]；維持儀器設(shè)備的清潔性，例如準備一支新的色譜柱，不容易出現(xiàn)污染后的各種不正常數(shù)據(jù)，進樣口要保持干凈，換用新的進樣墊，新的襯管和新的“O”型圈，進樣針需要多次清洗，必要時換新的。

3.2 標準溶液的配制

(1)配制標準溶液時，一定要用未失效且新打開的標準溶液，如果標液稀釋后放的時間較長，可能會降解，濃度不準，甚至出峰的個數(shù)也會不同，準備能力驗證樣品時，現(xiàn)打開標液，稀釋后進樣，確定保留時間與峰面積。

(2)定量過程多采用至少5個點校準，如果使用單點校準，當(dāng)標液濃度與樣品濃度差異較大時，則導(dǎo)致結(jié)果定量偏差。

(3)在農(nóng)殘實驗中，不同基質(zhì)對不同農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)都是不一樣的，所以在最終結(jié)果的校正時一定要配制基質(zhì)曲線，這是影響檢測結(jié)果是否準確的重要因素之一。

3.3 樣品前處理操作 在日常工作中要加強對前處理的練習(xí)，否則容易出現(xiàn)平行樣品不平行、回收率低等問題。如兩個平行樣品的測定結(jié)果相對偏差較大，先排除儀器問題后，問題會出現(xiàn)在前處理環(huán)節(jié)，氮吹時，要使兩個平行樣品氮吹近干的狀況一致，則氣體流速快慢要盡量一致[4]，必要時兩個平行樣品氮吹在同一根氮吹針上完成，氮吹管不能離液面太近，一般為2cm左右，防止污染，氮吹時，需有試驗人員看管，在液體近干時要保留一滴，用洗耳球吹一下，底部潮濕即可，如果完全干燥，則會使回收率偏低[5]。

3.4 加強培訓(xùn)與練習(xí) 為順利通過能力驗證，工作中要加強培訓(xùn)與練習(xí)。及時對能力驗證中出現(xiàn)的問題進行總結(jié)，對關(guān)鍵點進行詳細記錄，進行日常加標回收試驗，對出現(xiàn)的問題及時解決，最好對每種農(nóng)藥都做加標回收試驗，記錄他們的回收率，對回收率低的與高的農(nóng)藥，查找原因，并找到解決辦法。

4 總結(jié)

綜上所述，農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留檢測能力驗證結(jié)果，直接反映了農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測機構(gòu)的檢測能力，如何提高檢測隊伍自身的工作質(zhì)量與工作效率顯得尤為重要。通過日常的檢測工作、借助網(wǎng)絡(luò)平臺等多種方式參加技術(shù)培訓(xùn)活動，不斷提高檢測人員的理論素質(zhì)和專業(yè)技術(shù)水平，深入了解國內(nèi)外農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)的發(fā)展趨勢和前沿現(xiàn)狀。本文以農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品能力驗證為例分享實戰(zhàn)中的技巧，為農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測機構(gòu)提高能力驗證水平提供參考與借鑒。