張遠(yuǎn)，杜文燕，吳建軍，蔡亦紅

1.安徽醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院衛(wèi)生檢驗(yàn)與檢疫學(xué)系,安徽 合肥 230032；2.安徽醫(yī)科大學(xué)病原生物學(xué)安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室； 3.安徽醫(yī)科大學(xué)人畜共患病安徽高校省級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；4.安徽省疾病預(yù)防控制中心

艾滋病(AIDS)又名獲得性免疫缺陷綜合征，是一種由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的一種慢性傳染病。艾滋病嚴(yán)重威脅人類健康，截至2019年全球約有7 000萬(wàn)人感染HIV，近3 000萬(wàn)人因感染死亡，我國(guó)存活HIV/AIDS患者人數(shù)約為125萬(wàn)[1]。

弓形蟲是一種機(jī)會(huì)性致病原蟲，寄生于人和溫血?jiǎng)游锏挠泻思?xì)胞內(nèi)。在免疫功能健全者體內(nèi)弓形蟲感染一般不引起明顯癥狀或僅引起輕度自限性疾病，但在器官移植、免疫缺陷患者體內(nèi)嚴(yán)重時(shí)可致死亡。HIV感染者不僅易感染弓形蟲，其體內(nèi)潛在感染的弓形蟲蟲體也會(huì)被激活。HIV感染者中弓形蟲腦病較常見(jiàn)，在HIV感染期間，潛在弓形蟲感染者中有20%～47%發(fā)展為弓形蟲腦病[2]，且疾病進(jìn)展較快，治療效果差，死亡率高。

報(bào)道顯示，HIV/AIDS患者中弓形蟲感染率可高達(dá)35.8%，其中亞洲太平洋地區(qū)感染率為25.1 %[3]。1999—2017年，江蘇、浙江、安徽、福建、江西、廣東等13個(gè)省份零星報(bào)道了HIV/AIDS患者弓形蟲感染情況，各省份感染率為2.09%～32.90%，其中安徽省HIV/AIDS患者弓形蟲感染率為2.09%，處于較低水平[4]。但近年來(lái)安徽省缺乏系統(tǒng)全面的HIV/AIDS患者弓形蟲感染情況調(diào)查。阜陽(yáng)市位于安徽省西北部，是安徽省艾滋病疫情高發(fā)地區(qū)。本研究收集了安徽省阜陽(yáng)市2020年1月至2021年3月新報(bào)告且未經(jīng)治療HIV/AIDS患者的全血和血清樣本，調(diào)查其弓形蟲感染狀況，同時(shí)觀察HIV/AIDS合并弓形蟲感染患者體內(nèi)CD4+T淋巴細(xì)胞水平，從而為HIV/AIDS患者弓形蟲病防控提供參考依據(jù)。

1 內(nèi)容與方法

1.1材料來(lái)源 收集安徽省阜陽(yáng)市2020年1月至2021年3月新報(bào)告且未經(jīng)治療的HIV/AIDS患者的全血和血清樣本，所有樣本均經(jīng)安徽省疾病預(yù)防控制中心免疫印跡試驗(yàn)確證HIV病毒陽(yáng)性。

1.2方法

1.2.1弓形蟲感染情況檢測(cè) 用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)(購(gòu)自北京貝爾生物生物工程股份有限公司)進(jìn)行血清樣本弓形蟲IgG抗體檢測(cè)。

1.2.2CD4+T淋巴細(xì)胞水平檢測(cè) 分離外周靜脈血中外周血單核細(xì)胞(Peripheral blood mononudear cell,PBMC)，調(diào)整細(xì)胞數(shù)至1×106個(gè)/mL，取100 μL細(xì)胞懸液至流式檢測(cè)管中，加入CD4-PE抗體20 μL，混勻，并設(shè)陰性對(duì)照組。室溫避光孵育20 min，加入2 mL PBS洗液重懸細(xì)胞，離心半徑8.5 cm，1 000 r/min離心5 min，棄上清，加入0.5 mL PBS洗液重懸細(xì)胞，流式上機(jī)檢測(cè)。

1.2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，服從正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示；不服從正態(tài)分布的計(jì)量資料采用中位數(shù)(四分位間距)表示，組間比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.3倫理學(xué)聲明 本研究經(jīng)過(guò)安徽醫(yī)科大學(xué)生物倫理審查委員會(huì)批準(zhǔn)(許可證號(hào)：2019006)，所有患者均已簽署知情同意書,符合醫(yī)學(xué)倫理規(guī)定。

2 結(jié) 果

2.1HIV/AIDS患者基本情況 2020年1月至2021年3月，安徽省阜陽(yáng)市新報(bào)告且未經(jīng)治療的HIV/AIDS患者共449例。其中，男性348例，女性75例，26例性別不詳；年齡以20～60歲為主，年齡為21～40歲和41～60歲的人群分別占31.6%(142/449)和31.8%(143/449)；婚姻狀況以已婚為主，占41.0%(184/449)；文化程度以初中及以下為主，見(jiàn)表1。對(duì)感染途徑進(jìn)行分析，449例患者中異性性傳播254例，占56.6%；同性性傳播167例，占37.2%；血液傳播和母嬰傳播各1例，均占0.2%；其他傳播途徑26例，占5.8%。

表1 阜陽(yáng)市HIV/AIDs患者基本情況

2.2弓形蟲IgG抗體檢測(cè)結(jié)果 共檢測(cè)449例HIV/AIDS患者血清，弓形蟲IgG抗體陰性444例，陽(yáng)性5例，陽(yáng)性率為1.11%。

2.3CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果 449例HIV/AIDS患者中413例接受了CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)，最低為1個(gè)/μL，最高為1 616個(gè)/μL，中位數(shù)(四分位間距)為286(169，439)個(gè)/μL。444例弓形蟲IgG抗體陰性的HIV/AIDS患者有409例接受了CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)，CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)最低為1個(gè)/μL，最高為1 616個(gè)/μL，中位數(shù)(四分位間距)為287(170，439)個(gè)/μL；5例弓形蟲IgG抗體陽(yáng)性的HIV/AIDS患者有4例接受了CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)，CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)最低為43個(gè)/μL，最高為325個(gè)/μL，中位數(shù)(四分位間距)為139(86，237)個(gè)/μL。弓形蟲IgG抗體陰性和陽(yáng)性的HIV/AIDS患者CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-1.749，P>0.05 )。在4例進(jìn)行CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)的弓形蟲IgG抗體陽(yáng)性者中，CD4+T淋巴細(xì)胞<200個(gè)/μL的有3例，占75%。

3 討 論

弓形蟲感染在全球廣泛存在，孕婦感染弓形蟲可導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局的發(fā)生，且有40%左右可經(jīng)胎盤垂直傳播[5]，弓形蟲感染與育齡期婦女不孕不育也有一定關(guān)系，不孕不育的育齡期婦女弓形蟲抗體IgM檢出率高于正常妊娠者[6]。弓形蟲感染對(duì)患者中樞神經(jīng)系統(tǒng)有著多方面的影響，對(duì)患者精神癥狀、行為認(rèn)知等也會(huì)產(chǎn)生影響[7]。艾滋病患者感染弓形蟲后約有25%～37%可發(fā)展為弓形蟲腦炎[8]，其臨床癥狀復(fù)雜、確診困難、致死率高，是艾滋病患者常見(jiàn)的致死病因之一[9]。

截至2019年10月底，全國(guó)報(bào)告存活HIV/AIDS人數(shù)約為95.8萬(wàn),2019年1—10月新報(bào)告?zhèn)魅菊咧?異性性傳播占73.7%，男男同性性傳播占23.0%，性傳播是主要的傳播方式[10]。本研究中449例艾滋病患者中傳播途徑為異性性傳播占56.6%，同性性傳播占37.2%，性傳播同樣是主要的傳播方式。同時(shí),本研究結(jié)果表明艾滋病患者以男性為主，年齡以20～60歲為主，婚姻狀況以已婚為主,不同文化程度均有。總體來(lái)說(shuō)，阜陽(yáng)市艾滋病疫情分布不平衡,波及范圍廣泛,影響因素復(fù)雜多樣,防治形勢(shì)仍然嚴(yán)峻,防治任務(wù)更加艱巨,仍需加強(qiáng)艾滋病防治。

本研究發(fā)現(xiàn)，阜陽(yáng)市HIV/AIDS患者弓形蟲感染率為1.11%，低于安徽省HIV/AIDS患者弓形蟲感染率(2.09%)[3]，遠(yuǎn)低于蕪湖市調(diào)查結(jié)果[11]。究其原因，可能與阜陽(yáng)地區(qū)居民飲食習(xí)慣(如不喜食生肉等)有關(guān)，也可能與一部分感染弓形蟲的HIV/AIDS患者因?yàn)椴∏檩^嚴(yán)重已經(jīng)死亡有關(guān)。弓形蟲感染與機(jī)體免疫水平有關(guān)，有報(bào)道顯示，CD4+T淋巴細(xì)胞低于200個(gè)/μL的人群，其弓形蟲發(fā)病率較高[12-13]。本研究中弓形蟲IgG抗體陽(yáng)性的HIV/AIDS患者CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)為139(86，237)個(gè)/μL,75%的患者CD4+T淋巴細(xì)胞低于200個(gè)/μL，但與弓形蟲IgG抗體陰性的HIV/AIDS患者相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這可能是由于此次收集的樣本來(lái)自早期HIV/AIDS患者，CD4+T淋巴細(xì)胞水平較高,也可能是由于弓形蟲IgG抗體陽(yáng)性的HIV/AIDS患者樣本量太小。因此，有關(guān)CD4+T淋巴細(xì)胞水平在HIV/AIDS患者合并弓形蟲感染中的意義仍需進(jìn)一步研究。