劉公言 姜文學(xué) 楊麗萍 劉 策 高淑霞 孫海濤 常 瑩 白莉雅*

(1.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，山東省畜禽疫病防治與繁育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，濟(jì)南 250100；2.山東省畜牧協(xié)會(huì)，濟(jì)南 250100)

安哥拉兔是重要的毛兔品種，是產(chǎn)毛量最高的動(dòng)物之一，在飼喂全價(jià)配合顆粒飼料時(shí)，年產(chǎn)毛量可達(dá)1.0～1.4 kg。我國(guó)是安哥拉兔毛的最大出口國(guó)，占全球總產(chǎn)量的92%[1]。安哥拉兔的產(chǎn)毛性能受遺傳、營(yíng)養(yǎng)和其他因素影響[2-4]?？股亟棺鳛榇偕L(zhǎng)飼料添加劑使用后，在動(dòng)物飼糧中添加天然綠色飼料添加劑來(lái)改善動(dòng)物的生長(zhǎng)性能、健康狀況和產(chǎn)品品質(zhì)引起了人們的廣泛關(guān)注[5-6]。生姜(Zingiberofficinale)是姜科的多年生草本植物，富含有益的生物活性化合物、植物精油和微量礦物質(zhì)，具有保肝、抗氧化、抗菌、鎮(zhèn)痛和抗炎等多種醫(yī)藥功能，長(zhǎng)期以來(lái)被用在人類(lèi)食品中增加香味等[7-9]。Zhang等[10]研究報(bào)道，飼糧中添加0.5 g/kg生姜粉可增加青山羊瘤胃丙酸產(chǎn)量，增加1.0 g/kg生姜粉可促進(jìn)微生物蛋白合成。妊娠和泌乳期連續(xù)使用生姜粉，能夠更大程度地改善母豬體況、產(chǎn)奶量和繁殖性能，并進(jìn)而提高仔豬增重和斷奶體重[11]。Ibtisham等[12]研究報(bào)道，飼糧中添加姜粉可提高蛋雞的生產(chǎn)性能和抗氧化能力。然而，關(guān)于生姜粉在家兔飼糧中的研究資料較少。因此，本試驗(yàn)以安哥拉兔為研究對(duì)象，研究飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔產(chǎn)毛性能以及血清激素、生化、免疫和抗氧化指標(biāo)的影響，以期為生姜粉作為綠色飼料添加劑在毛兔生產(chǎn)上的應(yīng)用提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選用8月齡左右、體重相近的中系安哥拉兔160只，統(tǒng)一剪毛后，隨機(jī)分為4組，每組40只(公母各占1/2)，每個(gè)重復(fù)1只?；A(chǔ)飼糧配方參考De Blas等[13]，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上分別添加0(對(duì)照組)、10、20、30 g/kg的生姜粉(食品級(jí)，由脫水姜片制成，水洗烘干姜，無(wú)沙子，干物質(zhì)含量>90%，粉碎粒度為100目)，制成全價(jià)顆粒飼料。試驗(yàn)兔在室外兔舍單籠飼養(yǎng)，飼喂上述試驗(yàn)飼糧1個(gè)養(yǎng)毛期(73 d)。試驗(yàn)期間，試驗(yàn)兔每天飼喂2次，全程自由采食和自由飲水。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

1.2 樣品采集與制備

在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，所有試驗(yàn)兔單獨(dú)剃毛，并稱(chēng)其產(chǎn)毛量。每組選擇與該組平均體重相近的8只試驗(yàn)兔(4只公兔和4只母兔)從耳靜脈采集血液，分離血清樣品，在-20 ℃保存，用于血清生化、免疫、激素和抗氧化指標(biāo)的測(cè)定；同時(shí)，采集背部正中皮膚樣本(0.5 cm×0.5 cm)，用4%多聚甲醛固定，制作石蠟切片，蘇木精-伊紅(hematoxylin and eosin，HE)染色后進(jìn)行毛囊密度分析。

1.3 測(cè)定指標(biāo)和方法

1.3.1 產(chǎn)毛性能指標(biāo)的測(cè)定

在試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)對(duì)試驗(yàn)兔逐一稱(chēng)體重，統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)期間每只的總采食量，并計(jì)算料毛比(feed/wool ratio，F(xiàn)/W)。用直尺分別測(cè)定試驗(yàn)兔背部、臀部、頸部和身體兩側(cè)處等不同部位的絨毛毛長(zhǎng)，取平均值作為最終絨毛長(zhǎng)度。在每只試驗(yàn)兔不同部位取100根絨毛，用纖維細(xì)度儀(YG002C，常州雙谷敦達(dá)機(jī)電技術(shù)有限公司)和纖維投影儀(CYG-055DI，上海光學(xué)儀器研究所)測(cè)定絨毛細(xì)度，取平均值作為最終絨毛細(xì)度。毛囊密度測(cè)定及統(tǒng)計(jì)方法參考劉公言[14]報(bào)道的方法。4%多聚甲醛固定的皮膚樣本依次進(jìn)行酒精脫水、石蠟包埋、皮膚橫切、HE染色后，使用顯微鏡(ECLIPSE 80i，Nikon，日本)普通光下拍照，利用Image-Pro Plus 6.0分析軟件統(tǒng)計(jì)皮膚毛囊(包括初級(jí)毛囊和次級(jí)毛囊)密度。

1.3.2 血清激素指標(biāo)的測(cè)定

采用天津九鼎公司生產(chǎn)的放射性免疫分析試劑盒檢測(cè)血清甲狀腺素(thyroxine，T4)、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)和褪黑素(melatonin,MTL)水平，在DFM-96-10試管中利用γ放射免疫計(jì)數(shù)器進(jìn)行測(cè)定。

1.3.3 血清生化指標(biāo)的測(cè)定

采用全自動(dòng)血清生化分析儀(Hitachi 7020，日本)分析血清總膽固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)含量以及堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性。

1.3.4 血清免疫指標(biāo)的測(cè)定

血清免疫球蛋白G(immunoglobulin G，IgG)、免疫球蛋白A(immunoglobulin A，IgA)、免疫球蛋白M(immunoglobulin M，IgM)含量使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)試劑盒(上海朗頓生物科技有限公司生產(chǎn))測(cè)定。

1.3.5 血清抗氧化指標(biāo)的測(cè)定

血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性、總抗氧化能力(total antioxidant capacity，T-AOC)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量采用南京建城生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒，按照說(shuō)明書(shū)在UV-2450紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)上檢測(cè)。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行方差分析和Duncan氏法多重比較，以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P<0.05為差異顯著水平，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔產(chǎn)毛性能的影響

由表2可知，飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔的終末體重、耗料量、毛囊密度和產(chǎn)毛量均有顯著影響(P<0.05)。隨著生姜粉添加水平的升高，試驗(yàn)兔的終末體重、耗料量、毛囊密度和產(chǎn)毛量均有提高，生姜粉添加水平為20 g/kg時(shí)可達(dá)到提高產(chǎn)毛量的效果。飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔的料毛比、絨毛長(zhǎng)度和絨毛細(xì)度均無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表2 飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔產(chǎn)毛性能的影響Table 2 Effects of dietary ginger powder supplemental level on wool production of Angora rabbits

2.2 飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清激素指標(biāo)的影響

由表3可知，飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清中T4、IGF-1和MTL水平有顯著影響(P<0.05)。與對(duì)照組比較，各試驗(yàn)組血清中IGF-1和MTL水平均顯著升高(P<0.05)；當(dāng)生姜粉添加水平為30 g/kg時(shí)，血清中T4水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表3 飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清激素指標(biāo)的影響Table 3 Effects of dietary ginger powder supplemental level on serum hormone indices of Angora rabbits

2.3 飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清中TC、HDL、LDL含量有顯著影響(P<0.05)。與對(duì)照組相比，添加20和30 g/kg生姜粉的試驗(yàn)組血清中TC、HDL、LDL含量顯著降低(P<0.05)。飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清中TG含量以及ALP、ALT、AST活性無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表4 飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清生化指標(biāo)的影響Table 4 Effects of dietary ginger powder supplemental level on serum biochemical indices of Angora rabbits

2.4 飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清免疫指標(biāo)的影響

由表5可知，飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清中IgA含量有顯著影響(P<0.05)。與對(duì)照組相比，添加高水平(20 和30 g/kg)生姜粉的試驗(yàn)組血清中IgA含量顯著升高(P<0.05)。飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清中IgG和IgM含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表5 飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清免疫指標(biāo)的影響Table 5 Effects of dietary ginger powder supplemental level on serum immune indices of Angora rabbits g/L

2.5 飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表6可知，飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清中SOD活性、T-AOC和MDA含量均有顯著影響(P<0.05)。與對(duì)照組相比，各試驗(yàn)組血清SOD活性均顯著升高(P<0.05)，血清中MDA含量均顯著降低(P<0.05)；此外，添加20和30 g/kg生姜粉的試驗(yàn)組血清中T-AOC顯著升高(P<0.05)。

表6 飼糧中生姜粉添加水平對(duì)安哥拉兔血清抗氧化指標(biāo)的影響Table 6 Effects of dietary ginger powder supplemental level on serum antioxidant indices of Angora rabbits

3 討 論

在飼糧中添加適宜的生姜粉可以提高動(dòng)物生產(chǎn)性能。宋振帥[15]研究表明，在飼糧中使用生姜粉可以改善商品豬生長(zhǎng)性能和產(chǎn)肉性能。白建等[16]報(bào)道，在飼糧中添加1.0%生姜粉可提高羅曼蛋雞的生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)。另外，在肉牛飼糧中添加1.0 g/kg 生姜粉，使瘤胃揮發(fā)性脂肪酸產(chǎn)量提高了5.25%，瘤胃微生物蛋白合成量增加了2.58%，乙酸與丙酸比例降低[17]。Ogbuewu等[18]報(bào)道，飼糧中添加15 g/kg生姜粉可以提高生長(zhǎng)肉兔的生長(zhǎng)速度。然而，Mancini等[19]報(bào)道，飼糧中添加生姜粉能夠改善肉兔的肌肉品質(zhì)，但對(duì)生長(zhǎng)性能和屠宰性能無(wú)顯著影響。毛囊是被毛生長(zhǎng)的根基，毛用動(dòng)物產(chǎn)毛量與毛囊發(fā)育密切相關(guān)。本研究中，在安哥拉毛兔飼糧中添加生姜粉，產(chǎn)毛性能得到了很大的提高，這與生姜粉提高了家兔毛囊密度密切相關(guān)。

垂體分泌的T4是調(diào)節(jié)動(dòng)物出生后生長(zhǎng)的主要激素，能夠促進(jìn)離體人皮膚損傷后的再上皮化和血管生成。MLT與動(dòng)物被毛的季節(jié)性生長(zhǎng)密切相關(guān)，植入MLT后，可促進(jìn)毛皮的早期成熟[20-21]。黃冬維等[22]研究報(bào)道，MLT對(duì)長(zhǎng)毛兔夏季產(chǎn)毛具有促進(jìn)作用，40和55 mg MLT均可提高公兔夏季產(chǎn)毛量或抑制母兔產(chǎn)毛量的降低；MLT埋植可增加長(zhǎng)毛兔公、母兔的粗毛長(zhǎng)度，但對(duì)細(xì)毛長(zhǎng)度和兔毛直徑并無(wú)顯著影響。已有研究表明，血液循環(huán)中IGF-1的水平對(duì)營(yíng)養(yǎng)變化很敏感，血漿中IGF-1水平隨著營(yíng)養(yǎng)攝入量的增加而顯著增加，IGF-1參與毛囊的周期性調(diào)控[23-25]。Saeid等[26]研究報(bào)道，給24周齡的公雞連續(xù)20周服用5%～10%的生姜提取物，可改善睪丸重量、睪酮水平和精液品質(zhì)。另外，在母雞飼糧中添加5～10 g/kg的生姜粉，母雞體內(nèi)的黃體生成素(luteinizing hormone,LH)和卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)水平明顯增加[27]。Abd El-Hameed等[28]報(bào)道，生姜提取物能夠提高公兔的精液品質(zhì)，進(jìn)而提高繁殖性能。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加生姜粉后，安哥拉兔血清中T4、IGF-1、MTL水平均有不同程度升高，血清激素水平提高能夠促進(jìn)毛囊發(fā)育，增加毛囊密度，進(jìn)而提高產(chǎn)毛量。

血清生化指標(biāo)能夠反映動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)狀況，TC、TG、HDL和LDL是血液脂質(zhì)的重要組成部分，其含量的高低反映了脂質(zhì)代謝過(guò)程。大量研究表明，飼糧中添加生姜粉后動(dòng)物血清中TC和HDL含量降低[29-31]，這可能表明生姜粉具有降低機(jī)體脂質(zhì)代謝的作用。Ogbuewu[32]研究表明，飼喂添加生姜粉飼糧的家兔腹部脂肪含量較少。本研究結(jié)果也證實(shí)了生姜粉具有降低動(dòng)物血脂的功能，這與前人的研究結(jié)果一致。

T-AOC是反映機(jī)體酶促及非酶促體系總抗氧化水平高低的主要指標(biāo)，它的大小能夠反映機(jī)體自由基代謝的狀態(tài)，SOD活性與機(jī)體清除自由基的能力成正比，而脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)鏈?zhǔn)浇K止階段產(chǎn)生MDA，其含量可以間接反映機(jī)體組織細(xì)胞的脂質(zhì)過(guò)氧化程度和自由基的產(chǎn)生情況，對(duì)綜合評(píng)判機(jī)體抗氧化性能的具有重要意義。Zhang等[33]報(bào)道，用含5 g/kg生姜粉的飼糧飼喂肉雞后血清中SOD和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性增加，MDA含量降低。Ahmed等[34]報(bào)道，生姜能夠通過(guò)維持小鼠體內(nèi)抗氧化酶的活性來(lái)顯著降低脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)。生姜的抗氧化作用歸因于生姜中的生物活性物質(zhì)對(duì)自由基攻擊的保護(hù)作用，其中姜辣素在體內(nèi)和體外均具有很強(qiáng)的抗氧化作用[35-37]。本研究發(fā)現(xiàn)，生姜粉能夠提高安哥拉兔血清中SOD活性和T-AOC，降低血清中MDA含量，與上述研究結(jié)果一致。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)添加生姜粉后，家兔血清IgA含量也顯著升高，其具體作用機(jī)理有待于進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

生姜粉作為安哥拉兔的飼料添加劑，能夠調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，提高血清激素水平和抗氧化能力，提高產(chǎn)毛量，其適宜用量為20 g/kg。