龐婷婷，陳紹鵬，譚鯤

湛江市中心血站質(zhì)管科，廣東湛江 524002

目前臨床使用的血小板多數(shù)來(lái)源于單采血小板，少數(shù)來(lái)源于由全血分離制備的濃縮血小板，新鮮冰凍血漿現(xiàn)主要來(lái)源于全血分離，含有包括Ⅷ凝血因子在內(nèi)的全部凝血因子和血漿蛋白。Ⅷ凝血因子在治療和預(yù)防出凝血疾病及大劑量輸血所導(dǎo)致的凝血功能障礙方面起非常重要的作用[1]；而血漿蛋白包括白蛋白和球蛋白，白蛋白是肝臟產(chǎn)生的小分子量蛋白質(zhì)，對(duì)維持和調(diào)節(jié)身體內(nèi)環(huán)境與營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)具有明顯作用；免疫球蛋白是具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體分子相似的球蛋白，它在人體的體液免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要的作用，具有組織修復(fù)、促進(jìn)創(chuàng)面愈合和抗炎等作用[2]。該研究文通過(guò)觀察2017年1月—2019年12月180例不同頻率同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿對(duì)獻(xiàn)血者血小板和血液制品質(zhì)量的影響，探討是否能同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿，既可為臨床提供止血的血小板也可為臨床提供促進(jìn)血液凝集的凝血因子和維持血液膠體滲透壓、增強(qiáng)免疫力的血漿蛋白（白蛋白和免疫球蛋白），緩解目前血液短缺的狀況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

隨機(jī)選擇曾在該站連續(xù)5次每半個(gè)月、1個(gè)月、3個(gè)月同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿一次的長(zhǎng)期固定獻(xiàn)血者各60名，每組年齡范圍分別為17～55歲、18～55歲；男性患者例數(shù)分別為38、39、40例；組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）?；颊呓苑稀东I(xiàn)血法》中獻(xiàn)血者健康檢查要求和成分血血液檢測(cè)要求。獻(xiàn)血者每次單采1個(gè)治療量血小板同時(shí)采集200 mL新鮮冰凍血漿。

1.2 儀器與試劑

血常規(guī)使用日本sysmex自動(dòng)血液分析儀進(jìn)行檢測(cè)，Ⅷ因子和FIB檢測(cè)使用日本sysmex的CA-560全自動(dòng)血凝儀及其配套的凝血因子Ⅷ測(cè)量試劑盒、纖維蛋白原測(cè)量試劑盒；血漿TP檢測(cè)使用德國(guó)photometer4040半自動(dòng)生化分析儀和北京瑞爾達(dá)生物科技有限公司生產(chǎn)的總蛋白測(cè)定試劑盒進(jìn)行檢測(cè)；單采血小板使用美國(guó)Trima血細(xì)胞分離機(jī)；冷沉淀速凍使用深圳愛(ài)康Oceanus-F13B血漿速凍機(jī)。

1.3 標(biāo)本的采集及檢測(cè)指標(biāo)

每次單采血小板前從獻(xiàn)血者肘靜脈抽取5 mL血液標(biāo)本，采集后立即進(jìn)行檢測(cè)：血小板計(jì)數(shù)（Plt）、平均血小板體積（MPV），每次單采血小板時(shí)采集的新鮮血漿立刻速凍，然后-18℃以下冰凍保存，制備冷沉淀后速凍再冰凍保存，冷沉淀集中進(jìn)行Ⅷ因子和FIB含量檢測(cè)。

1.4 冷沉淀和去冷沉淀血漿的制備方法

將新鮮冰凍血漿置2～6℃冰箱中過(guò)夜融化，當(dāng)血漿基本融化時(shí)，在2～6℃的大容量離心機(jī)下重離心，將大部分上層血漿移至空袋，制成去冷沉淀的冰凍血漿，將留下的40～50 mL血漿與沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子，并立刻速凍。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

該文所有數(shù)據(jù)均使用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行計(jì)算分析。計(jì)量資料以（±s）表示，將不同次數(shù)采集的數(shù)據(jù)采用配對(duì)t檢驗(yàn)，不同頻率采集的數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 連續(xù)5次不同頻率同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿對(duì)獻(xiàn)血者PLT、MPV的影響

連續(xù)半個(gè)月一次同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿的獻(xiàn)血者，從第2次開(kāi)始PLT升高（258.75±11.75）×109/L，MPV下降（10.33±0.43）fl，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而1個(gè)月一次和3個(gè)月一次捐獻(xiàn)的獻(xiàn)血者PLT、MPV差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 連續(xù)5次不同頻率同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿對(duì)獻(xiàn)血者PLT、MPV的影響（±s）

表1 連續(xù)5次不同頻率同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿對(duì)獻(xiàn)血者PLT、MPV的影響（±s）

注：與第1次采集組比較：a P＜0.05

?

2.2 連續(xù)5次不同頻率血小板單采副產(chǎn)品新鮮冰凍血漿制備冷沉淀Ⅷ因子含量、FIB含量分析

連續(xù)半個(gè)月和1個(gè)月一次血小板單采新鮮冰凍血漿制備冷沉淀，Ⅷ因子含量從第2次[分別為（80.11±1.29）IU和（83.22±1.89）IU]開(kāi)始下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；連續(xù)半個(gè)月一次的FIB含量從第3次（178.25±6.65）mg，開(kāi)始下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），第4次開(kāi)始下降較第3次更明顯（170.55±5.55）mg，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而3個(gè)月一次的Ⅷ因子含量、FIB含量則差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表2 連續(xù)5次不同頻率血小板單采副產(chǎn)品新鮮冰凍血漿制備冷沉淀Ⅷ因子含量、FIB含量分析(±s)

表2 連續(xù)5次不同頻率血小板單采副產(chǎn)品新鮮冰凍血漿制備冷沉淀Ⅷ因子含量、FIB含量分析(±s)

注：與第1次采集組比較,b P＜0.05

?

2.3 連續(xù)5次不同頻率血小板單采副產(chǎn)品新鮮冰凍血漿制備去冷沉淀血漿總蛋白含量分析

連續(xù)5次不同頻率血小板單采副產(chǎn)品新鮮冰凍血漿制備去冷沉淀血漿總蛋白含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表3。

表3 連續(xù)5次不同頻率血小板單采副產(chǎn)品新鮮冰凍血漿制備去冷沉淀血漿TP含量分析[(±s),g/L]

表3 連續(xù)5次不同頻率血小板單采副產(chǎn)品新鮮冰凍血漿制備去冷沉淀血漿TP含量分析[(±s),g/L]

?

3 討論

為緩解血液供應(yīng)緊張局面，采供血機(jī)構(gòu)一直“開(kāi)源節(jié)流”，一方面加強(qiáng)宣傳招募，另一方面應(yīng)積極研究血液及其成分的合理制備與應(yīng)用[3]。單采血小板是目前一種有效節(jié)約獻(xiàn)血資源的重要方法，該研究通過(guò)對(duì)比連續(xù)5次不同頻率同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿對(duì)獻(xiàn)血者和血液制品質(zhì)量的影響，探討同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿的可行性。結(jié)果證實(shí)不同頻率同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿對(duì)獻(xiàn)血者PLT、MPV和新鮮冰凍血漿制備冷沉淀的Ⅷ因子、FIB含量影響不同。

連續(xù)每半個(gè)月一次同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿的獻(xiàn)血者，與第1次相比，第2次PLT （258.75±11.75）×109/L升高，MPV（10.33±0.43）fl]下降（P＜0.05）。這些獻(xiàn)血者已有多年的獻(xiàn)血經(jīng)歷，而且是按時(shí)、積極踴躍的參加獻(xiàn)血，其骨髓造血功能比非獻(xiàn)血者活躍[1，4-7]。文獻(xiàn)報(bào)道多次捐獻(xiàn)血小板獻(xiàn)血者外周血小板計(jì)數(shù)為（239.5±53.49）×109/L～（247.31±52.63）×109/L，末次采集后外周血小板計(jì)數(shù)為（236.52±52.71）×109/L～（279.89±70.31）×109/L。血小板的生成受自身反饋機(jī)制調(diào)節(jié)，包括：刺激機(jī)制和抑制機(jī)制。刺激血小板生成的主要有：血小板生成素（TPO）、巨核細(xì)胞集落刺激因子（Meg-CSF）、巨核細(xì)胞增幅因子（Meg-POT）可刺激血小板的生成。白細(xì)胞介素（如IL-3、IL-6、IL-11），紅細(xì)胞生成素（EPO）等分別在多能干細(xì)胞演變成巨核細(xì)胞及血小板生成的各個(gè)階段發(fā)揮不同的作用。抑制血小板生成的抑制因子主要來(lái)自血小板本身，如血小板第4因子、β‐血小板球蛋白及其前體、結(jié)締組織活化肽Ⅲ、β轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子等，它們通過(guò)抑制巨核細(xì)胞或抑制巨核細(xì)胞系的祖細(xì)胞的生長(zhǎng)而抑制血小板生成。連續(xù)多次半個(gè)月捐獻(xiàn)者，血小板連續(xù)多次頻繁地大量丟失刺激巨核細(xì)胞向血小板分化，血小板代償性增多；但是新生的血小板分化尚未成熟，以網(wǎng)織血小板增多為主，與成熟血小板相比體積偏小所以MPV下降，連續(xù)采集模式可使捐獻(xiàn)者外周血循環(huán)年輕，血小板體積因此而縮減[4]。

冷沉淀是新鮮冰凍血漿在2～6℃解凍后，不溶解的白色沉淀物，是Ⅷ因子、纖維蛋白原等的濃縮制品，目前已在深度燒傷、腫瘤手術(shù)、皮膚、黏膜疾病、角膜疾病多發(fā)傷和手術(shù)創(chuàng)傷、自發(fā)性氣胸等疾病治療中得到廣泛應(yīng)用[8-10]。連續(xù)半個(gè)月和1個(gè)月一次同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿制備的冷沉淀，Ⅷ因子含量較第一次采集有所下降[第1次Ⅷ因子含量分別為（86.74±0.56）IU和（86.88±0.23）IU]（P＜0.05）；與第1次相比，連續(xù)半個(gè)月一次的FIB因子含量[第1次FIB因子含量為（183.56±17.22）mg]從第3次[（178.25±6.65）mg]開(kāi)始下降，第4次開(kāi)始下降更明顯[第4次FIB因子含量（170.55±5.55）mg]（P＜0.05）。

內(nèi)、外源凝血途徑被激活后，凝血因子和血小板粘連在一起參與止血。該研究與國(guó)外報(bào)道的“單采后可能出現(xiàn)潛在前凝血狀態(tài)”相似，單采后的血小板處于激活狀態(tài)，血小板膜糖蛋白GPⅡb和GPⅢa是纖維蛋白原受體，促進(jìn)血小板凝集，凝塊形成[11-13]。該次研究顯示，半個(gè)月或1個(gè)月一次同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿制備的冷沉淀Ⅷ因子和纖維蛋白原含量偏低，與忻黎娜等[14]研究指出單采2 U血小板后Ⅷ因子較單采前下降相似。凝血因子是參與血液凝固的各種蛋白質(zhì)組分，考慮半個(gè)月或1個(gè)月一次同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿時(shí)，凝血因子的消耗大于合成[15-16]，而且單采時(shí)間比捐獻(xiàn)全血時(shí)間長(zhǎng)，大劑量的抗凝劑進(jìn)入獻(xiàn)血者血循環(huán)，凝血酶原復(fù)合物增加使凝血酶產(chǎn)生增多，通過(guò)正常凝血的負(fù)反饋調(diào)節(jié)破壞凝血因子[17-18]。該研究顯示同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿對(duì)血漿總蛋白含量無(wú)顯著影響，捐獻(xiàn)后會(huì)出現(xiàn)血漿蛋白濃度暫時(shí)降低，但同時(shí)獻(xiàn)血可刺激肝臟合成蛋白，使獻(xiàn)血者在獻(xiàn)血后血漿蛋白水平應(yīng)激性升高，不會(huì)影響獻(xiàn)血者的身體健康及造成低蛋白血癥[19-20]。

綜上所述，為了最大程度地利用有限的血液資源，更好地保障臨床用血，鑒于1個(gè)月一次的獻(xiàn)血者PLT、MPV無(wú)明顯區(qū)別，建議獻(xiàn)血者3個(gè)月一次同時(shí)單采血小板和新鮮冰凍血漿，期間可以每個(gè)月捐獻(xiàn)一次血小板。