雷東風(fēng)，王松，彭峰，劉佳,3，黃奕，趙云煥,3，王俊鋒,3*

(1.河南省正陽(yáng)種豬場(chǎng)，河南 駐馬店464000；2.信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院牧醫(yī)工程學(xué)院/信陽(yáng)市動(dòng)物健康養(yǎng)殖營(yíng)養(yǎng)工程技術(shù)研究中心/信陽(yáng)市畜禽生態(tài)養(yǎng)殖與環(huán)境控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南 信陽(yáng) 464000；3.河南省大別山區(qū)生態(tài)畜禽健康生產(chǎn)工程研究中心，河南 信陽(yáng) 464000；4.河南宏展畜牧科技有限公司，河南 信陽(yáng) 464000)

在動(dòng)物生產(chǎn)中氧化應(yīng)激現(xiàn)象十分普遍，給動(dòng)物健康和生產(chǎn)性能帶來(lái)不良影響。母豬是多胎動(dòng)物，機(jī)體代謝比較旺盛，再加上營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境和飼養(yǎng)管理等諸多因素的影響，機(jī)體容易產(chǎn)生過(guò)量的氧自由基引發(fā)氧化應(yīng)激，尤其是妊娠后期和哺乳期母豬氧化應(yīng)激現(xiàn)象更為嚴(yán)重7[1]。據(jù)報(bào)道，在母豬飼糧中添加外源抗氧化劑以提高母豬自身抗氧化能力和完善抗氧化系統(tǒng)功能可有效緩解母豬氧化應(yīng)激[2]。硒和茶粉均具有抗氧化作用，前者主要通過(guò)硒蛋白、與維生素E協(xié)同等抑制脂質(zhì)過(guò)氧化、催化還原機(jī)體內(nèi)有毒的過(guò)氧化物(包括過(guò)氧化氫的反應(yīng))，消除過(guò)多自由基，保護(hù)生物體的膜結(jié)構(gòu)與功能，從而提高母豬的抗氧化能力[3]。后者是通過(guò)提高機(jī)體抗氧化酶含量及活性，降低氧化代謝產(chǎn)物和自由基水平，保護(hù)機(jī)體抗氧化防御體系，從而提高機(jī)體抗氧化能力，進(jìn)而減小母豬氧化應(yīng)激造成的損害，其中發(fā)揮主導(dǎo)作用的是茶多酚(其中兒茶素約占80%)[4]?，F(xiàn)有研究表明，母豬飼糧中添加硒[5-6]、茶多酚[7]或兒茶素[8]等能夠不同程度地提高其血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性和總抗氧化能力(T-AOC)，降低丙二醛(MDA)含量，同時(shí)還可改善母豬繁殖性能。然而，富硒發(fā)酵茶葉粉的添加對(duì)母豬抗氧化性能和繁殖性能的研究報(bào)道甚少。為此，本試驗(yàn)通過(guò)在妊娠后期母豬飼糧中添加富硒發(fā)酵茶葉粉，探索富硒發(fā)酵茶葉粉對(duì)母豬繁殖性能及抗氧化性能的影響，以期為茶飼料資源的開發(fā)及其在母豬健康生產(chǎn)中的科學(xué)應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

富硒發(fā)酵茶葉粉是將茶葉粉(信陽(yáng)毛尖，購(gòu)自當(dāng)?shù)仄胀ㄊ袌?chǎng)，干燥后粉碎，過(guò)0.45 mm孔篩，40目；)與1%亞硒酸鈉粉(黃驊市津驊添加劑有限公司生產(chǎn))以400∶1的比例通過(guò)三維運(yùn)動(dòng)混合機(jī)(浙江華聯(lián)制藥機(jī)械股份有限公司)進(jìn)行混合，混勻后用二級(jí)菌種液(益生菌種為安徽科的生物科技有限公司生產(chǎn))與其拌勻，其濕度約到手抓成形即可，然后裝入聚乙烯塑料袋中，壓實(shí)密封。待發(fā)酵完成后，將其發(fā)酵物于自然條件下晾曬，然后再在65℃恒溫條件下烘干，裝袋備用。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用膘情、預(yù)產(chǎn)期、胎次(2～5胎次)相近的健康且處于妊娠85±5 d的長(zhǎng)大二元雜交母豬48頭，隨機(jī)分為4組，每組12個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ在母豬基礎(chǔ)飼糧中分別添加3、6、9 g/頭·天富硒發(fā)酵茶葉粉。

1.3 飼養(yǎng)管理與日糧組成

妊娠母豬單欄飼喂，每天定時(shí)飼喂2次，分娩前7 d轉(zhuǎn)入分娩舍。試驗(yàn)從母豬妊娠85±5 d開始至母豬分娩前1 d結(jié)束。富硒發(fā)酵茶葉粉分別于早上母豬喂料時(shí)將其拌入飼料中，確保吃完。母豬基礎(chǔ)飼糧均由河南宏展畜牧科技有限公司提供，其基礎(chǔ)飼糧營(yíng)養(yǎng)水平(均為計(jì)算值)為消化能13.78 MJ/kg，粗蛋白18.15%，鈣0.24%，總磷0.45%，賴氨酸0.92%，蛋氨酸+半胱氨酸0.58%。其它日常管理(如免疫、驅(qū)蟲和消毒等)均按照豬場(chǎng)正常管理程序進(jìn)行。

1.4 母豬繁殖性能的測(cè)定

于母豬分娩12～24 h之內(nèi)，分別記錄每頭母豬的窩產(chǎn)仔數(shù)和產(chǎn)活仔數(shù)，同時(shí)準(zhǔn)確稱量仔豬初生個(gè)體重和初生窩重等。

1.5 樣品采集與分析

1.5.1 血樣的采集與分析 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每組隨機(jī)選5頭母豬，前腔靜脈采血10 mL/頭，室溫避光靜置30 min后，4000 r/min離心15 min，吸取上清液，即血清，將之分裝于EP管中，置于-20℃冷凍保存?zhèn)溆?。按照試劑盒說(shuō)明測(cè)定母豬血清T-AOC及MDA、GSH含量，試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.5.2 乳樣的采集與分析 每組選取5頭母豬，在分娩后第3天，分別從前、中、后3個(gè)部位的乳頭采集乳樣，采樣前用干凈的毛巾沾溫水將乳房洗凈。每頭母豬共收集樣品約10 mL，-20℃保存。按照試劑盒說(shuō)明測(cè)定SOD活性、T-AOC及MDA、谷胱甘肽(GSH)含量，試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.6 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel軟件初步處理后，采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，使用Duncan’s法進(jìn)行多重比較，試驗(yàn)結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 富硒發(fā)酵茶葉粉對(duì)妊娠母豬繁殖性能的影響

由表1可知，各組母豬的窩產(chǎn)仔數(shù)無(wú)顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組Ⅱ的母豬產(chǎn)活仔數(shù)和仔豬初生窩重均顯著增加(P<0.05)，試驗(yàn)組Ⅰ和Ⅲ的母豬 產(chǎn) 活 仔 數(shù) 和 仔 豬 初 生 窩 重 無(wú) 顯 著 差 異(P>0.05)；試驗(yàn)組Ⅰ的仔豬初生個(gè)體重最高，顯著高于對(duì)照組0.08 kg(P<0.05)，但試驗(yàn)組Ⅱ和Ⅲ的仔豬初生個(gè)體重?zé)o顯著差異(P>0.05)。

表1 富硒發(fā)酵茶葉粉對(duì)妊娠母豬繁殖性能的影響

2.2 富硒發(fā)酵茶葉粉對(duì)妊娠母豬抗氧化性能的影響

由表2可知，各組母豬的血清MDA 含量和GSH含量均無(wú)顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組Ⅰ和Ⅱ的母豬血清T-AOC活性均顯著增高(P<0.05)，但試驗(yàn)組Ⅲ的母豬血清T-AOC活性無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表2 富硒發(fā)酵茶葉粉對(duì)妊娠母豬抗氧化性能的影響

2.3 富硒發(fā)酵茶葉粉對(duì)妊娠母豬初乳抗氧化特性的影響

由表3可知，各組母豬的初乳MDA 含量無(wú)顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比，各試驗(yàn)組的母豬初乳T-AOC活性均顯著增高(P<0.05)，但各試驗(yàn)組組間差異不顯著(P>0.05)；試驗(yàn)組Ⅱ的母豬初乳GSH含量顯著增高(P<0.05)，但試驗(yàn)組Ⅰ和Ⅲ的母豬初乳GSH含量無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表3 富硒發(fā)酵茶葉粉對(duì)妊娠母豬初乳抗氧化特性的影響

3 討論

3.1 富硒發(fā)酵茶葉粉對(duì)妊娠母豬生產(chǎn)性能的影響

母豬的繁殖性狀通常包括總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、初生重、初生窩重、21日齡窩重、斷奶仔數(shù)、斷奶重等指標(biāo)，其中產(chǎn)仔數(shù)和初生重是衡量母豬產(chǎn)仔性能的重要指標(biāo)。目前有關(guān)茶葉及其副產(chǎn)物在母豬上的應(yīng)用報(bào)道較少。張幸彥等在后備母豬飼糧中添加100 mg/kg茶多酚后，母豬窩產(chǎn)仔數(shù)、窩產(chǎn)活仔數(shù)和21日齡斷奶仔豬數(shù)分別顯著提高了1.46頭、1.76頭和1.1頭，母豬斷奶7 d和21 d內(nèi)發(fā)情率分別顯著提高了24.68%和7.14%，而斷奶10 d內(nèi)發(fā)情間隔顯著縮短了1.45 d，但仔豬初生個(gè)體重和仔豬初生窩重均無(wú)明顯變化。同樣，肖勇[8]研究發(fā)現(xiàn)，在妊娠前期母豬飼糧中添加200 mg/kg和300 mg/kg兒茶素均能顯著提高母豬窩產(chǎn)活仔數(shù)和健仔數(shù)，顯著降低母豬窩死胎數(shù)，但對(duì)仔豬初生重?zé)o顯著影響。本試驗(yàn)通過(guò)在妊娠后期母豬飼糧添加富硒發(fā)酵茶葉粉后，結(jié)果顯示，6 g/頭·天富硒發(fā)酵茶葉粉組母豬產(chǎn)活仔數(shù)也顯著高于對(duì)照組1.5頭，同樣對(duì)仔豬初生重?zé)o顯著影響，但本試驗(yàn)條件下仔豬初生窩重則顯著高于對(duì)照組2.65 kg，這與張幸彥等和肖勇的研究結(jié)果不同，可能是由于母豬品種、飼養(yǎng)環(huán)境、添加劑的成分等不同所導(dǎo)致。本試驗(yàn)是在夏季持續(xù)高溫條件下進(jìn)行的。據(jù)報(bào)道，高溫?zé)釕?yīng)激會(huì)對(duì)試驗(yàn)?zāi)肛i產(chǎn)生不良影響，如降低母豬產(chǎn)活仔數(shù)和死胎數(shù)[9]。因此，本試驗(yàn)條件下母豬產(chǎn)活仔數(shù)的顯著增高，說(shuō)明富硒發(fā)酵茶葉粉可能是改善母豬機(jī)體抗氧化功能、從而減少妊娠后期發(fā)生胚胎死亡的主要因素，本試驗(yàn)中母豬血清抗氧化性能的升高進(jìn)一步證實(shí)了這一點(diǎn)；仔豬初生窩重的增加，可能是由于富硒發(fā)酵茶葉粉增強(qiáng)了母豬對(duì)飼糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和消化利用，優(yōu)化了腸道環(huán)境。研究表明，茶多酚和硒能有效提高動(dòng)物的飼料轉(zhuǎn)化率[10]，改善畜禽腸道主要微生物環(huán)境[11]，其具體作用機(jī)制仍需進(jìn)一步深入研究。

3.2 富硒發(fā)酵茶葉粉對(duì)妊娠母豬血清和初乳抗氧化指標(biāo)的影響

氧化應(yīng)激，即機(jī)體自由基生成增加或(和)清除能力降低，引起機(jī)體氧化和抗氧化系統(tǒng)平衡紊亂，導(dǎo)致自由基在體內(nèi)積累而引起的氧化損傷過(guò)程。母豬是多胎動(dòng)物，營(yíng)養(yǎng)代謝效率和機(jī)體動(dòng)員頻率較高，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生大量的自由基，極易誘發(fā)氧化應(yīng)激，尤其是妊娠后期和泌乳期母豬氧化應(yīng)激現(xiàn)象更為嚴(yán)重。生產(chǎn)中，在母豬飼糧中添加外源抗氧化劑以提高母豬機(jī)體自身的抗氧化能力和完善抗氧化系統(tǒng)功能是目前緩解母豬氧化應(yīng)激的有效根本方式[12]。茶多酚是一類氧化還原電位很低的抗氧化劑，可通過(guò)提高機(jī)體抗氧化酶含量及活性，降低氧化代謝產(chǎn)物和自由基水平，保護(hù)機(jī)體抗氧化防御體系，從而提高機(jī)體抗氧化能力，進(jìn)而減小母豬氧化應(yīng)激造成的損害。硒是動(dòng)物機(jī)體所必需的微量元素之一，可通過(guò)硒蛋白、與維生素E協(xié)同等提高母豬的抗氧化能力。此外，也有研究發(fā)現(xiàn)，硒與茶多酚互作對(duì)提高機(jī)體抗氧化性能有協(xié)同作用[13-14]。本試驗(yàn)在妊娠后期母豬飼糧中添加富硒發(fā)酵茶葉粉，結(jié)果表明母豬血清T-AOC活性顯著提高，這與張幸彥等和肖勇的試驗(yàn)結(jié)果一致，說(shuō)明富硒發(fā)酵茶葉粉在一定程度上可有效提高母豬血清抗氧化水平，這可能是茶葉活性成分茶多酚以及微量元素硒等共同作用的結(jié)果。但本試驗(yàn)條件下，母豬血清MDA和GSH含量均無(wú)顯著變化，而是分別呈降低和升高趨勢(shì)，這與以上研究結(jié)果存在差異，原因可能與本試驗(yàn)的環(huán)境條件(夏季持續(xù)高溫)、添加時(shí)間(母豬妊娠85±5 d至分娩前1 d)以及試驗(yàn)?zāi)肛i個(gè)體差異等因素有關(guān)。

母乳作為胎兒營(yíng)養(yǎng)的主要來(lái)源，能否為胎兒提供充足的抗氧化物質(zhì)顯得尤為重要。目前，關(guān)于富硒發(fā)酵茶葉粉對(duì)母豬初乳抗氧化性能影響的研究還未見報(bào)道，但關(guān)于其它天然抗氧化劑的研究已有報(bào)道。杜會(huì)堂等[15]在妊娠后期和哺乳前期母豬日糧中添加茴香，結(jié)果母豬初乳中T-SOD含量顯著提高，MDA含量則顯著降低，但GSH含量無(wú)顯著變化。這與本試驗(yàn)結(jié)果不盡一致，本試驗(yàn)中富硒發(fā)酵茶葉粉顯著提高母豬初乳T-AOC活性和GSH含量，而MDA含量無(wú)明顯變化，這種差異可能是試驗(yàn)?zāi)肛i群體數(shù)量小或添加時(shí)間短等因素所致，但總體來(lái)看，富硒發(fā)酵茶葉粉提高了母豬初乳抗氧化水平，其具體機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

4 小結(jié)

妊娠后期母豬飼糧添加富硒發(fā)酵茶葉粉能改善母豬的繁殖性能和抗氧化能力，對(duì)仔豬初生窩重和仔豬初生重、分娩母豬的血清和初乳中T-AOC活性均有顯著影響。在本試驗(yàn)條件下，從母豬產(chǎn)仔性能來(lái)看，富硒發(fā)酵茶葉粉的添加量為3～6 g/頭·天較好；從母豬血清和初乳抗氧化能力來(lái)看，富硒發(fā)酵茶葉粉的添加量為6 g/頭·天較好。