王海永，胡琴琴，陳芳芳，朱小飛△

1.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇南京 210000；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南京醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇南京 210000

新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是由2019新型冠狀病毒感染引起的急性呼吸道傳染病[1-2]。COVID-19輕型患者以發(fā)熱、呼吸道癥狀、乏力和腹瀉等為主要表現(xiàn)，嚴(yán)重者可進(jìn)展為多器官功能障礙綜合癥、膿毒癥休克、凝血功能障礙等[3]。目前全球累計(jì)COVID-19死亡病例逾340萬例，給人類的健康和財(cái)產(chǎn)造成極大損失。因此，COVID-19的早期和快速診斷尤其重要。實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測是診斷COVID-19的金標(biāo)準(zhǔn)，但核酸檢測需要較長的反應(yīng)時(shí)間、嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室條件、專業(yè)的設(shè)備和技術(shù)人員，而且會受到采樣、試劑和人員操作等因素的影響，除此之外，核酸檢測還有20%的假陽性率[4]。全血細(xì)胞計(jì)數(shù)(CBC)是臨床上最常用的實(shí)驗(yàn)室檢查之一，在不同級別、不同條件的醫(yī)院都可以開展。如果可以通過CBC及其相關(guān)參數(shù)快速預(yù)測或篩查出COVID-19感染，患者將得到更及時(shí)的治療，延緩病情的發(fā)展。最近，LIU等[5]發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值(NLR)是COVID-19嚴(yán)重者的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,WANG等[6]發(fā)現(xiàn)血小板分布寬度對COVID-19輕癥者有潛在的診斷價(jià)值。然而，其他血液學(xué)參數(shù)在COVID-19中的應(yīng)用價(jià)值有待挖掘。本研究采用回顧性研究方法，收集了100例COVID-19患者入院時(shí)和隨訪時(shí)的CBC結(jié)果，探索COVID-19患者CBC及其相關(guān)參數(shù)變化的特點(diǎn)和規(guī)律。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性地將2020年1月至2021年3月南京市公共衛(wèi)生醫(yī)療中心收治的100例COVID-19患者納入研究，患者年齡(42.1±16.0)歲，其中男性54例，女性46例，所有患者均符合《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第六版)》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。納入研究的患者痊愈出院后均通過隨訪門診進(jìn)行復(fù)診。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)具有明確的流行病學(xué)接觸史及COVID-19臨床癥狀和(或)肺部影像學(xué)特征；(2)呼吸道、血液標(biāo)本實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈反應(yīng)檢測新型冠狀病毒核酸呈陽性；(3)呼吸道、血液標(biāo)本病毒基因測序，與已知的病毒序列高度同源。

1.2試劑與儀器 血液檢查指標(biāo)的檢測采用日本Sysmex公司XN-10[B1]型全自動模塊式血液體液分析儀，配套試劑由Sysmex公司提供。

1.3方法 使用血液體液分析儀測定血液檢查，包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)(NEU)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)(LYM)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)(MON)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)、平均血小板體積(MPV)等；所有項(xiàng)目均按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作，所有檢測項(xiàng)目的質(zhì)控結(jié)果均為正常在控。為確保實(shí)驗(yàn)室的生物安全，所有標(biāo)本的采集、運(yùn)輸及實(shí)驗(yàn)室操作均嚴(yán)格參照《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第六版)》執(zhí)行。另外5個(gè)血液學(xué)參數(shù)通過計(jì)算獲得，分別是NLR、血小板與淋巴細(xì)胞比值(PLR)、淋巴細(xì)胞與單核細(xì)胞比值(LMR)、平均血小板體積與血小板比值(MPV/PLT)、淋巴細(xì)胞與血小板乘積(LYM*PLT)。

2 結(jié) 果

2.1患者入院和隨訪時(shí)血液檢查指標(biāo)比較 入院時(shí)患者RBC、Hb、WBC、LYM、NEU、PLT、LMR和LYM*PLT水平均低于隨訪時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；入院時(shí)MON、MPV和MPV/PLT水平均高于隨訪時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；兩組間NLR和PLR水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 入院時(shí)與隨訪時(shí)血液學(xué)指標(biāo)的比較或M(P25～P75),n=100]

2.2患者血液檢查指標(biāo)的多因素Logistic回歸分析 患者M(jìn)PV水平越高，患COVID-19的危險(xiǎn)性越大(P<0.05)；LYM和PLT越低，患COVID-19的危險(xiǎn)性也越大(P<0.05)。見表2。

表2 COVID-19患者血液指標(biāo)的多因素二元Logistic回歸分析

2.3ROC曲線分析各項(xiàng)指標(biāo)用于診斷COVID-19的價(jià)值 MPV/PLT用于診斷COVID-19的曲線下面積(AUC)為0.789，最佳診斷界值為0.051時(shí)，此時(shí)的診斷靈敏度為61%，特異度為85%。LYM*PLT用于診斷COVID-19的AUC為0.739，最佳診斷界值為379.26，此時(shí)的診斷靈敏度為73%，特異度為67%。MPV/PLT和LYM*PLT聯(lián)合診斷(并聯(lián))COVID-19的靈敏度為92%，特異度為60%。見表3、圖1。

圖1 LYM、PLT、MPV、MPV/PLT和LYM*PLT用于診斷COVID-19的ROC曲線

表3 LYM、PLT、MPV、MPV/PLT和LYM*PLT對COVID-19的診斷效能

續(xù)表3 LYM、PLT、MPV、MPV/PLT和LYM*PLT對COVID-19的診斷效能

3 討 論

目前有許多檢測方法可以用于診斷COVID-19，如核酸、抗體、抗原檢測等，但是在基礎(chǔ)條件較差的基層或社區(qū)醫(yī)院，這些檢測方法往往不可用。無法快速診斷或排除COVID-19給疾病的控制帶來了很大困難。在這種情況下，利用常規(guī)檢測對COVID-19進(jìn)行診斷或鑒別診斷具有重要的意義。本研究旨在發(fā)現(xiàn)一些實(shí)驗(yàn)室血液學(xué)檢查參數(shù)，在等待核酸檢測結(jié)果時(shí)，對出現(xiàn)疑似癥狀的患者進(jìn)行COVID-19的鑒別診斷。

在本研究中，COVID-19患者入院時(shí)LYM水平低于隨訪時(shí)(P<0.01),這與其他研究的結(jié)果一致[7]。LYM水平降低可能與COVID-19早期免疫系統(tǒng)被抑制有關(guān)，有研究發(fā)現(xiàn)，在COVID-19患者尿液中與免疫應(yīng)答相關(guān)的蛋白水平降低，如蛋白酪氨酸磷酸酶受體C型、瘦素和抗酒石酸磷酸酶5型[8]。與隨訪時(shí)相比，入院時(shí)患者PLT水平也更低(P<0.01)。這可能是由于巨核細(xì)胞的破壞和PLT壽命的縮短；同時(shí)，病毒可以導(dǎo)致PLT活化和聚集，加重PLT水平的降低[9]。MPV與血小板的數(shù)量呈負(fù)相關(guān)，是反映血小板活化的重要指標(biāo)[10]。COVID-19患者入院時(shí)MPV水平明顯升高(P<0.01)，可能有如下原因：(1)COVID-19患者早期免疫系統(tǒng)被抑制，炎性細(xì)胞數(shù)量減少，炎性細(xì)胞因子水平正常，未刺激脾臟中血小板的釋放；(2)新型冠狀病毒感染會引發(fā)血小板活化和血小板聚集，導(dǎo)致PLT水平降低，MPV水平升高。研究發(fā)現(xiàn)，MPV水平與COVID-19患者的病死率有關(guān)，病死率隨MPV的增加而升高[11]。本研究顯示，MPV水平越高，感染COVID-19的危險(xiǎn)性越大。

研究發(fā)現(xiàn)，MPV/PLT和LYM*PLT在呼吸道病毒感染患者中的水平有差異性[12]，然而在有關(guān)COVID-19的報(bào)道中鮮有提及，COVID-19患者M(jìn)PV水平升高，PLT和LYM水平降低?；谠撎卣骱蛥⒖嘉墨I(xiàn)[12],本研究選擇將MPV/PLT和LYM*PLT作為診斷指標(biāo),以期獲得良好的診斷效能。在進(jìn)行診斷效能分析的參數(shù)中，MPV/PLT的AUC為0.789，靈敏度為61%，特異度為85%，AUC最大。這些血液學(xué)參數(shù)對COVID-19具有一定的診斷價(jià)值，但診斷價(jià)值不是很高。LYM*PLT的AUC為0.739，靈敏度為73%，特異度為67%，與MPV/PLT聯(lián)合應(yīng)用可以提高對COVID-19的診斷價(jià)值。LYM*PLT的AUC稍低于PLT和MPV，這可能是由于樣本量的影響，LYM和PLT的降低與COVID-19早期免疫系統(tǒng)被抑制有關(guān)，LYM*PLT能更好地反映這一機(jī)制。在使用這些參數(shù)作為診斷指標(biāo)時(shí)，應(yīng)結(jié)合流行病史及肺部影像學(xué)結(jié)果，對于COVID-19疑似患者，建議做核酸檢測，以免漏診或誤診。根據(jù)本研究的數(shù)據(jù)，筆者認(rèn)為如果MPV/PLT高于0.051、LYM*PLT值低于379.26，患有COVID-19的可能性較大。

本研究為回顧性、單中心研究且樣本量較小，有一定局限性，為了更好地驗(yàn)證這些參數(shù)的可靠性，還需要擴(kuò)大樣本量、進(jìn)行多中心的前瞻性研究。