覃英克，吳冬梅，覃 倩，莫漢蘭，程振濤

(1.貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025；2.貴州省荔波縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州 荔波 558400；3.凱里市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 凱里 556000)

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的高度接觸性、熱性、急性傳染病，我國(guó)將其歸為一類動(dòng)物疫病，以發(fā)熱，口腔黏膜、蹄部、乳房皮膚發(fā)生水皰和潰爛為主要癥狀，可通過空氣傳播，傳播速度快，發(fā)病率高，偶爾可傳染人[1]。該病可對(duì)豬、牛、羊等偶蹄動(dòng)物的養(yǎng)殖生產(chǎn)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失[2]。2010—2018年，我國(guó)公開報(bào)道各類動(dòng)物口蹄疫疫情達(dá)64起，雖然近年來我國(guó)在口蹄疫防控方面取得了很大進(jìn)展，但口蹄疫疫情的零星發(fā)生依然存在[3]。目前，實(shí)施強(qiáng)制免疫仍然是我國(guó)防控家畜口蹄疫的重要手段，免疫動(dòng)物群體的抗體水平是衡量免疫效果的主要指標(biāo)之一[4]?，F(xiàn)將2015—2020年荔波縣豬、牛、羊口蹄疫免疫抗體監(jiān)測(cè)情況報(bào)道如下，為下一步的防控工作提供參考和依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 血清樣品2015—2020年在荔波縣養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)隨機(jī)采集已免疫O型口蹄疫疫苗21～30 d的豬、牛、羊血液，靜置自然析出血清，-20 ℃保存?zhèn)溆?。其中：豬血清1 566份(55個(gè)規(guī)模場(chǎng)、80個(gè)散養(yǎng)戶)，牛血清223份(22個(gè)規(guī)模場(chǎng)、42個(gè)散養(yǎng)戶)，羊血清1 029份(82個(gè)規(guī)模場(chǎng)、12個(gè)散養(yǎng)戶)。

1.2 主要試劑口蹄疫病毒O型競(jìng)爭(zhēng)ELISA抗體檢測(cè)試劑盒(武漢科前生物股份有限公司生產(chǎn))。

1.3 主要儀器臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)、臥式冷藏冷凍轉(zhuǎn)換柜(青島海爾特種電器有限公司)、Multiskan FC型酶標(biāo)儀[賽默飛世爾(上海)儀器有限公司]。

1.4 免疫抗體檢測(cè)

1.4.1 檢測(cè)方法取出保存于-20 ℃冰箱中的血清樣品和口蹄疫病毒O型競(jìng)爭(zhēng)ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，恢復(fù)至室溫。血清樣品、陽性和陰性對(duì)照5倍稀釋。取抗原包被板，洗滌拍干，加入稀釋好的血清樣品、陽性和陰性對(duì)照各50 μL，各孔加入酶標(biāo)記物50 μL，輕微振蕩混勻，置37 ℃下孵育30 min；棄各孔反應(yīng)液，洗滌拍干，各孔加入底物液100 μL，置20～25 ℃避光顯色15 min；各孔加入終止液50 μL，用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔D450 nm值。

1.4.2 結(jié)果判定實(shí)驗(yàn)成立條件：陰性對(duì)照的平均D450 nm值與陽性對(duì)照的平均D450 nm值之差≥0.5。S為樣品D450 nm值，N為陰性對(duì)照平均D450 nm值，S/N值<0.35則樣品判為陽性，S/N值≥0.35則樣品判為陰性。

2 結(jié)果

2.1 不同家畜O型口蹄疫免疫抗體檢測(cè)情況由表1可見：檢測(cè)豬養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)135個(gè)、樣品1 566份，免疫抗體合格率為87.42%；牛養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)64個(gè)、樣品223份，免疫抗體合格率為91.48%；羊養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)94個(gè)、樣品1 029份，免疫抗體合格率為89.80%；3種家畜的總體免疫抗體合格率均達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求(≥70%)，家畜群體免疫抗體合格率總體較高。

表1 家畜O型口蹄疫免疫抗體檢測(cè)統(tǒng)計(jì)

2.2 不同養(yǎng)殖模式O型口蹄疫免疫抗體檢測(cè)情況由表2可見：豬、牛、羊規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的平均免疫抗體合格率分別為91.4%、94.6%、92.6%，抗體合格率均在90%以上。散養(yǎng)戶的平均免疫抗體合格率分別為84.1%、82.1%、68.9%，其中羊散養(yǎng)戶的平均合格率未達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求。從總體上看，規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的免疫抗體合格率要高于散養(yǎng)戶。

表2 不同養(yǎng)殖模式O型口蹄免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

2.3 2015—2020年荔波縣家畜O型口蹄疫免疫抗體檢測(cè)情況由圖1可見：6年中豬、牛、羊O型口蹄疫免疫抗體平均合格率基本穩(wěn)定在80%～100%之間，其中2015年牛、羊免疫抗體合格率較低，分別為78.43%、77.03%；2016年豬免疫抗體合格率較低(82.86%)。經(jīng)調(diào)查分析發(fā)現(xiàn)與檢測(cè)樣品來源于散養(yǎng)戶的占比較高有關(guān)。

圖1 荔波縣豬、牛、羊O型口蹄疫免疫抗體檢測(cè)

3 討論

3.12016年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部印發(fā)《國(guó)家口蹄疫防治計(jì)劃(2016—2020 年)》，我國(guó)有計(jì)劃地推廣口蹄疫強(qiáng)制免疫，提高了易感動(dòng)物的免疫力，特別是在邊境復(fù)雜的流行環(huán)境下取得了較大的成效[5]。本文通過對(duì)貴州省荔波縣2015—2020年豬、牛、羊O型口蹄疫免疫效果進(jìn)行監(jiān)測(cè)，結(jié)果除散養(yǎng)戶的羊以外，均達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求，說明荔波縣豬、牛、羊O型口蹄疫強(qiáng)制免疫工作取得了較好的效果。

3.2不同養(yǎng)殖模式下，荔波縣家畜O型口蹄疫免疫抗體合格率存在差異，總體情況為規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)比散養(yǎng)戶高。分析原因與散養(yǎng)戶在接種過程中操作不規(guī)范、防疫意識(shí)淡薄等有一定關(guān)系[6]。2015—2017年統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)中均有規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)和散養(yǎng)戶，能夠充分體現(xiàn)本地區(qū)飼養(yǎng)家畜的總體免疫情況，但2018—2020年后主要是監(jiān)測(cè)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)，散養(yǎng)戶抽檢較少，不能全面對(duì)本地區(qū)的免疫情況進(jìn)行評(píng)估，有一定的片面性，其主要原因是2018年后荔波縣養(yǎng)殖模式逐漸向規(guī)?；?、集約化發(fā)展，散養(yǎng)戶減少，難以采樣等有關(guān)。