羅 舜，鄧才富，譚秋生，羅 敏，章文偉

（重慶市藥物種植研究所，重慶 408435）

太白貝母是百合科貝母屬多年生植物，在重慶、陜西、四川、甘肅、湖北、云南、寧夏都有分布[1]，為2010 年版和2015 年版《中國藥典（一部）》中川貝母的新基源植物。太白貝母性味苦干，微寒，廣泛用于臨床藥用實踐。根作為藥用部位，傳統(tǒng)上應用于肺熱咳嗽、支氣管炎、咳痰不利等疾病的治療，現(xiàn)代研究證明其具有鎮(zhèn)咳祛痰、平喘、抗癌、抗菌消炎、抗氧化等功效[2]。

太白貝母主要有效成分為生物堿、核苷和多糖等[3～5]，目前，多糖類化合物因具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、抗炎、抗應激、抗輻射及抗衰老等多種生物活性，成為研究熱點之一[6]。該文對太白貝母多糖的提取純化、結(jié)構(gòu)表征與生物活性研究進展進行總結(jié)，為進一步開展相關(guān)研究提供思路。

一、多糖的提取純化

1、多糖的提取

目前，中藥多糖在提取前一般使用石油醚、乙醚、乙醇等有機溶劑除去脂溶性雜質(zhì)。多糖屬于極性大分子，一般不溶于有機溶劑，難溶于冷水，易溶于熱水，傳統(tǒng)方法多用熱水進行多糖提取。在水提過程中，若應用了添加特異性酶、超聲、微波、超臨界萃取等技術(shù)，就形成了酶解法、超聲波提取法、微波提取法和超臨界流體萃取法等現(xiàn)代多糖提取方法[7]。根據(jù)多糖不溶于低級醇的性質(zhì)，在中藥提液中加入甲醇、乙醇或丙酮可使多糖從初提液中沉淀出來，得到粗多糖。

陳林等[8]采用水浴法提取太白貝母粗多糖，通過單因素法考察提取時間、提取溫度、料液比對粗多糖提取效果的影響，并運用響應面法優(yōu)化提取工藝。試驗結(jié)果表明，提取時間對太白貝母粗多糖提取效果的影響最大，其次是提取溫度與料液比。響應面法優(yōu)化太白貝母粗多糖提取工藝的最適條件為：提取溫度84.2℃、提取時間為1.6 h、料液比為1.0:16.3，得到的粗多糖提取率為1.267%。

陳林等[9]還應用響應面法優(yōu)化了超聲提取太白貝母粗多糖的工藝。試驗結(jié)果表明，顯示貝母粗多糖提取的最佳提取工藝參數(shù)為：提取溫度75℃、提取時間16 min、料液比1:15，總糖含量為0.461%。分析可知，超聲提取法只花了水浴提取法時長的1/6，即可獲得水浴提取粗多糖總量的1/3。該提取法所需時間更少，與王紅博等[10]不同方法提取太白貝母粗多糖試驗結(jié)論中，超聲提取法較水浴法縮短提取時間的同時提高粗多糖的提取率觀點一致。

2、多糖的純化

粗多糖中常混有蛋白質(zhì)、色素及一些小分子物質(zhì)。為了得到純多糖，需要除去這些物質(zhì)。除蛋白的方法包括：根據(jù)蛋白質(zhì)在氯仿等有機溶劑中變性的特點的Sevage 法、蛋白酶法、三氟三氯乙烷法、三氯醋酸法和反復凍融法。常用的脫色方法包括活性炭吸附法、氧化劑氧化法、離子交換法等。常用的除去小分子的方法有透析法、超濾法[11]。去除蛋白質(zhì)、色素、小分子等物質(zhì)得到的精制粗多糖，仍由很多分子量、結(jié)構(gòu)不同的多糖混合而成。為了得到純的多糖即均一性多糖，還需進一步進行分離純化。常用的純化法有沉淀法、膜分離法、色譜分離法（包括離子交換柱色譜法和凝膠柱色譜法兩類）[12]。

張華等人[13]將太白貝母粗多糖提取液分別經(jīng)過DA201-C型、AB-8 型、201×4 型、HPD600 型共4 種不同類型樹脂靜態(tài)吸附純化后，比較其對貝母粗多糖提取液中核酸脫除率、蛋白脫除率、色素脫除率的影響。結(jié)果表明，貝母粗多糖純化效果由優(yōu)到差分別是：201×4 型、AB-8 型、DA201-C 型、HPD600 型。

二、多糖的結(jié)構(gòu)表征

多糖的結(jié)構(gòu)可分為一級、二級、三級和四級結(jié)構(gòu)。其中一級結(jié)構(gòu)稱為初級結(jié)構(gòu)，二、三、四級結(jié)構(gòu)統(tǒng)稱多糖的高級結(jié)構(gòu)，均直接決定多糖的生物學活性。多糖的一級結(jié)構(gòu)是指糖基的組成、糖基排列順序、相鄰糖基的連接方式、異頭碳構(gòu)型以及糖鏈有無分支、分支位置與長短等。通常多糖的結(jié)構(gòu)解析僅對多糖的初級結(jié)構(gòu)進行解析[14]。

張華等[15]的研究表明：太白貝母NaCl 洗脫的多糖相對分子質(zhì)量為2×106。單糖組成類型相對較為單一，主要的單糖類型是D(+)-半乳糖，并且屬于α-型吡喃糖.

三、多糖的生物活性

現(xiàn)代研究表明，多糖具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、降血糖、降血脂、抗病毒、抗炎、抗氧化及抗衰老、抗輻射、抗凝血、抗血栓、抗突變等作用[16]。陳林等[5]進行的太白貝母粗多糖體外抗氧化試驗表明，多糖對DPPH 自由基和ABTS 自由基具有顯著的清除作用，并且隨著提取物濃度的增加，作用加強。

四、結(jié)語

目前對太白貝母的多糖研究不夠深入，后續(xù)研究可從現(xiàn)代提取方法、高級結(jié)構(gòu)解析以及多種生物活性的研究入手，為成功開發(fā)太白貝母多糖制劑提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐。