楊燁

摘 ? ?要：伴隨著經(jīng)濟社會不斷發(fā)展，人們生活水平日益提高，對于食品安全重視程度不斷加強，這也對蔬菜質(zhì)量安全提出了更高的要求。農(nóng)藥殘留快速檢測作為把好蔬菜質(zhì)量安全關(guān)的重要技術(shù)手段，近年來在農(nóng)藥殘留檢測方面普遍應(yīng)用。但目前在蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測方面仍存在一些問題，針對這些問題進(jìn)行分析，探討并提出一些有效對策，旨在進(jìn)一步提高蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)水平，最大程度地確保食用蔬菜的質(zhì)量，保證食品安全和人民身體健康。

關(guān)鍵詞：農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù);蔬菜檢測;問題;對策

文章編號：1005-2690（2021）19-0077-02 ? ? ? 中國圖書分類號：S481.8 ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

1 ? 酶抑制法——蔬菜農(nóng)藥殘留試驗操作流程

1.1 ? 原理

農(nóng)藥殘留快速檢測儀是根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5009.199—2003和農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法NY/T 448—2001中的酶抑制率法，結(jié)合快速檢測方法研制的全新食品安全檢測設(shè)備，能準(zhǔn)確、快速檢測出蔬菜、水果中有機磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量。在一定條件下，有機磷和氨基甲酸類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計測定412 nm下吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留[1]。

1.2 ? 檢測

1.2.1 ? 試劑配制

①提取液：提取液粉中加入510 mL蒸餾水，充分搖勻后備用。②酶液：每瓶酶液中加入3.1 mL提取液，充分搖勻后備用。③底物：每瓶底物中加入3.1 mL蒸餾水，充分搖勻后備用。④顯色劑：每瓶顯色劑加入32 mL提取液，搖勻后避光冷藏保存。

1.2.2 ? 樣品提取

果蔬樣品2 g，加入提取液10 mL，震蕩5 min后靜置2 min，取上層清液進(jìn)行檢測。

1.2.3 ? 對照溶液配制

將2.5 mL提取液加入試管中，加入酶液100μL、顯色劑100μL放置15 min后加入底物100μL，搖勻后迅速倒入比色皿中，放入儀器（BIII博納八通道殘留農(nóng)藥測定儀）第一通道進(jìn)行檢測[2]。

1.2.4 ? 樣品溶液配制

將2.5 mL樣品提取液加入到試管中，加入酶液100μL、顯色劑100μL放置15 min后加入底物100μL，搖勻后迅速倒入比色皿中，放入儀器中進(jìn)行檢測。

1.2.5 ? 儀器操作與結(jié)果判定

儀器開機后實施對照試驗，在第一通道中，放入對照溶液，樣品與對照溶液可共同開展試驗，開啟儀器上的對照鍵，儀器做完對照后，可將樣品放入所有通道，啟動測試鍵來開展檢測。結(jié)果判定過程中，50%以上抑制率，提示蔬菜中存在明顯的有機磷超標(biāo)或者氨基甲酸酯類農(nóng)藥超標(biāo)。檢測結(jié)果為陽性，需要進(jìn)行二次以上檢驗，還應(yīng)當(dāng)通過氣象色譜法進(jìn)行確認(rèn)，抑制率在50%以下，說明試驗樣品合格。

2 ? 試紙檢測法——農(nóng)藥殘留速測卡

2.1 ? 原理

農(nóng)藥殘留速測卡是根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)方法GB/T 5009.199—2003研發(fā)的快速檢測農(nóng)藥殘留的試紙，運用顯色劑和對農(nóng)藥高敏感的膽堿酯酶制成的試紙，能夠?qū)Π被姿狨ヮ愞r(nóng)藥和有機磷類農(nóng)藥在蔬菜中的殘留情況進(jìn)行快速及時的檢測[3]。

2.2 ? 檢測

2.2.1 ? 粗篩法

①將蔬菜表面存在的泥土擦干凈，將洗脫液滴在蔬菜上，并選擇另一片蔬菜摩擦此蔬菜表面的滴液。②將一片速測卡取下，把蔬菜上的滴液滴入白色藥片之上。③放置10 min預(yù)反應(yīng)，具備條件的可以利用恒溫裝置保持在37 ℃，放置10 min，藥片經(jīng)過預(yù)反應(yīng)后，要確保其表面濕潤度。④對折速測卡，通過恒溫裝置進(jìn)行3 min恒溫操作，也可用手捏3 min，確保白色與紅色藥片有效疊合，產(chǎn)生反應(yīng)。⑤測定每個批次蔬菜殘留過程中，應(yīng)當(dāng)對一個洗脫液空白對照卡進(jìn)行設(shè)定。

2.2.2 ? 整體測定法

①優(yōu)選代表性強的蔬菜測定樣品，將其表面的泥土全部插進(jìn)，利用剪刀把樣品設(shè)置成25 px的碎塊，取出5 g樣品后，放入有蓋的瓶中，并將緩沖溶液或者10 mL純凈水加入其中，進(jìn)行50次震搖，靜置2 min。②把一片速測卡取出后，通過白色藥片將提取液進(jìn)行沾取，并放置10 min預(yù)反應(yīng)，具備條件的可以在恒溫裝置37 ℃的條件下放置10 min，藥片經(jīng)過預(yù)反應(yīng)之后，表面必須要保證其濕潤度。③對折速測卡，在恒溫裝置下靜置3 min，也可用手捏3 min，確保白色藥片和紅色藥片充分疊合并產(chǎn)生反應(yīng)。④每批測定過程中必須要進(jìn)行緩沖液或者純凈水空白對照卡設(shè)定。

2.2.3 ? 折疊結(jié)果判定

對比空白對照卡，白色藥片輕微呈現(xiàn)淺藍(lán)色或者不變色都屬于陽性，沒有變藍(lán)主要表現(xiàn)為強陽性，提示農(nóng)藥有著很高的殘留量;而呈現(xiàn)淺藍(lán)色主要表現(xiàn)為弱陽性，農(nóng)藥有著較低的殘留量;白色藥片呈現(xiàn)天藍(lán)色，相同于空白對照卡，屬于陰性。針對蔬菜樣品屬于陽性，可運用其他方法對農(nóng)藥品種及其含量進(jìn)行確定[4]。

3 ? 酶抑制法和試紙檢測對比分析

在酶抑制法和試紙檢測兩種方法檢測過程中，都有著類似的檢測原理，能夠快速地檢測蔬菜中有無有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留，結(jié)果雖然會出現(xiàn)一些假陰性、假陽性，然而相較于質(zhì)譜法與氣象色譜法，可以更為簡單地開展操作，具有很高的檢測效率，設(shè)備投入也相對較小。在實踐中發(fā)現(xiàn)除了馬拉硫磷、甲胺磷和樂果之外，酶抑制法相較于試紙檢測法效果更好，而且該方法能夠同時對8個樣品進(jìn)行測定，減少了時間投入。試紙檢測方法攜帶非常方便，在檢測過程中技術(shù)要求不高、成本投入低、資金不足時可以運用此方法，快速地開展蔬菜農(nóng)藥殘留檢測。

4 ? 常見問題和處理方法

4.1 ? 檢查結(jié)果差異

同批次購入的蔬菜，由于個體因素影響，對農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果也帶來一定影響。農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)在取樣量以及定液量方面都存在一定的誤差，即使相同的儀器和方法也時常出現(xiàn)一些誤差，所以應(yīng)當(dāng)采取有效措施進(jìn)行處理。

第一，檢測工作開展前，認(rèn)真清洗相關(guān)器具，保證使用器具衛(wèi)生干凈，以免對檢測結(jié)果造成不利影響，完成取樣后及時封存，避免樣品變質(zhì)。第二，在取樣過程中應(yīng)當(dāng)多點混取，并保證適量平均，保證樣品的代表性與公平性。第三，應(yīng)加強儀器維護(hù)，確保儀器設(shè)備始終處于良好的工作狀態(tài)，科學(xué)規(guī)范操作，才能提高檢測效率與質(zhì)量，減少差錯。

4.2 ? ?抑制率過小

其一，由于發(fā)生反應(yīng)之前的酶活性已經(jīng)喪失，可能是酶過期失活。酶凍干劑在冷凍狀態(tài)下可保存一年，配制好的酶液在4 ℃的貯藏箱內(nèi)可保存7 d。

其二，因酶存在脆弱性的特征，為使其活性得到有效保障，工作人員在開展試驗時，應(yīng)當(dāng)確保恒定的溫度，使酶的穩(wěn)定性得到有效提高，進(jìn)而確保底物與酶反應(yīng)更加充分。抑制時間和酶的抑制力密切相關(guān)，所以還應(yīng)當(dāng)對時間科學(xué)掌握，確保樣品和空白對照反應(yīng)時間相同，避免酶與底物出現(xiàn)不徹底的反應(yīng)。

其三，檢測工作開展過程中，取樣時不能對蔬菜進(jìn)行清洗，這樣會稀釋掉蔬菜上的農(nóng)藥，導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。同時蔬菜生長需要光合作用的參與，而產(chǎn)生的葉綠素會對檢測結(jié)果造成一定影響，因此在對含有較高葉綠素蔬菜樣品檢測時，應(yīng)掌握科學(xué)的檢測時間，對蔬菜實施浸提處理，有效排除葉綠素的影響，保證結(jié)果更加精準(zhǔn)，多次檢測獲取其中的平均值。

4.3 ? 抑制率過大

抑制率過大主要是由于檢驗人員不規(guī)范操作所導(dǎo)致，即酶沒有通過上機比色，便與底物產(chǎn)生了反應(yīng)。所以工作人員在蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測過程中必須要保證規(guī)范性的操作，樣品培養(yǎng)必須要在規(guī)定的時間內(nèi)完成，培養(yǎng)時間不能隨意更改，應(yīng)控制在30 min內(nèi)，確保比色皿干凈衛(wèi)生，透光性較好。

5 ? 合理建議

在檢測實施前，對儀器進(jìn)行預(yù)熱，確保其持續(xù)穩(wěn)定運行，保證檢測效率及其質(zhì)量。檢測工作實施過程中，工作人員不能用手直接接觸比色皿表面，利用光面與毛面找準(zhǔn)光路，一般情況下，其中液體應(yīng)當(dāng)超過2/3，才能確保檢測結(jié)果更加理想。操作工作開展過程中，應(yīng)確保光面外部更加整潔，根據(jù)儀器產(chǎn)品說明書開展操作。白菜、豆角等蔬菜，由于生長速度快，農(nóng)藥利用率較高，時常會出現(xiàn)農(nóng)藥殘留問題，所以針對這些蔬菜，更應(yīng)充分做好檢測工作。

6 ? 結(jié)語

對蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)常見問題進(jìn)行分析探討，希望能為相關(guān)工作人員提供一些啟示作用。結(jié)合工作實際，采取切實有效的措施進(jìn)行應(yīng)對，認(rèn)真做好檢測前、檢測實施以及善后等各方面工作，確保檢測結(jié)果精準(zhǔn)性，最大程度地保證蔬菜質(zhì)量安全。

參考文獻(xiàn)：

[ 1 ] 范小偉，戴軍力.蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)綜述[J].蔬菜，2019（8）：28-32.

[ 2 ] 許國文.蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)[J].蔬菜，2019（8）：61-63.

[ 3 ] 李凌云，李家經(jīng)，翟國雨.酶抑制法在蔬菜農(nóng)藥殘留測定中存在的問題及對策[J].農(nóng)家參謀，2019（16）：84.

[ 4 ] 蔡文海.農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)要點分析[J].南方農(nóng)業(yè)，2018，12（9）：83-84.