張鵬飛，王茂，冉兵#

陜西中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院1超聲科，2腫瘤乳腺外科，陜西 咸陽(yáng) 712000

乳腺癌是臨床婦科上常見(jiàn)的一種惡性疾病，近年來(lái)，其發(fā)病率呈不斷增高趨勢(shì)，所以早期診斷治療對(duì)乳腺癌患者具有的重要意義。超聲、X線(xiàn)檢查、CT等影像學(xué)手段是臨床診斷乳腺癌的主要方法，其中超聲因操作簡(jiǎn)便、可重復(fù)性強(qiáng)成為首選篩查手段，尤其是高頻彩色多普勒血流成像（color Doppler flow imaging，CDFI）。在腫瘤發(fā)展過(guò)程中，分子生物具有重要意義，可在一定程度上影響腫瘤的形態(tài)、惡性程度等，進(jìn)而影響其影像學(xué)征象。國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，雌激素受體（estrogen receptor，ER）、人表皮生長(zhǎng)因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）、p53及Ki-67等免疫組織化學(xué)指標(biāo)與乳腺癌診治、預(yù)后關(guān)系密切。本研究旨在探討乳腺癌CDFI征象與ER、HER2、p53及Ki-67的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年9月至2020年12月陜西中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院收治的乳腺癌患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理組織學(xué)檢查確診為乳腺癌；②無(wú)超聲檢查禁忌證；③未進(jìn)行放療、化療等治療；④臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①孕婦；②伴精神性疾病，有意識(shí)、溝通障礙；③合并其他臟器惡性腫瘤、器官衰竭等嚴(yán)重疾?。虎馨檠h(huán)功能?chē)?yán)重障礙、肝腎功能?chē)?yán)重?fù)p傷。根據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入76例乳腺癌患者，其中年齡26～86歲，平均（44.33±8.24）歲。

1.2 檢查方法

1.2.1 超聲檢查 選用西門(mén)子彩色多普勒超聲診斷儀，頻率為9～11 MHz的線(xiàn)陣探頭?；颊呔浞直┞缎夭亢鸵父C，行常規(guī)二維超聲多切面掃描，觀(guān)察病灶回聲、位置、大小等情況，利用CDFI觀(guān)察血流情況。

1.2.2 免疫組織化學(xué)法 取乳腺癌患者手術(shù)切除24 h內(nèi)的乳腺癌組織，使用4%甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋，4 μm連續(xù)厚切片。免疫組織化學(xué)染色鏈霉抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶（streptavidin-peroxidase，SP）法檢測(cè)ER、HER2、p53、Ki-67，分別用兔抗人ER及鼠抗人HER2、p53、Ki-67單克隆抗體，染色試劑購(gòu)自福建邁新生物科技制劑公司。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞百分比、染色強(qiáng)度評(píng)分進(jìn)行染色結(jié)果判斷，其中陽(yáng)性細(xì)胞百分比評(píng)分：無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞為0分，＜10%為1分，10%～50%為2分，＞50%為3分；染色強(qiáng)度評(píng)分：無(wú)色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。陽(yáng)性細(xì)胞百分比評(píng)分與染色強(qiáng)度評(píng)分的乘積為總分，總分≥3分即判斷為陽(yáng)性。

1.3 觀(guān)察指標(biāo)

觀(guān)察患者的CDFI特征（腫瘤直徑、邊緣毛刺征、微鈣化、血流分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、后方回聲衰減），并分析其與ER、HER2、p53及Ki-67表達(dá)的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 ER、HER 2、 p53及Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)情況

乳腺癌患者ER、HER2、p53及Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率分別為 73.68%（56/76）、60.53%（46/76）、48.68%（37/76）、40.79%（31/76），其中ER陽(yáng)性表達(dá)率最高，Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率最低。

2.2 不同超聲特征的乳腺癌患者乳腺癌組織中ER、HER 2、 p53及Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率的比較

不同腫瘤直徑、后方回聲衰減情況的乳腺癌患者乳腺癌組織中ER、HER2、p53及Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

P

＞0.05）。有邊緣毛刺征、血流分級(jí)為0～1級(jí)、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者乳腺癌組織中ER陽(yáng)性表達(dá)率均高于無(wú)邊緣毛刺征、血流分級(jí)為2～3級(jí)、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

χ

=29.545、8.924、30.456，

P

＜0.05）。有微鈣化、血流分級(jí)為2～3級(jí)、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者乳腺癌組織中HER2陽(yáng)性表達(dá)率均高于無(wú)微鈣化、血流分級(jí)為0～1級(jí)、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

χ

=29.690、57.199、16.374，

P

＜0.05）。血流分級(jí)為2～3級(jí)、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者乳腺癌組織中p53及Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率均高于血流分級(jí)為0～1級(jí)、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

χ

=17.620、4.699，

χ

=29.127、8.440，

P

＜0.05）。（表1）

表1 不同超聲特征的乳腺癌患者乳腺癌組織中ER、HER 2、 p53及Ki-67陽(yáng)性表達(dá)情況（ n=76）

2.3 不同超聲特征與乳腺癌患者乳腺癌組織中ER、HER 2、 p53及Ki-67陽(yáng)性表達(dá)的相關(guān)性分析

乳腺癌患者乳腺癌組織中ER陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤邊緣毛刺征、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈正相關(guān)（

P

＜0.05），與血流分級(jí)呈負(fù)相關(guān)（

P

＜0.05），而與腫瘤直徑、微鈣化、后方回聲衰減均無(wú)相關(guān)性（

P

＞0.05）。乳腺癌患者乳腺癌組織中HER2陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤微鈣化、血流分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈正相關(guān)（

P

＜0.05），而與腫瘤直徑、邊緣毛刺征、后方回聲衰減均無(wú)相關(guān)性（

P

＞0.05）。乳腺癌患者乳腺癌組織中p53、Ki-67陽(yáng)性表達(dá)與血流分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈正相關(guān)（

P

＜0.05），而與腫瘤直徑、邊緣毛刺征、微鈣化、后方回聲衰減均無(wú)相關(guān)性（

P

＞0.05）。（表2）

表2 不同超聲特征與乳腺癌患者乳腺癌組織中ER、HER 2、 p53及Ki-67陽(yáng)性表達(dá)的相關(guān)性分析

3 討論

腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為與其分子生物學(xué)之間存在一定的聯(lián)系，對(duì)腫瘤的影像學(xué)特征有不同程度的影響，ER、HER2、p53及Ki-67等是目前臨床上評(píng)估乳腺癌生物學(xué)行為的常見(jiàn)標(biāo)志物。故認(rèn)為，上述指標(biāo)表達(dá)情況與乳腺癌超聲特征可能存在某種聯(lián)系。

ER是調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的雌激素受體，可刺激乳腺管生長(zhǎng)。相關(guān)研究證實(shí)，腫瘤細(xì)胞的分化程度較高時(shí)，ER陽(yáng)性表達(dá)率會(huì)提高，此時(shí)進(jìn)行內(nèi)分泌治療會(huì)達(dá)到很好的治療效果，預(yù)后亦較好。本研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌腫瘤直徑與ER表達(dá)無(wú)明顯相關(guān)性。由此可見(jiàn)，惡性腫瘤直徑并不隨其惡性程度升高而增加。而伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及毛刺征者ER陽(yáng)性表達(dá)率更高，且相關(guān)性分析顯示，ER表達(dá)與上述特征具有一定相關(guān)性，說(shuō)明伴邊緣毛刺征、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者ER陽(yáng)性表達(dá)率較高，腫瘤生長(zhǎng)依舊受激素調(diào)控，適合進(jìn)行內(nèi)分泌治療。于喜法等指出，乳腺癌腫瘤伴邊緣毛刺征，ER陽(yáng)性表達(dá)率更高，可預(yù)示腫瘤侵襲性行為低，臨床治療效果好，預(yù)后更佳。HER2是人體表皮生長(zhǎng)因子之一，主要參與細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖及分化等過(guò)程，可作為預(yù)測(cè)腫瘤預(yù)后的指標(biāo)之一。靳鳳梅等報(bào)道發(fā)現(xiàn)，乳腺原位癌鈣化常見(jiàn)于HER2的過(guò)度表達(dá)，HER2無(wú)表達(dá)時(shí)，多無(wú)鈣化。本研究中HER2陽(yáng)性表達(dá)者伴微鈣化率顯著高于無(wú)微鈣化者，且微鈣化與HER2陽(yáng)性表達(dá)呈正相關(guān)，與上述報(bào)道相符。

p53

是一種抑癌基因，其失活對(duì)腫瘤形成起重要作用，

p53

基因突變與乳腺癌的發(fā)生密切相關(guān)。溫瑜鵬等發(fā)現(xiàn)，p53陽(yáng)性表達(dá)與乳腺癌直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定關(guān)系。但本研究結(jié)果顯示，p53與乳腺癌直徑無(wú)關(guān)，與文獻(xiàn)報(bào)道不符，推測(cè)可能與操作者技術(shù)、納入樣本量等因素有關(guān)。Ki-67是一種核抗原，Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率高者腫瘤細(xì)胞惡性程度高，侵襲性強(qiáng)，預(yù)后較差。本研究結(jié)果顯示，伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是目前公認(rèn)的預(yù)測(cè)乳腺癌預(yù)后的一個(gè)關(guān)鍵指標(biāo)，而Ki-67的表達(dá)可導(dǎo)致細(xì)胞有絲分裂增強(qiáng)，進(jìn)而增加腫瘤發(fā)生其他臟器轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)。

乳腺癌是典型的血管依賴(lài)性病變，乳腺癌新生血管的存在是CDFI顯像的病理學(xué)基礎(chǔ)。從乳房腫瘤CDFI血流豐富程度來(lái)看，惡性程度多為2～3級(jí)，良性多為0～1級(jí)。本研究結(jié)果顯示，ER陽(yáng)性表達(dá)者0～1級(jí)者多，而HER2、p53、Ki-67陽(yáng)性表達(dá)者以2～3級(jí)居多，相關(guān)性結(jié)果亦顯示，血流分級(jí)與ER陽(yáng)性表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，與HER2、p53、Ki-67均呈正相關(guān)，提示ER低表達(dá)，HER2、p53、Ki-67高表達(dá)者臨床治療效果、預(yù)后可能更差。

綜上所述，乳腺癌患者CDFI征象與ER、HER2、p53及Ki-67陽(yáng)性表達(dá)存在一定的相關(guān)性，在預(yù)測(cè)乳腺癌生物學(xué)特性中具有一定指導(dǎo)價(jià)值。