遲夢(mèng)宇 陳子雷 毛江勝 盧琦 張艷 李慧冬

摘要 [目的]建立測(cè)定甲氧蟲(chóng)酰肼在番茄上殘留的高效液相色譜檢測(cè)方法。[方法]樣品經(jīng)過(guò)酸化的甲醇高速勻漿提取，經(jīng)過(guò)二氯甲烷萃取，采用甲醇∶乙腈∶水（30∶55∶15，V/V）為流動(dòng)相，利用symmetry C18柱（4.0 mm×250 mm）進(jìn)行檢測(cè)。[結(jié)果]在0.01、0.50、2.00 mg/kg 3個(gè)添加濃度水平下，甲氧蟲(chóng)酰肼在番茄上的回收率為85%～105%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.6%～1.4%。相關(guān)系數(shù)（r）為0.999 8。甲氧蟲(chóng)酰肼在番茄上的最低檢出限為0.01 mg/kg，最小檢出量為2 ng。在實(shí)際樣品檢測(cè)中檢測(cè)出有甲氧蟲(chóng)酰肼的殘留，但均未超過(guò)我國(guó)規(guī)定的最大殘留限量值。[結(jié)論]在實(shí)際樣品檢測(cè)中，該方法能夠快速、準(zhǔn)確地對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，為大量樣品的檢測(cè)提供了數(shù)據(jù)方法。

關(guān)鍵詞 高效液相色譜法;甲氧蟲(chóng)酰肼;番茄;農(nóng)藥殘留

中圖分類(lèi)號(hào) TS 207.5+3? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 0517-6611（2021）23-0201-02

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.23.056

Determination

of Methoxyfenozide Residues on Tomatoes by High Performance Liquid Chromatography

CHI Meng-yu1，2，3，CHEN Zi-lei1，2，3，MAO Jiang-sheng1，2，3 et al （1.Institute of Quality Standards & Testing Technology for Agro-Products of Shandong Academy of Agricultural Sciences，Jinan，Shandong 251000;2.Shandong Key Laboratory of Testing Technology for Food Quality & Security，Jinan，Shandong 251000;3.Monitor Inspection &Test Center of Foods Quality of Ministry of Agricultural and Rural Affairs （Jinan），Jinan，Shandong 251000）

Abstract [Objective] To establish a high performance liquid chromatography （HPLC） for the determination of methoxenozide residues on tomatoes.[Method]Methanol：acetonitrile：water （30∶55∶15，V/V） was used as the mobile phase，and a symmetry C18 column （4.0 mm×250 mm） was used for detection.[Result]At three additive concentration levels of 0.01，0.50，and 2.00 mg/kg，the recovery of methoxenozide on tomatoes was 85%-105%，and the relative standard deviation （RSD） was 0.6%-1.4%.The correlation coefficient （r） was 0.999 8.The minimum detection limit of methoxenozide on tomatoes was 0.01 mg/kg，and the minimum detection amount was 2 ng.The methoxenozide residues were detected in the actual samples，but none of them exceeded the maximum residue limit value stipulated by China.[Conclusion]In actual sample detection，this method could quickly and accurately detect samples，providing a data method for the detection of a large number of samples.

Key words High performance liquid chromatography （HPLC）;Methoxyfenozide;Tomato;Pesticide residue

基金項(xiàng)目

山東省農(nóng)業(yè)重大應(yīng)用技術(shù)創(chuàng)新項(xiàng)目（KY-NYZDJSCX2016）。

作者簡(jiǎn)介 遲夢(mèng)宇（1993—），女，山東青島人，碩士，從事農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)研究。通信作者，副研究員，從事農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究。

收稿日期 2021-04-16

甲氧蟲(chóng)酰肼是由美國(guó)陶氏益農(nóng)公司研發(fā)的一種新型的雙酰肼類(lèi)昆蟲(chóng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，它不但能夠?qū)е吕ハx(chóng)異常蛻皮抑制進(jìn)食，而且還有一定的殺卵活性[1-3]，對(duì)鱗翅目害蟲(chóng)具有很好的防治作用。目前對(duì)甲氧蟲(chóng)酰肼的殘留研究國(guó)內(nèi)外均有報(bào)道[4-9]，但是在番茄上的殘留研究目前國(guó)內(nèi)還鮮有報(bào)道。筆者以番茄為樣品，建立了測(cè)定甲氧蟲(chóng)酰肼在番茄中殘留量的液相色譜檢測(cè)法，為快速、準(zhǔn)確地測(cè)定番茄中甲氧蟲(chóng)酰肼殘留提供了有效的數(shù)據(jù)方法，滿(mǎn)足了農(nóng)藥殘留的要求。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

高壓液相色譜儀，Waters公司，Alliance2695泵，2487紫外檢測(cè)器;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，德國(guó) Heidolph laborota 4000;離心機(jī)，北京醫(yī)用離心機(jī)廠(chǎng)LD5-2A。甲氧蟲(chóng)酰肼標(biāo)樣（德國(guó)，純度 98.9%）;甲醇（色譜純）;乙腈（色譜純）;重蒸水;二氯甲烷（分析純）;無(wú)水硫酸鈉（分析純）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品處理。稱(chēng)取樣品15.0 g加至80 mL離心管中，加入40 mL甲醇∶0.1 mol/L HCl（4∶1，V/V）混合溶液振蕩提取10 min，10 000 r/h勻漿破碎1 min，然后離心5 min，取清液于分液漏斗中，殘?jiān)偌尤?0 mL甲醇∶0.1 mol/L HCl混合溶液，重復(fù)提取操作2次。

1.2.2 凈化。

將2次提取的上清液合并加至分液漏斗中，用二氯甲烷重復(fù)萃取2次，過(guò)無(wú)水硫酸鈉。40 ℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)二氯甲烷至干，凈化，甲醇定容，過(guò)膜，待測(cè)。

1.2.3 色譜條件。色譜柱為Waters symmetry C18柱（4.0 mm×250 mm）;流動(dòng)相為水∶甲醇∶乙腈（15∶30∶55，V/V）; 柱溫30 ℃;流速1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)200 nm;進(jìn)樣量10 μL。相對(duì)保留時(shí)間8 min。

1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。

準(zhǔn)確稱(chēng)取0.01 g甲氧蟲(chóng)酰肼標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶液定容至10 mL棕色容量瓶中，配制成濃度為1 000 mg/L標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液。將甲氧蟲(chóng)酰肼標(biāo)準(zhǔn)貯備液用甲醇溶液稀釋配制成濃度為0.01、0.10、0.20、0.50、1.00 mg/kg的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按“1.2.3”色譜條件進(jìn)行分析，測(cè)定峰面積，以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度（X，mg/L）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析[10]。

1.2.5 添加回收試驗(yàn)。

稱(chēng)取15個(gè)番茄空白樣品各10 g，向空白樣品中添加3個(gè)不同水平的甲氧蟲(chóng)酰肼標(biāo)準(zhǔn)溶液，使最終添加濃度分別為0.01、0.50、2.00 mg/kg，每個(gè)濃度設(shè)置5個(gè)重復(fù)，按照“1.2.1”和“1.2.2”樣品處理和凈化的方法進(jìn)行處理，按“1.2.3”色譜條件對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)分析，計(jì)算加標(biāo)回收率。

2 結(jié)果與分析

2.1 流動(dòng)相的選擇 選擇甲醇-乙腈-水的梯度作為流動(dòng)相，不僅能提高分離度，還能使農(nóng)藥與樣品中的雜質(zhì)完全分離開(kāi)，避免雜質(zhì)峰影響[6]。確定好流動(dòng)相后對(duì)流動(dòng)相的不同配比進(jìn)行比較選擇。在乙腈體積為55%時(shí)，分離效果較好，但出峰時(shí)間長(zhǎng)[10]。對(duì)甲醇和水的比例進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，在甲醇∶乙腈∶水的比例為30∶55∶15時(shí)，能夠使色譜分離效果最好，從而獲得峰型好、靈敏度高的色譜峰（圖1）。

2.2 線(xiàn)性關(guān)系的確立 將稀釋好的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液按“1.2.3”色譜條件進(jìn)行分析，以峰面積（Y）和質(zhì)量濃度（X，mg/L）為坐標(biāo)軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析，得出線(xiàn)性回歸方程為Y=14 299.46X+1 871.79，線(xiàn)性回歸系數(shù)（r）為0.999 8（圖2）。結(jié)果表明甲氧蟲(chóng)酰肼的濃度在0.01～1.00 mg/L與峰面積呈線(xiàn)性關(guān)系，且線(xiàn)性關(guān)系良好，符合相關(guān)分析要求。

2.3 方法回收率和精密度

在沒(méi)有檢出的番茄樣品中分別添加不同含量水平的甲氧蟲(chóng)酰肼標(biāo)準(zhǔn)溶液，使最終添加濃度分別為0.01、0.50、2.00 mg/kg，每個(gè)濃度設(shè)置5個(gè)重復(fù)。按照“1.2.1”和“1.2.2”樣品處理和凈化方法對(duì)樣品進(jìn)行處理后進(jìn)樣，得到添加回收?qǐng)D譜（圖3～4）。計(jì)算得到的加標(biāo)回收率為85%～105%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.6%～1.4%，表明該方法的準(zhǔn)確度和精密度良好，符合農(nóng)藥殘留檢測(cè)要求。甲氧蟲(chóng)酰肼在番茄上的最低檢出限為0.01 mg/kg，最小檢出量為2 ng。

2.4 實(shí)際樣品的檢測(cè)

在濟(jì)南市場(chǎng)隨機(jī)抽取了番茄樣品，按照該研究建立的樣品前處理方法和檢測(cè)方法對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，其中有番茄樣品檢測(cè)出有甲氧蟲(chóng)酰肼殘留，檢出量分別為0.020、0.028、0.050、0.031、0.022、0.043 mg/kg，均小于國(guó)家規(guī)定的最大殘留限量值（2 mg/kg），說(shuō)明市場(chǎng)上銷(xiāo)售的番茄相對(duì)比較安全。

3 結(jié)論

該試驗(yàn)研究并建立了檢測(cè)番茄中甲氧蟲(chóng)酰肼殘留量的高效液相色譜方法。通過(guò)酸化的甲醇提取，二氯甲烷萃取，流動(dòng)相甲醇、乙腈、水的比例為30∶55∶15，檢測(cè)到的色譜峰分離效果好、準(zhǔn)確度高。在優(yōu)化的最佳條件下，該分析方法的平均回收率為85%～105%，最低檢出限為0.01 mg/kg，最小檢出量為2 ng，滿(mǎn)足殘留檢測(cè)要求。在實(shí)際樣品檢測(cè)中該方法能夠快速、準(zhǔn)確地對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，為大量樣品的檢測(cè)提供了數(shù)據(jù)方法。

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