李翠平

（河南省舞陽縣人民醫(yī)院病理科 舞陽462400）

乳腺癌是威脅女性生命健康、影響女性生活質(zhì)量的惡性腫瘤，近年來發(fā)病率不斷上升，已有年輕化趨勢[1]。有研究結(jié)果顯示，20%～30%的乳腺癌患者可見人類表皮生長因子受體-2（Her-2）過度表達(dá)，是與乳腺癌預(yù)后密切相關(guān)的基因之一[2]。而作為檢測腫瘤細(xì)胞增殖活性的可靠指標(biāo)之一，Ki67在多種惡性腫瘤中過度表達(dá)[3]。本研究探討Her-2和Ki67在浸潤性乳腺癌中的表達(dá)情況及臨床意義，旨在為浸潤性乳腺癌的臨床治療提供一定理論依據(jù)?，F(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年6月～2019年4月我院經(jīng)手術(shù)切除的浸潤性乳腺癌組織65例（均經(jīng)病理檢查證實），以其距癌組織5 cm以上的癌旁正常乳腺組織（病理檢查證實無癌性病變）作為對照。所有患者均為女性，首次確診，無放化療等抗癌史。排除合并其他惡性腫瘤、肝腎心肺功能不全者，孕婦及哺乳期女性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批。

1.2 研究方法 組織切片脫蠟、水化，將制作好的組織芯片蠟塊進(jìn)行4μm的連續(xù)切片。免疫組織化學(xué)EnVision二步法檢測Her-2以及Ki67二者的表達(dá)情況。陽性對照為試劑盒所提供的已知陽性表達(dá)的組織，陰性對照則以PBS替代。操作嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。Her-2結(jié)果判定：細(xì)胞膜著色，（+++）表示＞10%細(xì)胞膜呈現(xiàn)強、完整著色，（++）表示≤10%細(xì)胞膜呈現(xiàn)強、完整著色，（+）表示＞10%細(xì)胞膜呈現(xiàn)微弱著色，（－）表示細(xì)胞膜無著色或＜10%細(xì)胞膜呈現(xiàn)微弱著色，僅以（+++）為陽性表達(dá)。Ki67結(jié)果判定：以細(xì)胞核著色為陽性細(xì)胞，陽性細(xì)胞數(shù)＜25%為弱陽性（+），25%～50%為陽性（++），＞50%為強陽性（+++），若不著色則為陰性（－）。

1.3 觀察指標(biāo)（1）比較浸潤性乳腺癌組織及癌旁正常乳腺組織中Her-2和Ki67表達(dá)水平。（2）分析Her-2和Ki67表達(dá)水平與患者年齡、TNM分期、腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等的關(guān)系及二者相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 數(shù)據(jù)采用SPSS23.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析處理，計量資料以（±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗，相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 浸潤性乳腺癌組織和癌旁正常乳腺組織中Her-2和Ki67表達(dá)水平比較 浸潤性乳腺癌組織中Her-2陽性表達(dá)率（58.46%，38/65）、Ki67總陽性表達(dá)率（64.62%，42/65），高于癌旁正常乳腺組織Her-2陽性表達(dá)率（0.00%，0/65）、Ki67陽性表達(dá)率（0.00%，0/65），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 Her-2和Ki67表達(dá)水平與浸潤性乳腺癌臨床特征的關(guān)系分析 Her-2和Ki67在浸潤性乳腺癌中的表達(dá)與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)（P＜0.05），與年齡、腫瘤直徑無關(guān)（P＞0.05）。見表1。

表1 Her-2和Ki67表達(dá)水平與浸潤性乳腺癌臨床特征的關(guān)系分析

續(xù)表1

2.3 浸潤性乳腺癌中Her-2和Ki67表達(dá)的相關(guān)性分析 Her-2和Ki67在浸潤性乳腺癌中的表達(dá)呈明顯正相關(guān)（r=0.369，P＜0.05）。

3 討論

在過去20年內(nèi)，乳腺癌發(fā)病率在許多國家和地區(qū)均呈持續(xù)增長趨勢，我國乳腺癌發(fā)病率近年來也一直居高不下[4～5]。浸潤性乳腺癌指的是癌細(xì)胞已穿破乳腺導(dǎo)管或小葉腺泡的基底膜并且侵入間質(zhì)，其預(yù)后相較于非浸潤性乳腺癌更差[6～7]。如何對浸潤性乳腺癌患者預(yù)后進(jìn)行準(zhǔn)確且全面的評估，并據(jù)此制定最佳治療方案，仍是目前臨床重要研究方向。而乳腺癌的發(fā)生及其發(fā)展是多基因變異累積逐漸演變的過程，了解該過程中原癌基因、抑癌基因以及其相關(guān)蛋白表達(dá)，不僅有利于疾病的診斷、治療，也能極大改善患者的預(yù)后。

原癌基因Her-2受體位于細(xì)胞膜上，在許多腫瘤細(xì)胞中呈高表達(dá)。體外細(xì)胞培養(yǎng)研究結(jié)果也顯示，Her-2的高表達(dá)對腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及惡化有著明顯的促進(jìn)作用。Her-2本身沒有活性，需要形成二聚體才能參與細(xì)胞增殖信號傳導(dǎo)，促進(jìn)細(xì)胞增殖周期縮短以及惡性表現(xiàn)增強。目前對與Her-2有高親和力的特異性配體尚未發(fā)現(xiàn)，但其能夠在無特異性配體情況下，通過和其他Her受體結(jié)合，以異源性二聚體形式發(fā)揮信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。相較于同源二聚體而言，異源二聚體對腫瘤細(xì)胞有著更大的刺激生長活性，有更強的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)能力。作為現(xiàn)階段臨床所廣泛應(yīng)用的細(xì)胞增殖標(biāo)記物之一，Ki67屬于核抗原[8]，僅存在于增殖細(xì)胞中，即在細(xì)胞周期中除G0期外，在G1、S1、G2、M期均有表達(dá)，是對細(xì)胞增殖活性檢測的最可靠的指標(biāo)，能夠?qū)δ[瘤細(xì)胞增殖活性予以有效反映，對惡性腫瘤的發(fā)展以及預(yù)后評估有著重要意義。

本研究結(jié)果顯示，浸潤性乳腺癌組織中Her-2陽性表達(dá)率（58.46%，38/65）、Ki67總陽性表達(dá)率（64.62%，42/65），高于癌旁正常乳腺組織Her-2陽性 表 達(dá) 率（0.00%，0/65）、Ki67總 陽 性 表 達(dá) 率（0.00%，0/65）（P＜0.05），證實了Her-2、Ki67可作為乳腺惡性腫瘤的判斷指標(biāo)。通過對上述指標(biāo)與臨床病例特征關(guān)系進(jìn)行分析可知，Her-2和Ki67在浸潤性乳腺癌中的表達(dá)與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)（P＜0.05），與年齡、腫瘤直徑無關(guān)（P＞0.05），提示TNM分期越晚及存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時Her-2和Ki67表達(dá)越高。這可能是由于在Her-2和Ki67高表達(dá)狀態(tài)下，加劇了癌細(xì)胞對淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的侵襲以及對乳腺小葉或乳腺間質(zhì)成分的浸潤，從而促進(jìn)淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移、TNM分期的增加。Her-2和Ki67表達(dá)陽性率均達(dá)50%以上，Spearman相關(guān)分析顯示，Her-2和Ki67在浸潤性乳腺癌中的表達(dá)呈明顯正相關(guān)（r=0.369，P＜0.05）。因此，聯(lián)合檢測Her-2和Ki67表達(dá)水平能夠為浸潤性乳腺癌患者個體化治療、療效判定以及預(yù)后判斷提供科學(xué)依據(jù)。